Em 2020, a Organização Mundial da Saúde (OMS) declarou pandemia global devido à síndrome respiratóriaaguda grave causada pelo coronavírus 2 (SARS-CoV-2), responsável por milhões de mortes em todo o mundo. Diante desse cenário, intensificaram-se os esforços para o desenvolvimento de vacinas e terapias farmacológicas. Entre as alternativas terapêuticas, os inibidores de protease têm se destacado por sua capacidade de interferir na atividade catalítica de enzimas proteolíticas, desempenhando um papel fundamental na regulação de processos infecciosos e inflamatórios. As serina-proteases, em especial, participam ativamente no processo de entrada do SARS-CoV-2 nas células hospedeiras e na intensificação da resposta imunológica desregulada, incluindo a tempestade de citocinas observada em casos graves de COVID-19. Plantas como Amaranthus caudatus e Copaifera langsdorffii são fontes de inibidores de serina-proteases (ACTI e CTI I-II, respectivamente), cujas propriedades farmacológicas incluem atividades anti-inflamatória, antitumoral e antiviral. Neste contexto, este trabalho teve como objetivos a purificação e caracterização dos inibidores ACTI e CTI I-II, bem como o desenvolvimento de um sistema de expressão heteróloga desses compostos no fungo filamentoso Penicillium chrysogenum utilizando a tecnologia CRISPR/Cas9. Além disso, foram avaliados os efeitos desses inibidores sobre o SARS-CoV-2 e linhagens de células tumorais, visando contribuir para a busca de terapias alternativas, acessíveis e de amplo espectro para o tratamento da COVID-19 e de cânceres.