Banca de QUALIFICAÇÃO: PRISCILLA OLIVEIRA GIL

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : PRISCILLA OLIVEIRA GIL
DATA : 31/05/2022
HORA: 13:30
LOCAL: meet.google.com/gmi-gyvi-tsh
TÍTULO:

PALAVRAS-CHAVES:

Enterocina B, Bioinformática, Câncer, Candidiase.

PÁGINAS: 62
RESUMO:

Enterococos são bactérias gram-positivas, não formadoras de esporos, encontradas no trato gastrointestinal, muito utilizadas como probióticos e na produção de alimentos fermentados. Estudos anteriores mostraram que as enterocinas encontradas nestes microrganismos podem exercer atividades antitumoral, antimicrobianas, anti-candidas e antioxidantes, entre outras. A enterocina B, sintetizada por E. faecium, é uma importante bacteriocina da subclasse IIc, que já demonstrou ser eficaz contra bactérias patogênicas, vírus e células tumorais. O presente estudo tem por finalidade a expressão heteróloga da enterocina B em células de E. coli, a purificação através de uma coluna de afinidade, a caracterização a partir de ferramentas de bioinformática e avaliação do seu efeito antitumoral e antifúngico em células de carcinoma de pulmão A549 e cepas de Candida sp., respectivamente. Os resultados obtidos a partir da análise de bioinformática demonstram que a sequência peptídica apresenta 53 aminoácidos, pI teórico de 9.25, peso molecular de 5,4 kDa e que pode sofrer glicosilação nas Serinas da posição 17 e 50, e fosforilação na serina da posição 17. Sua localização celular é citoplasmática, é solúvel e não apresenta peptídeo sinal na sequência analisada. Possui 18 aminoácidos hidrofóbicos, 18 hidrofílicos, 7 positivos e 3 negativos. A função predita analisada pelo programa InterPro não foi encontrada, provavelmente devido à falta de depósito de suas funções no banco de dados. A análise genômica sugeriu que dentre os 74 genomas da Enterococcus depositados no NCBI, a sequência peptídica da enterocina B só foi encontrada nas cepas E. faecium e E. mundtii. Nos ensaios in vitro foi possível observar que o peptídeo foi expresso totalmente em forma de corpos de inclusão em células de E. coli BL-21, na temperatura de 37°C, e de forma parcialmente solúvel apenas na utilização de células de E. coli ArcticExpress, na temperatura de 16°C. A purificação ocorreu de forma favorável ao utilizar 30 mM e 500 mM de Imidazol na lavagem e eluição, respectivamente.  A continuação dos experimentos deste trabalho ainda é necessária para concluir a ação antitumoral e antifúngica da enterocina B.

MEMBROS DA BANCA:
Interna - 1716846 - VANESSA FARIA CORTES
Externo à Instituição - LEONARDO VAZQUEZ - UIUC
Externa à Instituição - SIMONE DA FONSECA PIRES - IFSUDESTEMG