A doença de Chagas, também conhecida como Tripanossomíase Americana, é considerada
uma doença tropical negligenciada parasitária, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi.
A infecção é endêmica em 21 países da América Latina, onde a sua principal via de
transmissão é através do contato com as fezes de insetos triatomíneos infectados. Atualmente,
entre 6 e 8 milhões de pessoas estão infectadas e 75 milhões possuem risco de contrair a
doença. No Brasil, a doença afeta cerca de 1,9 e 4,6 milhões de pessoas e resulta em mais de 4
mil mortes anuais. Caracterizada como uma doença subnotificada, apenas uma a cada dez
pessoas é diagnosticada, demonstrando que ainda existe um grande gargalo na detecção da
doença. Sendo assim, o desenvolvimento de novos testes de diagnóstico é uma prioridade,
uma vez que ainda não existe um padrão ouro para detectar as diferentes fases da doença,
sendo necessário pelo menos dois testes consecutivos para identificar a presença da infecção.
Diante disso, é fundamental a busca de novos alvos imunogênicos, que sejam eficazes em
diagnosticar a doença de Chagas em qualquer estágio e em diferentes contextos e populações.
A fim de superar as limitações dos testes atuais, o objetivo desse trabalho foi avaliar a
reatividade de oito peptídeos sintéticos, P1, P2, P3, P4, P5, P6, P7 e P8, para elaboração de
um kit de diagnóstico, os quais foram selecionados por bioinformática em. Estudos anteriores
conduzidos pelo nosso grupo de pesquisa. Ao realizar o ensaio de ELISA para triage inicial,
foi observado que apenas o P6 reagiu com as amostras positivas de indivíduos portadores da
doença e exibiu provável diferença com as amostras negativas de indivíduos saudáveis.
Posteriormente, foi observado que o P6 foi capaz de reagir com as amostras positivas
empregando diferentes concentrações, ficando definida a concentração de 100 ng no
protocolo de padronização. Além disso, quando comparado com uma proteína recombinante
multiepitopo (GSM), o P6 obteve 95% de sensibilidade e 100% de especificidade, enquanto a
GSM demonstrou 100% de sensibilidade e 100% de especificidade. Nos ensaios para
definição do tempo de incubação, o P6 demonstrou reatividade com grande parte das amostras
positivas utilizando tanto 1 hora de incubação quanto 30 minutos. Esses resultados
demonstraram que o P6 é um potencial biomarcador que pode ser empregado no
imunodiagnóstico da doença de Chagas. Visto a importância do diagnóstico precoce para o
tratamento e rastreamento da doença, o desenvolvimento de novos testes acessíveis é crucial,
especialmente em áreas endêmicas e em regiões com recursos limitados.

A leishmaniose tegumentar é considerada uma doença negligenciável consolidada,
sendo endêmica em 92 países, com uma estimativa de ocorrência de 600.000 a 1
milhão de novos casos por ano. O Brasil está entre os nove países endêmicos com
o maior número de casos da doença, com uma média de 21.000 casos por ano. A
busca por uma tecnologia rápida e eficaz para diagnosticar a leishmaniose
tegumentar permanece crucial, considerando que esta é uma doença tropical
negligenciada amplamente disseminada. Para conseguir um diagnóstico mais
acurado desta infecção, proteínas recombinantes e proteínas multiepítopos
recombinantes têm sido extensivamente desenvolvidas por pesquisadores e
utilizadas no diagnóstico da leishmaniose tegumentar, com resultados promissores.
Um dos benefícios da aplicação destes antígenos é um aumento mensurável na
sensibilidade e especificidade, o que melhora a precisão do teste. Neste sentido, o
presente trabalho tem como objetivo expressar, purificar e fazer uma prova de
conceito inicial de dos antígenos, sendo uma proteína recombinante e uma nova
proteína multiepítopo recombinante inovadora. Estudos prévios do nosso grupo de
pesquisa selecionaram epítopos por análise in silico de uma proteína já conhecida
no diagnóstico sorológico da leishmaniose tegumentar. Esses epítopos foram unidos
para criar uma nova proteína multiepítopo recombinante, denominada nesse
trabalho como rMELT1. Ademais, a proteína tryparedoxin peroxidase usada na
análise in silico também foi utilizada no presente trabalho, sendo denominada de
rTpe. Primeiramente, foi feita uma mini-prep plasmidial para realizar a propagação
do plasmídeo, utilizando cepas DH5α de Escherichia coli. Posteriormente, cepas
pLysE e pLysS de E. coli foram utilizadas para a expressão heteróloga de rMELT1 e
rTpe. Após a expressão, verificou-se que apenas rMELT1 foi expressa com sucesso,
sendo confirmada por Western blotting e, posteriormente, purificada por
cromatografia de afinidade com níquel. Para tentar alcançar a expressão de rTpe, a
cepa Escherichia coli Arctic Express foi utilizada. Entretanto a expressão heteróloga
de rTpe não foi expressa com sucesso. Após a quantificação de rMELT1, foi
realizado um ensaio de ELISA preliminar utilizando soros de indivíduos negativos e
soros de indivíduos portadores da leishmaniose cutânea e mucocutânea. Observou-
se que a rMELT1 foi capaz de discriminar entre soros positivos da leishmaniose
mucocutânea e negativos. Os dados obtidos demonstram a importância de se
realizar pesquisas com novas tecnologias focadas no desenvolvimento de kits de
diagnósticos rápidos e mais eficazes, pois o diagnóstico precoce facilita o
tratamento. Portanto, os resultados desta pesquisa revelam um potencial candidato
ao diagnóstico da leishmaniose tegumentar. Além disso, não existe um kit de
diagnóstico genuinamente brasileiro baseado na estratégia multiepítopo, o que
respalda a importância do desenvolvimento deste trabalho e demonstra a inovação
do método frente aos métodos atualmente disponíveis.

Serratia marcescens é um bacilo gram-negativo, amplamente distribuído em ambientes aquáticos, solo, plantas e faz parte da microbiota intestinal de animais e humanos. Embora, inicialmente, considerada não patogênica, atualmente é reconhecida como um importante patógeno oportunista, associado a infecções como pneumonia, ceratite, endocardite, meningite e osteomielite, especialmente em hospedeiros imunocomprometidos. Sua virulência está relacionada também à formação de biofilmes em superfícies hospitalares e dispositivos médicos. S. marcescens possui resistência intrínseca e adquirida a diversas classes de antimicrobianos, incluindo carbapenêmicos e polimixinas, os quais são utilizados como última linha de tratamento para as infecções causadas por bactérias multirresistentes. Sendo assim, este estudo avaliou a susceptibilidade de S. marcescens (n=17), isoladas de um rio urbano que recebe efluentes domésticos e hospitalares, frente aos antimicrobianos meropenem e imipenem (antes e após exposição ao meropenem) utilizando a técnica de microdiluição em caldo para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) de acordo com o BrCast, 2023.Também foi investigada a produção de carbapenemases (metalo betalactamases e serina-betalactamases), triagem de AmpC, a presença de bombas de efluxo e a influência do imipenem e meropenem na formação de biofilmes dos isolado bacteriano. Adicionalmente, a presença de bombas de efluxo foi analisada pela adição de nifedipina no ensaio de CIM. Nenhum isolado de S. marcescens foi resistente ao meropenem tampouco foram detectadas carbapenemases, porém um isolado pode ser produtor de AmpC. Resistência ao imipenem foi observada em 17,6% dos isolados, porém, utilizando métodos fenotípicos, não foi associada à atividade de bombas de efluxo ou carbapenemase. Os isolados mostraram ser formadores intermediário de biofilme e a exposição ao imipenem promoveu aumento na formação de biofilmes pelos isolados de S. marcescens. Esses dados destacam que ambientes aquáticos poluídos podem atuar como importantes reservatórios de S. marcescens resistentes a antimicrobianos de relevância clínica. Sob a perspectiva One Health, os achados reforçam a necessidade de vigilância ambiental para mitigar a disseminação de S. marcescens do ambiente para o cenário clínico.

Introdução: Estima-se que haja um aumento significativo no número de novos casos de câncer de próstata (CaP) em níveis globais. Os tratamentos disponíveis não são completamente eficazes, considerando os possíveis efeitos adversos e colaterais, mesmo com a interrupção da quimioterapia devido à resistência aos medicamentos adquirida pelas células tumorais. O ginseng (Panax ginseng) e o ginseng brasileiro (Pfaffia glomerata e Hebanthe erianthos) são amplamente utilizados na medicina tradicional como tônicos e anti-inflamatórios, no entanto, os dados na literatura sobre seu uso como agentes antitumorais para câncer de próstata são escassos. Objetivo: Este estudo teve como objetivo avaliar e comparar as propriedades e atividades de três espécies de ginseng (Panax ginseng, Pfaffia glomerata e Hebanthe erianthos), in vitro e in vivo. Metodologia: Os extratos foram caracterizados por LC-DAD-MS; a viabilidade celular foi analisada por MTT; a concentração inibitória de 50% foi determinada; a atividade de MMP foi determinada por ensaio de zimograma; A adesão celular também foi avaliada; alterações na morfologia celular foram analisadas por ensaio de fluorescência. Ensaios in vivo como HET-CAM e CAM permitiram avaliar a irritabilidade causada pelo tratamento e o crescimento tumoral, e a toxicidade foi avaliada pelo teste FET. Resultados: A caracterização dos extratos indicou que as três espécies apresentam mais compostos distintos do que similares. Dentre os compostos identificados, destacam-se ginsenosídeos, saponinas, alcaloides, compostos putativos e desconhecidos. Extratos de Panax ginseng, Pfaffia glomerata e Hebanthe erianthos reduziram a viabilidade celular de linhagens tumorais, Hebanthe erianthos inibiu significativamente a atividade de metaloproteinases, e a adesão celular de células tumorais foi alterada após tratamento com os três ginsengs. Alterações morfológicas nas linhagens celulares PC-3 sugerem que os extratos induzem apoptose. Ensaios in vivo demonstraram efeitos diferentes entre as plantas. O Panax ginseng não promoveu a lise dos vasos sanguíneos na membrana corioalantóide da galinha e reduziu o crescimento tumoral, mas a grande maioria das concentrações utilizadas mostrou toxicidade em embriões de zebrafish. A Pfaffia glomerata não promoveu a lise dos vasos sanguíneos na membrana corioalantóide da galinha, mas a grande maioria das concentrações utilizadas mostrou toxicidade em embriões de zebrafish. A Hebanthe erianthos não promoveu a lise dos vasos sanguíneos na membrana corioalantóide da galinha, reduziu o crescimento tumoral e não apresentou toxicidade em embriões de zebrafish.

O Vaccinia virus (VACV) pertence ao gênero Orthopoxvirus (OPV) e pode causar pústulas não letais na pele de humanos e animais. Esse vírus destaca-se pelo seu uso frequente como protótipo do gênero. No passado, ele foi fundamental para o desenvolvimento da vacina contra varíola e erradicação da doença. Porém, mesmo após quatro décadas da erradicação da varíola, os OPV continuam oferecendo risco à saúde de humanos e animais. A zoonose Vaccinia bovina (VB) é uma doença exantemática que afeta principalmente humanos e bovinos em países como Brasil e Reino Unido, causando prejuízos à saúde e à economia. Tem sido relatado o aumento do número de hospedeiros do VACV para além dos bovinos incluindo animais domésticos como cães e gatos. A ausência de um antiviral específico para VACV, aliado ao aumento do número de hospedeiros demonstra o quão importante se tornou a busca por antivirais para o tratamento do VACV. Assim, o objetivo do presente estudo é avaliar a atividade antiviral de 7 compostos sintéticos inéditos, 2 extratos e 6 partições da planta Bauhinia holophylla. Para isto, a multiplicação do vírus foi feita em células Vero-CCL81 e duas técnicas foram utilizadas para a determinação do título viral:  dose infectante por cultura de tecidos 50% (TCID₅₀) e  ensaio de placa de lise. O título viral obtido foi de 8,9.10 ⁷ PFU/mL, por meio da técnica de formação de placas de lise e este foi utilizado para os demais experimentos. Então, sete multiplicidades de infecção (MOI) para a padronização dos ensaios antivirais foram avaliadas utilizando a técnica colorimétrica do 3- (4,5- dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazólio (MTT). De acordo com a presença da infecção e os efeitos citopáticos causados pelo VACV, a MOI de 0,1 foi escolhida para os demais experimentos. Para os ensaios de citotoxicidade e antivirais, três técnicas foram avaliadas para a padronização da análise da viabilidade celular e da atividade antiviral : MTT/AlamarBlue/cristal violeta. A partir da análise da viabilidade celular foi calculado a concentração citotóxica para 50% das células (CC₅₀). As leituras realizadas por cristal violeta foram avaliadas pelo software ImageJ, no entanto o uso desta técnica para análises da citotoxicidade é indicado em conjunto com a técnica MTT, este fato aliado ao alto custo do AlamarBlue permitiu padronizar o ensaio de citotoxicidade revelado por MTT. Para os ensaios antivirais, uma metodologia alternativa foi selecionada para calcular a concentração protetora para 50% das células infectadas (CE₅₀), baseada na fixação com formaldeído e coloração com cristal violeta e análise utilizando o software ImageJ. Após as padronizações, foi iniciada a triagem de avaliação antiviral global dos compostos sintéticos, extratos e partições, e o índice de seletividade foi determinado. Os compostos sintéticos β-carbolínicos apresentaram valores de CC₅₀ entre 26,8 e 870,3 μM, sendo classificado(s) desde não citotóxico(s) até aquele(s) com elevada citotoxicidade, mas não apresentaram atividade antiviral contra VACV. Para os 2 extratos e 6 partições da B. holophylla, nenhum apresentou citotoxicidade nas doses testadas (6,3 – 400 μg/mL). Além disso, a fração diclorometânica (DCM) 2018 apresentou destaque pois apresentou CC₅₀ de 373,6 μg/mL e atividade antiviral CE₅₀ de 57,63 μg/mL e IS de 6,5. As demais não apresentaram atividade antiviral. Assim, pode ser concluído que a partição DCM (2018) possui potencial para o uso no tratamento antiviral de infecções por VACV.

A indústria de alimentos no Brasil está em expansão. Para a produção e comercialização de produtos alimentares, em geral, é preciso utilizar aditivos emulsificantes e estabilizantes. Um exemplo é o setor de sobremesas congeladas como o sorvete, enriquecidos com estes estabilizadores e homogeneizantes de origem sintética. Entretanto, muitos destes, cada vez mais, estão sendo associados a problemas de saúde intestinal. Neste contexto, os biossurfactantes se apresentam como uma possível alternativa, pois não apresentam toxicidade alimentar, são biodegradáveis e têm alta estabilidade. Como resultado foi demonstrado que o sorvete enriquecido com o biossurfactante teve um aumento de volume de 5,39% (BS4), 11,81% (BS6) e 16,54% (BS8). A taxa de derretimento do sorvete foi calculada, o sorvete padrão apresentou a maior taxa (0,9115 g/min), seguido pelas amostras com biossurfactante BS4 (0,8011 g/min), BS6 (0,7667 g/min), e BS8 (0,7326 g/min). Também foi avaliado o pH das formulções ao longo do tempo. Ao fim de 42 dias os valores de pH foram de 6,88; 6,88; 6,94 e 7,41 para as respectivas amostras de sovete padrão, BS4, BS6 e B8. Concluímos que o biossurfactante produzido a partir de um microrganismo mostrou-se com potencial de ser aplicadona indústria de alimentos, especialmente como estabilizante

Este trabalho avaliou o óleo de tucumã (Astrocaryum vulgare), uma oleaginosa amazônica, como matéria-prima para biodiesel, contribuindo para a sustentabilidade e descarbonização energética brasileira.

A esquistossomose mansoni é uma doença parasitária que constitui um relevante problema
de saúde pública, especialmente em países em desenvolvimento, devido à sua elevada
morbimortalidade. O diagnóstico da esquistossomose enfrenta desafios significativos,
especialmente em áreas de baixa endemicidade, onde a sensibilidade dos métodos
convencionais, como Kato-Katz, é limitada. Métodos de diagnóstico moleculares, embora
sensíveis e específicos, possuem alto custo e baixa aplicabilidade em larga escala. Nesse
cenário, este trabalho se propõe a avaliar o desempenho de proteínas quiméricas como alvos
antigênicos em kits de diagnóstico imunológico. As proteínas quiméricas foram desenhadas
para conter epítopos conservados de Schistosoma mansoni, com potencial para melhorar a
sensibilidade e especificidade diagnóstica. Foram utilizados métodos de expressão
heteróloga em Escherichia coli, purificação por cromatografia de afinidade e análise por
técnicas imunológicas, como ELISA, para testar a reatividade com amostras sorológicas. O
estudo explorou a otimização de condições de purificação, incluindo o uso de tampões
ajustados ao ponto isoelétrico das proteínas e a purificação de corpos de inclusão utilizando
cloridrato de guanidina. Os resultados mostraram que as proteínas recombinantes rSH2,
rSH3, rSH4 e rSH5 apresentaram reatividade imunológica promissora, indicando sua
viabilidade como componentes de kits diagnósticos. A produção nacional dessas proteínas
quiméricas demonstra potencial para reduzir custos, melhorar a acessibilidade e contribuir
para a inovação tecnológica no diagnóstico de esquistossomose. O desenvolvimento desses
kits representa um avanço estratégico na vigilância e controle da doença, com impacto direto
na saúde pública.

A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma zoonose que tem se expandido pelos centros urbanos e o cão tem papel central como reservatório do parasito e na transmissão para o vetor. Causada pelo protozoário Leishmania infantum, é a forma mais grave dentre os diferentes tipos de leishmaniose, podendo levar à morte caso não diagnosticada e tratada.  Assim, o controle da LVC torna-se relevante, sendo as ações preconizadas pelo Ministério da Saúde baseadas num tripé de ações: o tratamento dos casos humanos, combate ao vetor e a eutanásia dos cães soropositivos. Entretanto, os métodos utilizados para o diagnóstico da doença apresentam limitações de desempenho (especialmente sensibilidade e especificidade), que podem ser melhorados. No presente estudo, uma proteína sintética específica de Leishmania, denominada neste estudo de MELEISH3, sob sua forma recombinante (rMELEISH3), foi avaliada em testes imunoenzimáticos (ELISA) para detecção de IgG na LVC. Os resultados observados revelaram o potencial desta proteína ao diagnóstico da LVC, com valores de sensibilidade igual a 96,4%, especificidade de 100%. Uma segunda proteína quimérica, ainda sem nome, está sendo definida por imunobioinformática, para uma futura avaliação como vacina contra LVC. Dessa forma, o presente trabalho apresenta novas quimeras recombinantes que podem ser utilizadas como marcadores sorológicos para a detecção da infecção por L. infantum em cães.

O número de associações de Cannabis medicinal tem aumentado no Brasil. Elas atuam fornecendo informações sobre o uso da planta para fins medicinais e apoio jurídico a pacientes e familiares. Muitas, também fazem o cultivo e produção do óleo medicinal. Dentro deste contexto, a participação das instituições de ensino e pesquisa é fundamental não apenas para auxiliar na indicação terapêutica, contraindicações e definição do regime posológico, mas também quanto aos aspectos relacionados à produção e controle de qualidade da droga vegetal e do óleo medicinal. A busca por produtos eficazes e seguros para os pacientes foi o princípio norteador deste projeto. Este estudo visou averiguar, por meio da aplicação de um questionário semiestruturado, os possíveis efeitos benéficos e adversos relacionados ao uso do óleo medicinal da Cannabis sativa em pacientes vinculados a uma associação que possui autorização judicial para cultivo da planta e produção do óleo. Avaliou-se, ainda, de forma qualitativa o perfil dos canabinoides presentes nos óleos medicinais produzidos pela associação utilizando-se a cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE). Ao final do período de entrevista, obteve-se adesão de 86 pacientes dentro dos critérios de inclusão da pesquisa. Os dados obtidos mostraram que os efeitos terapêuticos se sobressaíram, como auxiliando na redução de ansiedade e melhoras nas funções cognitivas, entretanto, efeitos adversos também foram relatados pelos pacientes, entre eles alguns mais comuns, como a sonolência. A análise por CLAE mostrou três perfis de óleos diferentes em teores de canabinoides. De modo geral, o óleo de C. sativa pode ocasionar em cada indivíduo uma reação específica e individual, seja contribuindo na otimização do tratamento de patologias ou gerando efeitos adversos. Diante aos resultados obtidos, verifica-se a necessidade de mais estudos acerca do óleo medicinal, para garantir segurança e eficácia deste tratamento e a devida compreensão destas preparações.

A crescente demanda por bebidas de baixo teor calórico em todo o mundo tem impulsionado o interesse nas hard seltzers, que são bebidas com baixo teor de carboidratos e um teor alcoólico entre 4-5% (v/v). Essas bebidas são obtidas a partir da fermentação de uma mistura de água e açúcar, mas a solução inicial não fornece os nutrientes adequados para a levedura concluir o processo de fermentação. Portanto, o principal desafio para a produção de hard seltzers é encontrar a combinação ideal de leveduras e nutrientes. Este estudo foi desenvolvido para investigar a fermentação de hard seltzers usando diferentes leveduras e nutrientes, com foco na aplicação industrial.

     O uso de substâncias psicoativas por diversas civilizações tem sido comum ao longo da história. A maconha é uma das plantas mais cultivadas e consumidas em todo o mundo para este fim. Os efeitos farmacológicos da Cannabis estão associados a vários compostos denominados canabinoides, entre estes se destacam o delta-9-tetraidrocanabinol (Δ⁹-THC) e o canabidiol (CBD). O CBD tem propriedades ansiolíticas e não possui efeitos psicoativos ao contrário do Δ⁹-THC, que possui atividades ansiogênicas em altas doses. Atualmente, a produção de canabinoides é limitada no cultivo tradicional. A cultura in vitro produz plantas livres de doenças, com maiores teores de compostos bioativos e em menor tempo e espaço do que a agricultura convencional. Neste contexto, torna-se de extrema relevância e importância social e econômica para o Brasil a possibilidade de produção e purificação de CBD, dentro das exigências regulatórias do governo. Este projeto visa inovar a análise e purificação de canabinoides a partir do cultivo in vitro de Cannabis sativa.

     O uso de substâncias psicoativas por diversas civilizações tem sido comum ao longo da história. A maconha é uma das plantas mais cultivadas e consumidas em todo o mundo para este fim. Os efeitos farmacológicos da Cannabis estão associados a vários compostos denominados canabinoides, entre estes se destacam o delta-9-tetraidrocanabinol (Δ⁹-THC) e o canabidiol (CBD). O CBD tem propriedades ansiolíticas e não possui efeitos psicoativos ao contrário do Δ⁹-THC, que possui atividades ansiogênicas em altas doses. Atualmente, a produção de canabinoides é limitada no cultivo tradicional. A cultura in vitro produz plantas livres de doenças, com maiores teores de compostos bioativos e em menor tempo e espaço do que a agricultura convencional. Neste contexto, torna-se de extrema relevância e importância social e econômica para o Brasil a possibilidade de produção e purificação de CBD, dentro das exigências regulatórias do governo. Este projeto visa inovar a análise e purificação de canabinoides a partir do cultivo in vitro de Cannabis sativa.

O hormônio liberador de gonadotropina (GnRH) é um neuropeptídeo central na fisiologia
reprodutiva dos vertebrados, pois regula a síntese e liberação de gonadotropinas. Os peixes
teleósteos possuem dois a três genes parálogos GnRH e representam um bom modelo para
compreensão da história evolutiva e mecanismos funcionais desse hormônio. Este trabalho tem
como objetivo principal realizar a caracterização molecular de parálogos de genes GnRH (que
codificam para um pré-pró-GnRH), em duas espécies de peixe de piracema, Salminus brasiliensis e
Brycon orbignyanus, ambas com grande valor comercial e importância ecológica. A caracterização
in silico foi realizada com dados de sequenciamento de Nova-geração de DNA produzidas pela
plataforma HiSeq 2000-Illumina. Foi identificado o gene GnRH1 por meio da anotação genômica
previamente realizada via MAKER, em uma montagem genômica de novo. A sequência
codificadora do pré-pró-GnRH1 (264 pb/88 aa), recuperada na montagem de S. brasiliensis,
utilizada como isca para recuperar o mesmo gene dentro da montagem genômica de B. orbignyanus.
Sequências para o pré-pró-GnRH2 e 3 da espécie Astyanax mexicanus foram utilizadas como
consulta, no entanto, só foi possível recuperar o GnRH2 com o BLAST, e o scaffold onde ele foi
localizado parcialmente foi anotado com AUGUSTUS. O pré-pró-GnRH2 foi anotado dentro do
genoma de S. brasiliensis (258 pb/86 aa) e parcialmente no genoma de B. orbignyanus (144 pb/48
aa). O pré-pró-GnRH é um neuropeptídeo tripartido e o tamanho de cada uma dessas regiões estão
de acordo com a literatura. Entretanto, o transcrito pré-pró-GnRH1 apresentou uma variação no
segundo aminoácido do sítio proteolítico, possivelmente, na enzima responsável pelo corte. O
sequenciamento de Sanger de amplicons do GnRH1, possibilitou a validação da sequência predita e
da variação no sítio proteolítico. Os transcritos preditos foram alinhados, com sequências de GnRHs
depositadas no NCBI para peixes Characiformes. A análise filogenética agrupou as sequências de
pré-pró-GnRs em três clados distintos e formam um grupo monofilético, o que corrobora a
classificação dos parálogos aqui caracterizados. Também foram preditas sequências inéditas de
receptores para GnRH dentro do genoma de ambas espécies de interesse. Os ensaios in vivo foram
realizados administrando o decapeptídeo sintético de GnRH1: 10, 25, 35, 50 e 100 μg/kg, extrato
hipofisário de carpa (EHC) e solução salina. Não foi observada desova em nenhuma das matrizes
induzidas com o GnRH1 sintético e o tratamento com EHC não gerou uma resposta uniforme em
todos os experimentos. Obteve-se caracterização molecular dos parálogos GnRH1 e GnRH2, bem
como dos seus receptores. Esses resultados irão subsidiar novas pesquisas aplicadas à biotecnologia
para assistência na reprodução em cativeiro de peixes de piracema, estudos estruturais de
hormônios/receptores, liberação lenta e no desenvolvimento de um sistema de expressão heteróloga.

Flores de T. stans foram coletadas no município de Divinópolis-MG e o extrato etanólico (EE) foi obtido por turbo-extração, sendo submetido à partição com hexano (HEX), diclorometano (DCM) e acetato de etila (AC) para obtenção das frações. Os compostos presentes nas frações foram caracterizados por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas (CG-EM) e Cromatografia Líquida acoplada a Detector de Arranjo de Diodos e Espectrometria de Massas (CL-DAD-EM). A atividade alelopática foi realizada com sementes de alface e cebola, e a análise dos efeitos citotóxico, genotóxico e antigenotóxico foi feita com sementes de cebola. A atividade larvicida foi avaliada utilizando larvas de Artemia salina e Culex quinquefasciatus. Na fração HEX, analisada por CG-EM, as principais classes das substâncias anotadas foram ésteres de ácidos graxos e fitoesteróis. No EE e nas outras frações foram encontrados alcaloides, flavonas, flavonóis e glicosídeos de fenilpropanoides. Na análise da germinação de sementes, a velocidade de germinação das sementes de alface diminuiu significativamente nos tratamentos com EE e frações HEX e DCM. Para as sementes de cebola, destacaram-se as amostras HEX e DCM, sendo sua ação melhor do que o controle positivo em todas as concentrações. Já nas análises do crescimento de plântulas de alface, todos os tratamentos afetaram o crescimento da radícula e hipocótilo. Nos ensaios com cebola, os melhores resultados foram nos tratamentos com as frações HEX e DCM de T. stans, apresentando valores de inibição maiores que 50% a partir da concentração de 500 μg/mL. Nos ensaios de genotoxicidade, apenas a fração AC nas concentrações de 750 e 1000 μg/L apresentou diferença significativa no índice de aberrações cromossômicas, quando comparado ao controle negativo. O extrato e demais frações de T. stans não foram considerados genotóxicos. Na análise do potencial antigenotóxico, o extrato e as frações de T. stans foram capazes de reduzir a genotoxicidade provocada pelo glifosato e pela atrazina, em todas as concentrações testadas. No ensaio de letalidade frente à A. salina, apenas a fração de AC apresentou elevada toxicidade nas concentrações testadas. Quanto à atividade larvicida das amostras de T. stans frente à C. quinquefasciatus, as frações HEX e DCM demonstraram se ativas, com letalidade de até 100% nas primeiras 24 horas. Esse é o primeiro estudo com as flores de T. stans que avaliaram essas atividades.

Originária no Brasil, Smilax fluminensis Steud. pertence à família Smilacaceae e é popularmente conhecida como japicanga. As atividades biológicas dessa espécie são pouco conhecidas. Portanto, este estudo teve como objetivo a extração, caracterização e avaliação de atividades biológicas de folhas de S. fluminensis. Obteve-se o extrato etanólico (EE) por percolação com etanol e as frações hexânica (FHEX), diclorometânica (FDCM), acetoetílica (FACE) e hidroetanólica (FHID) por partição líquido-líquido a partir de EE. A caracterização fitoquímica foi feita por Cromatografia Gasosa - Espectrometria de Massas (CG-EM), Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a Detector de Arranjo de Diodos e Espectrômetro de Massas (CLAE-DAD-EM), e Ressonância Magnética Nuclear (RMN) de ¹H. Quantificou-se os compostos fenólicos (CFT), flavonoides (FT), taninos totais (TT), e aferiu-se a atividade antioxidante pelos métodos 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH) e poder redutor de íons férricos (FRAP) do extrato e frações. Avaliou-se a toxicidade pelo teste de Artemia salina (TAS) e a atividade alelopática em sementes de Allium cepa (cebola) e Lactuca sativa (alface). Analisou-se os efeitos citotóxico, genotóxico e antigenotóxico em células meristemáticas de A. cepa, e a influência no desenvolvimento de plântulas de A. cepa e Nicotiana tabacum (tabaco) in vitro. Os compostos majoritários de FHEX foram linolenato de etila, palmitato de etila e linoleato de etila. Foram observados derivados de quercetina, luteolina, kaempferol e saponinas em todas as amostras polares. As análises por RMN ¹H confirmaram a caracterização das substâncias presentes no extrato e frações realizadas por CG-EM e CLAE-DAD-EM. FACE apresentou maiores teores de CFT, FT e TT (CFT: 44,29 µg EAG/mg, FT: 87,54 µg EQ/mg e TT: 31,72 µg EAG/mg) e menores valores de CE₅₀ (DPPH: 8,18 µg/mL e FRAP: 2,35 µg/mL). Nenhuma amostra foi tóxica no TAS. Todas as amostras diminuíram o vigor, a taxa de germinação e o índice de velocidade de germinação (IVG) das sementes de A. cepa. Diferentemente disso, não alteraram o vigor e a viabilidade das sementes de L. sativa, porém diminuíram o IVG, exceto FHID. Todas as amostras inibiram o crescimento de epicótilos e radículas de A. cepa e L. sativa, exceto FHEX, que estimulou o crescimento de epicótilo (750 µg/mL) e radícula (750 e 1000 µg/mL). Observou-se efeito citotóxico de todas as amostras (exceto FHID, 1000 µg/mL), porém sem causar genotoxicidade. As amostras apresentaram efeito antigenotóxico quando as sementes foram previamente tratadas com atrazina (ATZ), mas não demonstrando o mesmo efeito quando as sementes foram pré-tratadas com glifosato (GLI). De forma geral, o extrato e frações influenciaram na germinação das sementes e desenvolvimento de plântulas, observando-se efeito semelhante aos hormonais in vitro para as sementes de cebola (monocotiledônea) e semelhante aos herbicidas para as sementes de tabaco (eudicotiledônea).

A indústria têxtil está presente em todos os países por conta de uma necessidade humana de vestuário e usos utilitários variados como na decoração, na área hospitalar, militar, entre outros. Segundo dados da Associação Brasileira da Indústria Têxtil (ABIT), o varejo de vestuário fechou o ano de 2017 com 6,71 bilhões de peças vendidas, 6,5% a mais do que em 2016, com o faturamento de R$ 144 bilhões. De acordo com o balanço da entidade, os investimentos do setor em 2017 chegaram a R$ 1,9 milhão e foram gerados 3,5 mil postos de trabalho, totalizando 1,48 milhão de pessoas empregadas no setor. Dado o tamanho do mercado da indústria têxtil, uma questão importante associada à produção é o tratamento de águas residuais. O efluente têxtil é rico em sais e compostos orgânicos tais como corantes, surfactantes, entre outras substâncias usadas para tornas os tecidos resistentes a agentes físicos, químicos e biológicos. Tendo isto em vista, este trabalho visa a uitlização da biomassa seca de Eichhornia crassipes e Pistia stratiotes, duas plantas daninhas, para remoção por adsorção dos corantes Vermelho de Remazol RR e Preto Reativo 5, ambos utilizados na indústria textil.

Esse projeto tem o objetivo de aperfeiçoar o estabelecimento das plântulas de Cannabis sativa cultivadas in vitro, considerando os diferentes tipos de tratamento com reguladores de crescimento; BAP e TDZ, e variações no espectro de luz e cores. Na presente pesquisa, o regulador BAP com tratamento de 1,0 mg/L obteve sucesso na multiplicação de brotos tendo significância de (p < 0,05) frente ao grupo controle e ao tratamento com TDZ de 1,0mg/L na avaliação com 49 dias. Os reguladores TDZ e BAP não tiveram significância para indução de raízes em nenhum tratamento (T1, T2 e T3).  O regulador TDZ na concentração de 2mg/L obteve o maior comprimento de raízes.  

A esquistossomose , doença parasitária tropical negligenciada, causada por vermes trematódeos do gênero Schistosoma, afeta aproximadamente 240 milhões de pessoas no mundo. O diagnóstico pode ser realizado por métodos parasitológicos, moleculares e imunológicos. A fim de efetivamente controlar e monitorar a esquistossomose, novos métodos de diagnóstico são essenciais. Devido ao longo tempo necessário para o preparo de antígenos brutos para imunodiagnóstico da esquistossomose, a preparação de antígenos recombinantes tem se tornado uma alternativa promissora. Nesse sentido,  mediante à necessidade de desenvolvimento de um teste com alta sensibilidade e especificidade, o objetivo deste trabalho é a otimização das condições de um teste de ELISA para o diagnóstico da esquistossomose mansônica tendo em vista a transferência de tecnologia. Nesse âmbito utilizando uma proteína recombinante desenhada racionalmente, a proteína rSH1, que foi expressa em  células de Escherichia coli BL21 (λDE3) pLysE e pLysS, purificada e empregada em um imunoensaio. A maximização dos processos expressão foi feita através da Metodologia de Superfície de Resposta e o rendimento da proteína foi de 0,034mg/mL para 1,234 mg/mL. Os resultados sugerem que a proteína rSH1 apresenta capacidade de identificar soros positivos para esquistossomose, entretanto ainda é necessário otimizar parâmetros para determinar a acurácia diagnóstica do ensaio. Assim, a proteína rSH1 avaliada neste estudo, apresenta potencialidade em ser empregada como insumo biotecnológico no desenvolvimento de novas estratégias para o diagnóstico de esquistossomose.

Os compostos bioativos da N-acilidrazonas estão disponíveis como
substâncias promissoras no design de drogas e na química medicinal. No teste
in vitro, os compostos AH1, AH2, AH4, AH5 foram ativos contra a cepa de
Plasmodium falciparum resistente à cloroquina (W 2 ) e não demonstraram
toxicidade contra as linhas de células humanas WI26 VA-4 (LC 50 &gt; 100 µM). O
composto AH5 e AH4 foram os mais ativos com um valor de IC 50 de 0,7 μM e
0,9 μM. Entre os compostos testados, AH4 e AH5 foram selecionados e
selecionados para cálculos de docking molecular para elucidar possíveis alvos
envolvidos em seu mecanismo de ação e o teste SwissADME para exemplificar
seus dados farmacocinéticos. O composto AH5 possui afinidade para 12 alvos,
baixa seletividade, enquanto o composto AH4 possui maior afinidade para
apenas um alvo (3PHC), por isso foi selecionado para análise do mapa
farmacofórico. Nos testes de ADME in silico, os compostos atenderam aos
padrões de Lipinski, indicando bons resultados de biodisponibilidade. Estes
resultados demonstram os compostos N-acilidrazonas como candidatos para
futuros estudos pré-clínicos para malária.

Probióticos são microrganismos vivos utilizados como suplementos alimentares com efeitos benéficos relacionados à melhora do balanço intestinal. Dentre os microrganismos considerados probióticos, somente os classificados como bactérias ácido lácticas (LAB) são considerados importantes em relação à alimentação. O alto custo para produção inviabiliza muito processos com probióticos, por isso, a utilização de fontes renováveis como o soro de leite e suplementação com baixo custo, pode tornar possível a produção industrial dessas bactérias. Este trabalho teve como objetivo realizar a otimização da produção de biomassa e microencapsulamento da cepa Can7, para utilização como probiótico em sorbet de frutas. Através da suplementação do soro de leite com farinha de soja foi realizado o fatorial fracionado no programa Minitab18. Altas concentrações de biomassa foram alcançadas na utilização de extrato de farinha de soja como suplementação do meio, mantendo uma economia de 98,86% e 98,65% em relação a utilização de peptona e extrato de levedura. O encapsulamento da cepa Can7 pela técnica de emulsificação / gelificação interna com alginato de sódio (5%) apresentou eficiência de 87,5%. O aumento da taxa de sobrevivência em condições gastro da microcápsula foi de 65,62 % em relação a célula livre. No teste de ambiente intestinal as sobrevivências das células em microcápsulas 57,69% maior que as livres. As microcápsulas não alteram a característica sensorial do sorbet. Concluímos que o extrato de farinha de soja é uma ótima opção de fonte de nitrogênio sem perda de produção de biomassa da cepa Can7, tornando possível escalonamento do bioprocesso. A microcápsula foi efetiva na proteção da cepa e um bom recurso para economizar na quantidade de células necessárias em alimentos probióticos.

O glioblastoma (GBM) é um dos tumores cerebrais mais prevalentes. As suas  opções de terapia atuais incluem ressecção cirúrgica seguida de radioterapia e quimioterapia. Para a quimioterapia, a temozolomida ainda atua como o principal quimioterápico para pacientes com GBM. No entanto, os pacientes permanecem apresentando uma baixa taxa de sobrevida. Neste contexto novas moléculas têm sido estudadas para o tratamento, como os peptídeos isolados de venenos de animais por suas propriedades farmacológicas, como atividade antitumoral e atividade antimicrobiana, sugerindo serem promissores candidatos para o desenvolvimento de novos medicamentos, principalmente para o tratamento do GBM. Neste estudo, iniciou-se a caracterização do peptídeo Ly-1, isolado do veneno da aranha Lycosa erythrognatha. Com as análises de bioinformáticas foi possível confirmar in silico que o peptídeo Ly-1 é um peptídeo anfipático e apresenta afinidade por membranas fosfolipídicas. A modelagem molecular do peptídeo Ly-1 realizada no programa Modeller produziu bons resultados estatísticos, indicando que o modelo é plausível. Os resultados obtidos demonstram que Ly-1 pode ser um promissor peptídeo com atividade antitumoral.

A aquicultura é a atividade agropecuária que mais cresce no Brasil e no mundo, tendo os seus produtos como os mais saudáveis e os menos impactantes para o meio ambiente. O Brasil está entre os 15 maiores produtores de peixes do mundo e ocupa a quarta posição entre os maiores produtores de tilápia do mundo, e a estimativa é que em 20 anos chegue a ser o maior produtor mundial de peixes de cultivo, tendo a liderança da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). O país conta com a maior reserva de água doce do planeta, possui um clima favorável e muitas espécies adaptáveis, o que contribui para o grande crescimento da sua produção. Mesmo o peixe e os produtos da pesca sendo os menos impactantes para o meio ambiente, impactos ambientais podem ser causados se não for realizado um manejo correto no processo de criação. Efluentes com grande quantidade de matéria orgânica, nitrogênio e fósforo são gerados no processo, o que contribui para a eutrofização dos corpos d’água, com baixa disponibilidade de oxigênio dissolvido, resultando na redução ou alteração da biodiversidade. Esses fatores podem acarretar estresses na vida dos peixes, tornando-os susceptíveis à patógenos. Nesse contexto, esse trabalho tem como objetivo estudar a ação da levedura Candida infanticola e das bactérias Bacillus subtilis e Lactobacillus plantarum, sobre o desempenho da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). Para tal, a ração dos alevinos de tilápia foi suplementada com L. plantarum, B. subtilis e C. infanticola e o efeito desta suplementação sobre a viabilidade e o desempenho dos peixes, digestibilidade da proteína bruta e matéria seca, aumento das microvilosidades intestinal dos peixes, bem como sobre a resistência à infecção de patógeno (in vitro) e a qualidade da água dos tanques. Dentre os tratamentos utilizados, houve efeito significativo do tratamento contendo B. subtilis na conversão alimentar. O tratamento com L. plantarum e também com o consórcio microbiano (B. subtilis, L. plantarum e C. infanticola) apresentou valores de conversão alimentar próximo ao resultado obtido da suplementação com B. subtilis. Não foram observados efeitos dos tratamentos com dietas suplementadas com L. plantarum, C. infanticola e Controle sobre o peso final e ganho de peso. Em relação ao consumo de ração, o tratamento com L. plantarum apresentou o menor consumo e o tratamento com o consórcio microbiano apresentou o maior consumo de ração, não diferindo da dieta controle e dos tratamentos com B. Subtilis e C. infanticola. O índice de sobrevivência em todos os tratamentos foi superior a 90%. Nas análises de digestibilidade não houve efeito significativo para os tratamentos quanto a digestibilidade da proteína bruta e digestibilidade da matéria seca. Houve um efeito significativo no aumento das microvilosidades para o tratamento com a bactéria do ácido lático L. plantarum e da bactéria B. subtilis, o que pode indicar um aumento da área de superfície, resultando em uma maior absorção de nutrientes disponíveis. Nas análises de antagonismo (in vitro), somente o B. subtilis apresentou formação de halos de inibição contra o patógeno da Aeromonas hydrophila. Não houve efeito dos tratamentos nos parâmetros de qualidade de água, mantendo-se o ideal durante todo o período experimental, sem causar estresse e ou prejuízos no desempenho dos peixes.

Desde que foram descobertas, algumas arboviroses
têm aumentado e, entre elas, destacam-se as causadas por Zika virus (ZIKV) e
Mayaro virus (MAYV). Até o momento, não há fármacos antivirais ou vacinas
contra esses vírus, estimulando a busca por antivirais, principalmente devido aos
agravos dessas doenças que podem ser incapacitantes ao paciente. Moléculas
oriundas de plantas se destacam nessa busca, entre elas, as originárias do
gênero Maytenus, o qual apresenta compostos com atividades biológicas bem
descritas, tornando as espécies do grupo candidatas à prospecção de antivirais.
Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi prospectar antivirais contra MAYV e
ZIKV em extratos e compostos derivados de folhas e galhos de Maytenus
quadrangulata. Inicialmente, foi determinada a concentração citotóxica para 50%
das células (CC50), utilizando diferentes extratos da planta. Os extratos de folhas,
EHF e EAF, e de galhos, EAG, apresentaram baixa citotoxicidade, com CC50 de
547, 953 e >1000 μg/mL, respectivamente. A partir dos resultados de
citotoxicidade, foi avaliada concentração efetiva protetiva para 50% das células
infectadas (CE50). A ação antiviral contra o ZIKV mostrou que a CE50 ocorreu nas
concentrações de 25, 11 e 56μg/mL, respectivamente. Para o MAYV, os extratos
EAF e EAG foram eficazes, com CE50 de 12 e 101μg/mL, respectivamente. Os
valores dos índices de seletividade (IS) para esses extratos se mostraram acima
de 4, conforme recomenda a literatura. Na busca pela caracterização dos
compostos bioativos presentes na planta, ensaios foram feitos com compostos
isolados do extrato EHF. Apesar da promissora ação no extrato, nenhum dos
seus isolados apresentou atividade, indicando possível ação de outras classes
de compostos ou perda de atividade no processo de isolamento. Os extratos
EAF e EAG, que também apresentaram ação antiviral, foram caracterizados
fitoquimicamente, e mostraram predominantemente catequinas em sua
composição, com uma maior seletividade antiviral para o EAF. Assim, para esse
extrato, a ação antiviral foi confirmada por diferentes ensaios, sendo mostrada,
em ordem, i) redução do efeito citopático viral (ECP) por avaliação em
microscopia óptica, ii) redução na carga viral relativa, analisada por reação em
cadeia da polimerase quantitativa (RT-qPCR) e iii) drástica redução na produção
de vírus por ensaio de redução de placas. Na caracterização de possíveis
mecanismos de ação antiviral, demonstramos que as etapas de adsorção e
penetração viral para ambos os vírus não são afetadas, sendo caracterizado um
marcante efeito sobre a partícula viral (Efeito virucida). Esta ação também foi
verificada quando o tratamento foi adicionado em diferentes momentos após a
infecção. Os dados apresentados neste trabalho mostram que os extratos de
Maytenus quadrangulata são eficientes na inibição de ZIKV e MAYV,
possivelmente por ação de catequinas, as quais, quando se ligam a elementos
virais, e não celulares, são capazes de inativar eficientemente os vírus. Este
estudo é o primeiro a pesquisar o efeito antiviral e os mecanismos exercidos por
extratos de Maytenus quadrangulata sobre os vírus Zika e Mayaro.

Bactérias probióticas são conhecidas pela capacidade em trazer benefícios ao hospedeiro, como a manutenção do sistema imune, inibição do crescimento de microrganismos patogênicos e manutenção do bem-estar emocional, e por isso, há um crescente interesse em novas bactérias láticas com potencial probiótico. O objetivo deste estudo foi rastrear bactérias láticas probióticas de diversas origens e avaliar o potencial probiótico. Os testes probióticos in vitro incluíram sobrevivência sob baixo pH e sais biliares, hidrofobicidade da superfície celular, autoagregação, coagregação, atividade antibacteriana, e propriedades de segurança foram avaliadas com base no perfil de resistência a antibióticos. Foram isoladas 46 bactérias com características de bactérias láticas, sendo 32 isolados discriminados como geneticamente diferentes através da técnica de RAPD, sendo estas isoladas das fontes, quefir (n=9), queijo (n=4) kombucha (n=2), silagem (n=3) e fezes de recém-nascidos (n=14). A maioria das cepas foram resistentes à acidez gástrica simulada e aos sais biliares. Alta hidrofobicidade foi observada para quatro cepas. Autoagregação variou de 9,31- 62,24% e a capacidade de coagregação demonstrou uma ampla gama de variação nos fenótipos coagregativos. Além disso, as cepas também apresentaram níveis variados de resistência aos antibióticos de importância clínica. A comparação entre as fontes demonstrou que bactérias láticas isoladas de diversas fontes podem possuir propriedades probióticas. No geral, a avaliação das propriedades probióticas de um grande conjunto de bactérias láticas isoladas foi fundamental para analisar as características fenotípicas dos isolados e verificar que independente da fonte de isolamento uma cepa pode ser considerada probiótica. Concluímos que a cepas analisadas de diferentes fontes apresentou potencial probiótico com potencial aplicação em setores industriais, sendo as mais promissoras as cepas K8, QV1, SL4, FE2 e FPc4

O uso de plantas medicinais faz parte da terapia popular contribuindo para a consolidação de um conjunto de habilidades internalizadas nos usuários e praticantes. Porém, com a grande oferta de medicamentos industrializados, aquela prática diminuiu nos últimos anos. Além da obtenção das plantas medicinais estar vinculada ao extrativismo, as técnicas de cultivo são escassas, o que reduz a padronização e garantia de qualidade final.  Neste contexto, com vistas ao aumento de produtividade e obtenção de produtos mais saudáveis, os biofertilizantes surgem como alternativa aos químicos. Os Micro-organismos Eficientes (ME), utilizados como biofertilizantes, consistem de associações de culturas de micro-organismos benéficos, encontrados naturalmente nos solos e que podem incrementar a biodiversidade microbiana. Alguns estudos têm demonstrado que a inoculação de culturas de ME promove a melhoria na qualidade dos solos, especialmente na síntese de metabólitos e desenvolvimento do vegetal em geral. Assim, os objetivos deste trabalho foram de avaliar o efeito da aplicação de biofertilizante à base de ME sobre aspectos gerais do desenvolvimento de três plantas medicinais (Thymus vulgaris, Phyllanthus niruri e Mentha piperita), avaliar os metabólitos secundários produzidos, identificar as espécies bacterianas presentes no biofertilizante e determinar a concentração daqueles micro-organismos nas amostras de solo. O biofertilizante apresentou em sua composição bactérias fotossintetizantes e produtoras de ácido lático, destacadamente Lactobacillus plantarum e Rhodobacter sp. Por meio da análise química dos solos, as amostras com o biofertilizante apresentaram teores de P, Ca, Mg, Zn, Fe e Mn maiores que nos solos controle. Além disso, os solos tratados indicaram maior contagem bacteriana e as plantas neles cultivados apresentaram dimensões mais pronunciadas em suas partes gerais. No entanto, o biofertilizante contendo ME não provocou efeitos positivos nos resultados qualitativos dos metabólitos secundários indicando ainda efeitos negativos nos resultados quantitativos relacionados àqueles metabólitos.

Espécies do gênero Bauhinia são utilizadas em diversas partes do mundo para tratamento de diversas doenças. A espécie Bauhinia variegata L., conhecida como “pata-de-vaca”, é uma espécie lenhosa de Cerrado, cujas folhas são utilizadas na medicina tradicional para o tratamento de infecções e diabetes. Estudos fitoquímicos indicam a presença flavona; teaflavina; catequina; antraquinona; flavona; flavanona; flavonol nos calos de B. variegata A cultura de tecidos de plantas e, mais especificamente, a cultura de calos é uma ferramenta biotecnológica que possibilita a obtenção de substâncias bioativas de interesse in vitro, por meio da otimização das culturas. Este trabalho teve como objetivos estabelecer um protocolo efetivo para indução de calos em segmentos foliares de Bauhinia variegata e avaliar as substâncias de natureza fenólica presentes nos calos dessa espécie. Para a calogênese, explantes foliares provenientes de plântulas cultivadas in vitro foram inoculados em meio MS suplementado com 30 g L^-1 de sacarose, solidificados com 7 g L^-1 de ágar e acrescidos de 2,4-D (0; 4,52; 9,05; 18,10 μM) e BAP (0; 4,44; 8,88;17,75 μM) e suas possíveis combinações, na presença e ausência de luz. Após 45 dias da inoculação, avaliou-se a porcentagem de indução de calos, matéria fresca e seca e os teores de fenóis e flavonoides totais, empregando-se metodologias usuais. Calos induzidos em meios acrescidos de 4,52 µM 2,4-D + 4,44 µM BAP T7 (calos compactos), na ausência de luz. A curva de crescimento foi estabelecida a partir de calos na presença de luz. Para o estudo fitoquímico, obteve-se o extrato hidroetanólico bruto (EHEB), por percolação, que foi submetido à partição líquido-líquido  de etila e butanol. O isolamento e identificação de substâncias presentes na fração acetato de etila foram realizados a partir das técnicas de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a detectores DAD e espectrômetro. Os resultados demonstraram que calos induzidos em meios suplementados com 4,52 µM 2,4-D + 4,44 µM BAP, na presença de luz apresentaram boa porcentagem de indução, consideráveis valores de matéria fresca e seca e principalmente, os maiores teores compostos fenólicos.

As plantas medicinais têm substâncias bioativas responsáveis por atividades biológicas como antifúngica, antibiofilme, antibacteriana e antioxidante. Leveduras do gênero Candida, principalmente Candida albicans, correspondem a principal causa de infecções fúngicas em humanos e a maioria das infecções são decorrentes da formação de biofilmes resistentes. A resistência bacteriana tem aumentado rapidamente e já existem bactérias resistentes a todos antibióticos. Plantas do gênero Bauhinia são ricas em compostos fenólicos e flavonoides, os quais têm sido associados a atividade antimicrobiana. Os objetivos deste estudo são avaliar as atividades antimicrobiana, antibiofilme e antioxidante de extratos e frações de folhas de Bauhinia holophylla e identificar os possíveis compostos ou grupos de compostos relacionados a essa atividade. Folhas de B. holophylla foram coletadas em 2014 e 2018 e extratos foram preparados com etanol 70º GL e etanol 95º GL, respectivamente. Os extratos foram fracionados por partição, com solventes de polaridades crescentes. Foram determinados os teores de fenóis e flavonoides totais empregando-se metodologias usuais e a atividade antioxidante dos extratos e frações pelo método de inibição do DPPH.  Para os ensaios antimicrobianos determinou-se Concentração Inibitória Mínima (CIM) dos extratos e frações contra C. albicans, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus epidermidis e Acinetobacter baumannii nas concentrações de 0,24 a 125 µg mL^-1. As mesmas concentrações foram usadas para o ensaio antibiofilme de C. albicans. Os resultados demonstraram que os extratos e frações testados não apresentaram atividade antifúngica ou antibacteriana. Os extratos brutos e as frações diclorometânica e acetoetílica apresentaram maiores teores de fenóis e flavonoides totais, assim como maiores atividades antioxidante. As frações diclorometânica e acetoetílica provenientes do fracionamento do extrato hidroetanólico apresentaram as maiores atividades antibiofilme. A diferença no ano de coleta e dos solventes usados na extração influenciou o perfil fitoquímico dos extratos.

Peixes de piracema possuem importância comercial e constituem elementos fundamentais dos ecossistemas aquáticos Neotropicais. As espécies Salminus brasiliensis, Prochilodus lineatus, Brycon orbignyanus e Megaleporinus obtusidens são alvo de piscicultura para repovoamento, em resposta a impactos ambientais oriundos da geração hidrelétrica. Os marcadores de DNA microssatélites são aplicados como ferramentas biotecnológicas na conservação e produção devido ao seu caráter polimórfico e por sua conspicuidade nos diferentes genomas. Marcadores microssatélites, no entanto, são de caráter fortemente espécie-específicos, sendo sua transferência heteróloga (amplificação cruzada) geralmente limitada a poucas espécies próximas, necessitando de desenvolvimento de novo para organismos de interesse. Este projeto, portanto, tem como objetivo a demonstração de um conceito biotecnológico para o desenvolvimento de marcadores moleculares de DNA microssatélite multiespecíficos, que possam ser aplicados simultaneamente em uma ampla faixa filogenética de diferentes espécies de peixe de piracema, S. brasiliensis, B. orbignyanus, P. lineatus e M. obtusidens. Estas espécies são muitas vezes utilizadas em conjunto em programas de mitigação de impactos ambientais, na bacia do rio Grande, MG. Isso se torna possível com a aplicação de dados oriundos de sequenciamento de nova geração (NGS) de múltiplos genomas das espécie-alvo, que acelera a descoberta de novos loci microssatélites e permite a comparação direta destas regiões entre espécies distintas. Foram selecionados arbitrariamente cinco loci microssatélites compartilhados entre P. lineatus e M. obtusidens para os testes empíricos, a partir de um painel mais amplo de 977 loci microssatélites caracterizados por NGS. A avaliação de variabilidade genética foi aferida sobre uma amostra populacional de 20 indivíduos de cada espécie-alvo, oriundas de pisciculturas da bacia do rio Grande (Itutinga e Volta Grande). Dois marcadores microssatélites multiespecíficos, denominados Poli1 e Poli2 obtiveram amplificação em todas as espécies-alvo. Os demais apresentaram pelo menos uma amplificação para cada espécie-alvo. O locus Poli1 está em equilíbrio de Hardy-Weinberg em S. brasiliensis e o locus Poli2 está em equilíbrio de Hardy-Weinberg em S. brasiliensis, B. orbignyanus e P. lineatus. No locus Poli1, a amostra de B. orbignyanus exibiu caráter monomórfico. Foram também conduzidas análises bioinformáticas de outros potenciais novos marcadores multiespecíficos. Os resultados aqui discutidos demonstram a viabilidade de desenvolvimento de marcadores multiespecíficos, para uma gama de espécies diferentes, úteis no gerenciamento da produção e conservação de recursos pesqueiros.

Cannabis sativa L., popularmente conhecida como maconha, tem sido usada por milhares de anos no tratamento de diversas doenças, com destaque para neurológicas. Seus efeitos são associados à presença de metabólicos secundários denominados canabinoides, sendo os principais: o canabidiol (CBD) e o tetrahidrocanabinol (THC). A demanda crescente desses compostos é evidente, principalmente, do CBD para o tratamento da ansiedade. No entanto, o cultivo de C. sativa e a produção de medicamentos contendo CBD ainda são estritamente regulamentados em muitos países. Diante disso, este trabalho tem como objetivo utilizar técnicas de cultivo in vitro de C. sativa para produção de CBD e analisar seu efeito ansiolítico em peixes-zebra. As sementes utilizadas foram obtidas de material apreendido pela Polícia Civil de Minas Gerais (Divinópolis) para o estabelecimento das plântulas. A indução de calos e sua manutenção em diferentes meios nutritivos foram utilizadas para a produção de CBD. Foram analisados os aspectos macro e micro morfológicos e histológicos dos calos, além dos extratos para detecção e quantificação de CBD. E por fim, os calos produzidos com maior teor de CBD foram utilizados como tratamento de peixes-zebra, no teste do tanque novo, para analisar seu efeito ansiolítico. Por meio do presente trabalho foi possível estabelecer in vitro plântulas da espécie C. sativa, mesmo com baixa taxa de germinação e alta de contaminação por fungos. Também foi possível observar que explantes com origem distintas responderam de forma diferente a um mesmo regulador de crescimento. A indução de calos ocorreu de forma satisfatória, com alguns tratamentos ocasionando a produção CBD, e, possivelmente, de THC e canabinol (CBN). O efeito ansiolítico dos calos foi comprovado mediante o aumento da atividade exploratória e locomotora dos peixes-zebra após o tratamento. Diante disso, foi possível concluir que o cultivo in vitro pode ser uma alternativa a ser utilizada para produzir canabinoides naturais, principalmente o CBD. Ademais, os calos ricos em CBD produzidos neste estudo podem se tornar um meio de produção de novos fármacos para o tratamento de ansiedade.

As doenças orais acometem cerca de 90% da população mundial gerando relevante impacto socioeconômico. Neste sentido, a cárie dental e as doenças periodontais figuram entre as doenças mais prevalentes, ao passo que, o câncer oral, é relacionado como umas das patologias de maior morbimortalidade. Todavia, o exame clínico convencional, o qual, é considerado, padrão-ouro para rastreio de lesões orais, tem resultado em baixa taxa de detecção para o câncer oral devido à ausência de sinais em fases precoces ou à similaridade dos sinais com o de outras patologias orais benignas dificultando a detecção e diagnóstico diferencial. Assim, exames complementares como o uso da fluorescência óptica de campo amplo tem sido desenvolvidos para auxiliar o exame clínico na detecção e diagnóstico de patologias orais. Neste sentido, os objetivos deste estudo foram avaliar a aplicação do uso da fluorescência óptica de campo amplo além do contexto de desordens potencialmente malignas e câncer oral, incluindo a proservação periódica de pacientes com histórico de lesões orais, auxílio ao diagnóstico diferencial, visualização do biofilme oral, além de proceder o desenvolvimento e a transferência de tecnologia de um dispositivo de medição de lesões orais e dermatológicas. Para tanto, foram examinados pacientes sob livre demanda em um serviço público destinado ao diagnóstico oral, com aquisição de imagens sob luz visível e fluorescência óptica de campo amplo e, em casos suspeitos uma biópsia foi realizada. Assim, os resultados mostram o emprego da técnica como auxiliar no rastreio e diagnóstico de papiloma escamoso oral, língua pilosa, vitiligo mucoso, tatuagem por amálgama, câncer oral, mucosite peri-implantar, cárie dental e alterações referentes ao tecido duro dental e restaurações. Em adição, procedeu-se o desenvolvimento e transferência de tecnologia de um dispositivo de medição de lesões orais e dermatológicas. Portanto, conclui-se que o uso de fluorescência óptica de campo amplo possibilita uma gama de aplicações clínicas na rotina odontológica de forma rápida, segura, não-invasiva e indolor. Além disso, a prototipagem da inovação tecnológica resultante do estudo permitiu a sua transferência de tecnologia.

ESTUDO DE UM BIOPROCESSO PARA BIORREMEDIAÇÃO DE SORO DE RICOTA E PRODUÇÃO DE EXTRATO DE LEVEDURAS UTILIZANDO KLUYVEROMYCESL MARXIANUS

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A busca de substâncias de origem natural, que possam ser utilizadas como capturadoras de radicais livres e/ou pelo seu potencial larvicida é um assunto cientificamente interessante e intelectual. Isso porque essas moléculas apresentam potencial terapêutico para prevenção de doenças degenerativas, como o Parkinson e Alzheimer, doenças cardiovasculares, neoplasias, podendo até ser usadas no combate à proliferação de culicídeos, responsáveis pela disseminação de doenças como dengue, Zika vírus e filariose. Os produtos mais utilizados no combate aos mosquitos possuem em sua composição substâncias sintéticas não biodegradáveis e bioacumilativas. Muitas espécies do reino Plantae desenvolveram mecanismos de defesa para sua sobrevivência, como a síntese de metabólitos secundários, que podem ser utilizados com outras perspectivas. É bem descrito na literatura que, óleos vegetais apresentam atividades antioxidante e larvicida. Existem estudos de atividades biológicas das folhas e das flores de Tecoma stans, porém estudos com suas sementes são escassos. O objetivo desse trabalho foi a obtenção e avaliação as atividades antioxidante e larvicida do extrato etéreo (EE), ácidos graxos (AG) e ésteres metílicos (FAME) obtidos a partir de sementes de T. stans. EE foi obtido pela extração com éter de petróleo em Sohxlet. Em seguida, EE foi hidrolisado e esterificado para obtenção de AG e FAME, respectivamente. No extrato etéreo detectou-se esteroides, terpenos e alcaloides. Este extrato exibiu potencial antioxidante (CE₅₀ = 0,92 µg/mL), foi atóxico para Artemia salina (DL₅₀ > 1000 µg/mL) e teve toxicidade moderada para Culex quinquefasciatus (DL₅₀ = 188,27 µg/mL). Os ésteres metílicos demonstraram atividade antioxidante (CE₅₀ = 1,03 µg/mL), foram tóxicos para A. salina (DL₅₀ = 7,52 µg/mL) e pouco tóxicos para C. quinquefasciatus (DL₅₀ = 449,03 µg/mL). Já os ácidos graxos mostraram atividade antioxidante (CE₅₀ = 0,91 µg/mL), foram tóxicos para A. salina (DL₅₀ = 486,27 µg/mL) e para C. quinquefasciatus (DL₅₀ = 20,92 µg/mL). Os ácidos graxos apresentaram concentração 23 vezes mais tóxica para C. quinquefasciatus quando comparado com A. salina, o que indica seletividade e fomenta mais estudos quanto a atividade inseticida. Os resultados desse trabalho são promissores e demonstram grande relevância, visto que este é o primeiro relato das atividades antioxidante e larvicida de amostras obtidas de sementes de T. stans.

A família Smilacaceae possui 310 espécies, distribuídas em regiões temperadas, tropicais e subtropicais. Smilax brasiliensis, conhecida como "salsaparrilha" e "japecanga", é uma planta nativa do Cerrado brasileiro, usada na medicina popular como um antirreumático, anti-sífilis, anti-hipertensivo e diurético. O objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades antioxidante, alelopática e larvicida, além dos efeitos citotóxico, genotóxico e antigenotóxico, do extrato metanólico e das frações das folhas de S. brasiliensis. As folhas foram coletadas, secadas em estufa e trituradas em moinho de facas. O extrato foi obtido por extração com éter de petróleo e, posteriormente, com metanol, em aparelho Soxhlet. A partir do extrato metanólico foram obtidas as frações diclorometânica, acetoetílica e hidrometanólica. Os principais constituintes presentes no extrato metanólico e frações, identificados por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (CLAE-DAD-EM), foram flavonoides glicosilados e não glicosilados, especialmente com a quercetina, e fenilpropanoides, como ácidos clorogênicos. Dentre os flavonoides, identificou-se rutina e quercetina nas subfrações. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante. As amostras apresentaram efeito inibitório no crescimento, especialmente de sementes de cebola. O índice mitótico foi analisado nas amostras, entretanto, não indicou efeito citotóxico sobre as células testadas. Efeito genotóxico foi observado. O extrato e as frações apresentaram efeitos antigenotóxico, em todas as concentrações testadas, onde foram capazes de reverter as anormalidades cromossômicas causadas pelo glifosato. Um protocolo de germinação in vitro para as sementes de cebola foi estabelecido. O extrato e as frações foram inócuos em Artemia salina e ao Culex quinquefasciatus.

O desenvolvimento de resistência do Plasmodium spp. aos medicamentos antimaláricos dificulta o tratamento da doença, tornando necessária a busca por novas moléculas com atividade antimalárica bem como formulações que transportem estes fármacos. Tem-se como objetivo o desenvolvimento de uma nanoemulsão do tipo óleo em água capaz de incorporar a 10-(4,5-dixidrotiazol-2-iltio)decan-1ol (tiazolina), um protótipo sintético antimalárico, para tratar a malária por vial oral. A fase oleosa da nanoemulsão é constituída de ácido oleico, butilhidroxianisol, parabenos e tiazolina, e a fase aquosa é formada pelo polietilenoglicol (15)-hidroxi-estearato (Solutol HS15) e água purificada. Essa formulação é constituída por excipientes que favorecem a biodisponibilidade da tiazolina e a sua liberação controlada e prolongada. Um método analítico foi desenvolvido e validado para quantificação da tiazolina. Fez-se o delineamento fatorial 2 3 com réplicas no ponto central a fim de avaliar a influência dos excipientes nas características físico-químicas da nanoemulsão (tamanho de gotícula, IPD, potencial zeta e eficiência de encapsulação). A formulação, selecionada a partir do delineamento, apresentou tamanho de gotícula de 248,80 nm, índice de polidispersão de 0,236 indicando a homogeneidade de tamanho de gotículas, potencial zeta de -38,5 mV e eficiência de encapsulação de 97,17% m/m. O ensaio de liberação in vitro mostrou a liberação controlada da tiazolina em meios ácido (pH 2,0) e neutro (pH 6,86), que simulam os fluidos gástrico e intestinal, respectivamente. A nanoemulsão contendo tiazolina se manteve estável por 180 dias em condições de armanzenamento drásticas (40 oC e 25% de umidade), indicando que a formulação apresenta estabilidade nas diversas condições climáticas existentes no Brasil. A nanoemulsão apresentou atividade antimalárica superior à da tiazolina livre (p < 0,05) e teve índice de seletividade em relação ao fibroblasto pulmonar (WI-26VA4) de 12,46, sendo tóxico seletivamente aos parasitos. A atividade antimalárica in vivo da nanoemulsão contendo 25 mg/kg da tiazolina não apresentou diferença estatisticamente significativa em comparação à cloroquina (p > 0,05). Entretanto, essa formulação não alcançou taxa de cura e teve atividade modesta em relação à sobrevida dos animais. A nanoemulsão contendo tiazolina representa uma estratégia para o desenvolvimento de um novo medicamento para o tratamento da malária, combinando um novo candidato antimalárico e a nanoemulsão.

O gênero Eriosema, composto por 150 espécies, em nove táxons têm sua ocorrência entre África e Américas. Eriosema pycnanthum é uma leguminosa da família Fabaceae, componente da tribo Phaseoleae e da subtribo Cajaninae. No Brasil os estudos envolvendo o gênero Eriosema se resumem à descrição de novos táxons ou ao registro ocasional em levantamentos da flora regional. O presente trabalho visa avaliar a ação cicatrizante do extrato hidroalcoólico de E. pycnanthum, além de avaliar a estrutura vegetal, promover a multiplicação in vitro da espécie e o seu replantio em ambiente natural. O levantamento do uso de plantas medicinais, em especial E. pycnanthum, na região de Itapecerica, Minas Gerais foi submetido e aprovado pelo CEPES-UEMG com o número 2.812.199, onde a adoção livre e espontânea dos populares ao tratamento com E. pycnanthum foi registrado através de questionário, acompanhamento e fotos da evolução do quadro. Mapas de dispersão foram construídos a partir de trabalhos e registros de depósito de exsicatas de E. pycnanthum pelos territórios das Américas, Minas Gerais e Itapecerica. A multiplicação da espécie in vitro, demonstra baixa responsividade dos explantes aos tratamentos convencionais. Em biorreator, o aumento da massa radicular, ocorre de maneira lenta requerendo para isso melhoras no sistema e meios de cultivo com elicitação. O baixo índice de germinação de suas sementes, se deve em parte à rápida queda da eficiência respiratória, comprovada pelo teste de Brometo de Tetrazólium, além de dormência tegumentar, comprovada após retirada manual do tegumento. A análise com o software DCCR-USP mostra que o tratamento com solução de 2% de KNO3 é ineficaz na melhora destes índices. A análise anatômica mostra folhas anfiestomáticas, estômatos paracíticos, mesófilo Dorsiventral com parênquima paliçádico unisseriado prevalente, feixes vasculares concentrados próximos à nervura principal sem grandes alterações entre folhas ex vitro e in vitro que no entanto, têm diferenças quanto à continuidade do parênquima paranerval. As sementes não possuem óleos más apresentam ampla reserva de amido e são dotadas de 9 camadas celulares concentradas sobre o embrião. A composição do extrato analisada por CCD da raiz de campo, in vitro e do chá, mostram fitosteróis como β-sistoterol, β-Escina e Estigmasterol além de fenóis como o Ácido Cinâmico, Catequina, Rutina e Quercetina. O teor de Fenóis totais, Flavonoides, Fitoesteróis e Alcaloides são maiores nos extratos das raízes in vitro. O RMN, mostra espectros semelhantes de composição das xi soluções más com concentrações maiores nos extratos de raízes in vitro e revela a presença de grupos flavonóis, antocianinas e açucares além de compostos anoméricos e glicosídicos. O extrato hidroalcoólico das raízes de campo apresenta ação proliferativa sobre linhagens de fibroblastos e queratinócitos in vitro sem presença de ação citotóxica em linhagens normais. A substituição da água pelo chá das raízes de campo nos testes animais, induzem à melhora do quadro em especial durante a fase inflamatória do processo cicatricial.

Avaliação da atividade antitumoral das frações de Annona coriacea Mart. sobre linhagens de cabeça e pescoço

Desenvolvimento de novos compostos com potencial ação antimalárica utilizando duas estratégias: síntese orientada e reposicionamento de fármaco

A espécie Solanum lycocarpum, possui relevância científica, ambiental, na medicina popular e na alimentação. O objetivo deste trabalho consistiu em avaliar as atividades antioxidante, anti-inflamatória e antinociceptiva para os frutos maduros de S. lycocarpum. Os frutos foram coletados, secados, triturados e extraídos por percolação exaustiva; obtendo-se o extrato etanólico (EE) que foi particionado com solventes de polaridades crescentes, obtendo-se as frações hexânica (HEX), diclorometânica (DCM), acetoetílica (AC) e hidroetanólica (HE). Foi determinado o conteúdo de compostos fenólicos, flavonoides totais e taninos no EE e frações, e realizada a análise do perfil cromatográfico do EE, sendo identificados glicoalcaloides esteroidais, os alcaloides esteroidais solasodina e peimimina, bem como os ácidos fenólicos 3,5-di-O-E-cafeoilquínico, 4,5-di-O-E-cafeoilquínico, 3,5,5-tri-O-E-cafeolilquínico, O-coumaroil dicafeoilquínico e O-cafeoildicoumaroilquínico. O EE e todas as frações apresentaram atividade antioxidante. O EE e as frações HEX, DCM e HE, administrados via intraperitoneal, demonstraram atividade anti-inflamatória nas duas fases do modelo edema de pata induzido por carragenina, e as análises histológicas do coxim plantar dos animais, mostraram que o EE e a fração DCM, na dose 300 mg/Kg, reduziram consideravelmente a migração leucocitária. A fração DCM administrada via oral também exibiu atividade antiedematogênica. O EE e a fração DCM demonstraram atividade antinociceptiva, nos testes de nocicepção induzida por formalina, contorções abdominais induzidas por ácido ácetico e teste de placa quente, com ação antinociceptiva na nocicepção neurogênica e inflamatória. Na nocicepção com o envolvimento do sistema opioidérgico no teste de formalina, o antagonista naloxona não revertou a ação antinociceptiva do EE e fração da DCM. Os resultados demonstraram que os frutos maduros de S. lycocarpum possuem potencial antioxidante, anti-inflamatório e antinociceptivo e que os compostos fenólicos e flavonoides, detectados no extrato e frações, bem como peiminina, solasodina, 3,5-di-O-E-cafeoilquínico, 4,5-di-O-E-cafeoilquínico e 3,5,5-tri-O-E-cafeolilquínico detectados no EE, estão correlacionados as atividades biológicas, haja vista que estes compostos exibem estas propriedades descritas em outros estudos científicos.