DETERMINAÇÃO IN SILICO E IN VITRO DA ATIVIDADE ANTIPLASMODIAL DE COMPOSTOS DE ORIGEM NATURAL E

SINTÉTICA

Malária; N-acilhidrazonas; Esponjas Marinhas; Plasmodium falciparum purine nucleoside phosphorylase; Plasmodium falciparum orotidina 5'-monofosfato descarboxilase.

A malária continua a ser um grave problema de saúde pública, demandando, com urgência, o desenvolvimento de novos medicamentos, devido à crescente resistência dos parasitos aos tratamentos antimaláricos disponíveis. Neste estudo, inicialmente, foram avaliados in vitro 26 extratos de nove esponjas marinhas coletadas em Salvador, Bahia, Brasil, quanto à atividade antiplasmodial e citotóxica. Todos os extratos demonstraram atividade contra o Plasmodium falciparum, cepa resistente à cloroquina (W2), com IC50 determinado pelo teste tradicional variando de 0,28 a 22,34 μg/mL e baixa citotoxicidade contra a linhagem aderente derivada de

fibroblastos de pulmão humano (ATCC® CCL-95.1™) (IC50 > 89 μg/mL). Posteriormente, compostos sintéticos da classe das N-acilhidrazonas (AH1 – AH7) foram analisados. De acordo com os parâmetros ideais para o desenvolvimento de novos antimaláricos, os compostos AH1, AH2, AH4 e AH5 demonstraram atividade

contra o Plasmodium falciparum, cepa resistente à cloroquina, com o IC50 variando de 0,07 a 2,15 µM e ausência de citotoxicidade contra a linhagem de fibroblasto (ATCC® CCL-95.1™) (IC50 > 100 µM). Os compostos AH5, AH4 e AH1 apresentaram, respectivamente, os melhores valores de IC50 (0,07 ± 0,07 µM), (0,09 ± 0,05 µM), (0,19 ± 0,10 µM) e alto índice de seletividade (IS > 100). Com o objetivo de compreender o possível mecanismo de ação, os compostos N-acilhidrazônicos selecionados foram submetidos a um processo de triagem virtual inversa, utilizando o banco Brazilian Malaria Molecular Targets (BraMMT). A partir dos valores de energia gerados, foi possível verificar que o composto AH5 obteve energia inferior ao ligante cristalográfico para 12 alvos, apresentando baixa seletividade. Em contrapartida, o composto AH4 revelou uma energia de ligação inferior somente em relação ao ligante cristalográfico do alvo Plasmodium falciparum purine nucleoside phosphorylase (PfPNP) (PDB: 3PHC). Por outro lado, o composto AH1 não apresentou uma energia de ligação inferior em comparação com os ligantes cristalográficos. Adicionalmente, os compostos AH4 e AH5 atenderam aos critérios in silico de propriedades físico-químicas compatíveis com boa biodisponibilidade oral. Continuando a pesquisa em busca de novos antimaláricos, a terceira etapa explorou a biossíntese de pirimidinas no Plasmodium falciparum. O alvo Plasmodium falciparum orotidina 5'-monofosfato descarboxilase (PfOMPDC) (PDB: 3N3M) foi selecionado através da plataforma BraMMT. O substrato OMP da enzima 3N3M foi utilizado como referência na busca por compostos em bancos previamente conhecidos. Esse processo de triagem in silico empregou a plataforma Pharmit, junto ao banco de dados ZINC, resultando na seleção de sete compostos que possuem potencial significativo para investigações futuras. Os compostos exibiram propriedades farmacocinéticas satisfatórias com potencial de biodisponibilidade oral.