Os esteróides cardiotônicos (CTS) são uma classe de compostos naturais que têm demonstrado efeitos positivos no crescimento e proliferação celular em concentrações nanomolares. Seu mecanismo de ação está relacionado à sua capacidade de interagir com a enzima Na+ , K+ -ATPase, modulando cascatas de sinalização intracelular. Foi demonstrado que a 21-benzilideno-digoxina (21-BD) é um composto semi-sintético derivado da digoxina, um CTS, é capaz de induzir a síntese de colágeno e aumentar a viabilidade celular, sendo um candidato para a cicatrização de feridas. Este trabalho busca investigar os efeitos da 21-BD no processo de cicatrização in vivo em linhagens de queratinócitos epidérmicos humanos (HaCat) e fibroblastos primários humanos e ex vivo no modelo hOSEC. O teste de MTT demonstrou que a 21-BD não foi citotóxica para essas células em nenhuma das concentrações testadas. Além disso, o tratamento com 21-BD nas concentrações de 100 pM e 1 nM por 24 horas promoveu um fechamento da ferida em 96,9% e 99%, respectivamente. A marcação dos filamentos de actina revelou que tanto os fibroblastos quanto HaCat tratados com 21-BD apresentaram uma morfologia alterada, com citoplasma expandido e microfilamentos de actina proeminentes. Esses dados sugerem que a 21-BD, um esteroide cardiotônico, ativa vias de sinalização celular, como as envolvidas com a síntese de colágeno. Conforme os dados apresentados, a 21-BD demonstra um potencial para estimular a migração, ativação celular e síntese de colágeno.

A espécie Bidens subalternans DC, pertencente à família Asteraceae, é uma planta típica das regiões Centro-Oeste, Sudeste e Sul do Brasil, sendo conhecida popularmente como carrapichode-pontas, picão e picão-preto. Essa espécie se desenvolve em áreas de lavouras e fruticultura, onde é considerada indesejável por ser hospedeira de pragas e pela presença de aristas espinescentes nos frutos. Estudos recentes demonstram o promissor potencial antioxidante de diversas espécies do gênero Bidens, valorizadas por seus compostos bioativos. O objetivo deste trabalho foi realizar a caraterização fitoquímica, determinar o conteúdo de compostos fenólicos e flavonoides totais, e avaliar a atividade antioxidante e a toxicidade aguda do extrato etanólico bruto e das frações das folhas de B. subalternans. O extrato foi obtido por turbo-extração com
etanol e as frações foram obtidas por partição com solventes de polaridades crescentes. Na triagem fitoquímica, verificou-se a presença de esteroides, saponinas, alcaloides e cumarinas no extrato etanólico (EE); cumarinas e flavonoides nas frações diclorometânica (DCM), acetoetílica (ACE) e hidroetanólica (HE); além de taninos em DCM e saponinas em HE. A composição do EE e da fração DCM foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). No EE, os constituintes majoritários foram o fitol, o linolenato de etila, o bis(2-etilhexil) ftalato, o ácido palmítico, o palmitato de etila, além de compostos terpênicos, ácidos graxos insaturados e esteroide. No DCM, os constituintes principais foram o
hidrocarboneto alifático untriacontano, 2-nonanona, 2-decanona, loliolídeo, ácido palmítico e bis(2-etilhexil) ftalato. A análise por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a Detector de Matriz de Diodos (CLAE-DAD), com detecção em 254 nm, sugeriu perfis cromatográficos semelhantes aos de derivados de ácidos cinâmicos. Foram evidenciados sinais compatíveis com ácido clorogênico nas frações EE e DCM, além de derivados do ácido cinâmico nas frações EE, DCM e HE. Também foram observados espectros similares a
derivados do ácido cumárico em EE e DCM, e derivados do ácido cafeico nas frações ACE e HE. A partir dos espectros de UV, foi sugerida ainda a presença de derivados de flavonoides, com indicação de flavonol em EE, flavonas em DCM e flavanonas nas frações DCM, ACE e HE. A fração hidroetanólica apresentou teores de compostos fenólicos significativamente superiores aos observados na fração diclorometânica, enquanto a fração acetoetílica destacou-se pelos maiores teores de flavonoides totais. Nos ensaios de atividade antioxidante pelos métodos DPPH e FRAP, as amostras apresentaram atividade com diferença estatisticamente
significativa (p < 0,05), sendo a fração ACE com maior potencial, seguida da fração DCM, do extrato etanólico e da fração HE. No ensaio com DPPH, as frações DCM e ACE apresentaram atividade superior ao padrão BHT, enquanto no teste FRAP exibiram atividade similar ao padrão. A correlação positiva observada entre o teor de fenólicos e a ação antioxidante reforça o potencial biológico das frações ACE e DCM. Os resultados mostraram que não houve mortalidade das larvas de Artemia salina, indicando ausência de toxicidade aguda nas
condições testadas. Este estudo contribui com dados inéditos para a caracterização química e biológica da espécie Bidens subalternans.

Este estudo investiga o potencial biotecnológico do pericarpo de Hymenaea courbaril L. (Fabaceae: Detarioideae), espécie nativa do Cerrado, por meio da avaliação das atividades antioxidante e antibacteriana e toxicidade frente a sistemas biológicos. O pericarpo seco foi submetido à extração exaustiva por percolação, empregando-se etanol como solvente, originando o extrato etanólico bruto (EEB). A seguir, o EEB foi submetido a partição líquido-líquido, originando as frações hexânica (HEX), diclorometânica (DCM), acetato de etila (ACE) e hidroetanólica (HE). As amostras foram submetidas à triagem fitoquímica, análise por cromatografia em camada delgada (CCD) e a avaliação dos teores de compostos fenólicos e flavonoides totais. A atividade antioxidante foi avaliada pelo método do radical livre 2,2-difenil-1-picril-hidrazila (DPPH) e para a avaliação da atividade antimicrobiana, as amostras foram testadas contra bactérias (gram-positivas e gram negativas) e leveduras do gênero Candida. A toxicidade das amostras foi avaliada por meio do teste de letalidade frente a Artemia salina. A triagem fitoquímica revelou a presença de flavonoides em todas as amostras analisadas, de alcaloides no EEB e cumarinas na fração ACE. A CCD permitiu a visualização de manchas sugestivas da presença de compostos apolares, como os fitosteróis. A fração HEX apresentou os maiores teores de compostos fenólicos totais, seguido pelo EEB e frações ACE e DCM e os teores de flavonoides foram mais elevados no EEB. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante dose-dependente, sendo que o EEB e as frações apresentaram uma porcentagem de inibição do DPPH igual a do padrão 2,6-di-tert-butil-4-metilfenol (BHT), nas concentrações de 1 a 250 mg/mL, com concentrações efetivas para capturar 50% de DPPH (CE₅₀) variando entre 50,59±6,55 a 304,16 ± 25,32 µg/mL.  O EEB e as frações HEX e ACE apresentaram atividade contra todas as cepas de S. aureus testadas, com concentração inibitória mínima de 250 µg/mL. Todas as amostras apresentaram toxicidade dose-dependente contra A. salina. As maiores taxas de mortalidade foram observadas na concentração de 1000 mg/mL, com uma taxa de mortalidade de náuplios superior a 96% para o EEB e a fração HEX. O EEB e as frações HEX e ACE apresentaram os menores valores de DL₅₀ e DL₉₀ (dose letal para 50% e 90% da população, respectivamente)_, sendo considerados tóxicos para A. salina. Estes resultados reforçam o potencial biológico do pericarpo de H. courbaril e sinalizam a necessidade de análises fitoquímicas complementares para identificação dos compostos envolvidos nas atividades encontradas.

A espécie Tecoma stans, nativa do México e Estados Unidos, tradicionalmente empregada na medicina popular, apresenta uma diversidade fitoquímica relevante, incluindo flavonoides, taninos e cumarinas. Esse trabalho visou avaliar o potencial antioxidante e larvicida, a toxicidade e caracterizar fitoquimicamente o extrato metanólico (EM) e de suas frações (diclorometânica – DCM, acetoetílica – ACE e hidrometanólica – HID), obtidas a partir do pericarpo da planta. Foi realizada a extração do material vegetal seco em aparelho Soxhlet com metanol, obtendo-se EM, que foi particionado para a preparação das frações DCM, ACE e HID. Essas amostras foram triadas fitoquimicamente para caracterização de sua composição, quantificados os compostos fenólicos e flavonoides totais e analisadas por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG-EM), avaliadas quanto ao seu potencial antioxidante através dos ensaios 2,2-difenil-1-picril-hidrazila (DPPH) e pelo poder redutor dos íons férricos (FRAP), larvicida sobre Aedes aegypti, e quanto a toxicidade utilizando-se modelo de Artemia salina. Na triagem fitoquímica, foram detectadas cumarinas em EM, HID, ACE e DCM. Flavonoides, triterpenos e alcaloides foram detectados DCM, já em ACE detectou-se taninos condensados. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante nos dois ensaios utilizados. A análise por CCD sugeriu a presença de compostos fenólicos. A análise por CG-EM da fração DCM mostrou predominância de compostos nitrogenados, álcoois, componentes de óleos essenciais, cetonas, ésteres, ácidos graxos, terpenos, hidrocarbonetos e esteroides, já na fração ACE houve a predominância de compostos oxigenados de polaridade intermediária, distribuídos em diferentes classes, incluindo ácidos graxos, ésteres, álcoois, componentes de óleo essencial, hidrocarbonetos, aldeídos, cetonas e terpenos. No teste DPPH, a fração ACE apresentou a menor CE₅₀ (14,87 µg/mL), indicando maior eficácia antioxidante, seguida por DCM (32,77 µg/mL), EM (77,02 µg/mL) e HID (89,07 µg/mL), todas mais eficazes que o controle BHT (84,38 µg/mL). No método FRAP, as frações também demonstraram elevada capacidade redutora, com destaque para as frações DCM (4,83 µg/mL) e HID (9,93 µg/mL). A quantificação dos compostos indicou que, DCM foi a fração mais rica em fenóis totais (113,81 µg EAG/mg), enquanto HID apresentou o maior teor de flavonoides (46,93 µg EQ/mg). A avaliação toxicológica frente à Artemia salina indicou que apenas a fração ACE exibiu toxicidade, com CL₅₀ de 539,61 µg/mL. Todas as amostras exibiram potencial larvicida sobre A aegypti, especialmente as frações ACE e HID, com valores de DL₅₀ de 298,00 e 276,00 µg/mL, respectivamente. Quando se calcula a seletividade das amostras em relação aos dois ensaios, verifica-se que a fração HID apresenta o melhor perfil seletivo, combinando alta atividade larvicida com menor toxicidade relativa, sendo, portanto, a fração mais promissora para aplicação biotecnológica. Esses resultados demonstram que o pericarpo de T. stans, um subproduto vegetal, é uma fonte relevante de compostos bioativos. Esse é o primeiro relato, de acordo com o nosso conhecimento, para o estudo fitoquímico e avaliação da atividade antioxidante, larvicida e toxicidade de frações polares do pericarpo da espécie Tecoma stans.

A malária é uma doença parasitária que causa milhares de mortes em todo o mundo, sendo o Plasmodium falciparum um dos principais agentes etiológicos. Atualmente, alguns parasitas desenvolveram resistência a medicamentos antimaláricos, o que destaca a necessidade de novos antimaláricos para
tratamento e controle. Neste estudo, inicialmente, foram avaliados três flavonoides isolados dos frutos de D. lacunifera, 7,3',4'-triidroxiflavona (1), 7,3',4'-triidroxiflavanona (2) e (-)-eriodictiol (3), quanto à atividade
antiplasmodial e citotóxica. O composto 2 apresentou os melhores resultados de concentração inibitória contra a cepa W2 de P. falciparum (IC50 = 7,35μM), com baixa citotoxicidade contra a linhagem de fibroblastos humanos (WI-26 VA4) (IC50> 100 μM) e alto índice de seletividade (IS = 13,61). A análise in silico
do mecanismo de ação do composto 2 foi realizada selecionando-se os 5 complexos cristalográficos com a melhor energia de ligação, a saber: 1O5X, 2OK8, 2VFA, 4C81 e 4N0Z, sugerindo mais de um modo de ação. Os compostos atenderam aos critérios ADMET, indicando bons resultados de biodisponibilidade. Esses resultados podem levar a que esta molécula seja submetida a estudos adicionais. Posteriormente, os compostos derivados triazólicos de N,N-dimetiltriptamina isolada do extrato etanólico das cascas de
M. tenuiflora (Willd.) Poir foram testados. O composto N,N-dimetil-2-(1-((1-(4 bromofenil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)metil)-1H-indol-3-il)etanamina (4) demonstrou um IC50 de 4,8 ± 0,32 μM com um índice de seletividade dez vezes maior, sendo mais ativo contra Plasmodium em comparação com a linhagem celular
humana utilizada (adenocarcinoma epitelial de ovário (TOV-21G)). A análise in silico do mecanismo de ação dos compostos 2–10 mostrou valores de energia de ligação melhorados em comparação com o composto 1, particularmente para N,N-Dimetil-2-(1-((1-(3-(trifluorometil)fenil)-1H-1,2,3-triazol-4-il)metil)-1H indol-3-il) etanamina (7) (-9,8 kcal/mol) em comparação com o ligante cristalográfico (-6,9 kcal/mol). Esses resultados ressaltam a importância das modificações estruturais, uma vez que a formação de novos sítios ativos
aumentou a eficiência dos compostos iniciais, gerando candidatos promissores para fármacos antimaláricos.

Bauhinia holophylla é uma espécie do Cerrado, amplamente distribuída no Brasil, cujo interesse medicinal reside em seus diversos compostos bioativos, dentre eles as lectinas. As lectinas são proteínas de natureza não imune, capazes de se ligar reversivelmente a carboidratos específicos e de aglutinar eritrócitos in vitro. A presença de diferentes isoformas de lectinas e proteínas em extratos vegetais, obtidos por métodos tradicionais de extração, muitas vezes dificulta uma caracterização individualizada das diferentes proteínas ali presentes. Dessa forma, a expressão de lectinas em sistemas heterólogos possibilita a obtenção dessas proteínas independente da exploração direta da planta, bem como o estudo direcionado para cada uma de suas isoformas. O objetivo geral desse trabalho foi realizar o sequenciamento do gene (Bhl) que codifica a lectina expressa em B. holophylla (BhL), caracterizá-lo por meio de ferramentas computacionais e estabelecer um protocolo de expressão heteróloga, para a obtenção de BhL recombinante. Para tanto, foram realizados ensaios de amplificação, clonagem e sequenciamento gênico, a partir de calos de B. holophylla, bem como a caracterização de uma isoforma da lectina BhL, por meio de ferramentas de bioinformática. Além disso, técnicas de biologia molecular foram otimizadas para a indução e expressão do gene Bhl em Escherichia coli BL21 (DE3), transformadas com plasmídeo pET-21a (+), sinteticamente construídos e contendo o gene Bhl. A purificação da lectina recombinante foi realizada por meio de cromatografia de afinidade metálica e sua confirmação, pela técnica de Western blotting, emprego de anticorpo monoclonal anti-cauda poli-histidina e por revelação cromogênica. Os resultados das análises de sequenciamento permitiram a identificação de um fragmento de 867 pb, compatível com a sequência gênica que codifica lectinas expressas em outras espécies do gênero Bauhinia. Uma vez que não havia registros prévios em bases de dados públicas, a sequência do gene Bhl foi depositada no repositório GenBank. As análises in silico demonstraram que BhL possui 289 aminoácidos, peso molecular de 31,9 kDa e o ponto isoelétrico teórico de 5,79. Ademais, a sequência que codifica BhL demonstrou alta similaridade gênica e identidade proteica em relação a lectinas de B. forficata (90%), B. variegata (79,04%), B. purpurea (78,01%) e B. ungulata (85,27%). Domínios proteicos conservados, sítios catalíticos e aminoácidos preservados foram observados em BhL, aproximando-a das lectinas de outras espécies de leguminosas. A predição também sinalizou a presença de peptídeo sinal na extremidade N-terminal de BhL e função molecular associada à atividade de reconhecimento de carboidratos. Tais informações contribuíram para o estabelecimento de um protocolo otimizado para a indução e expressão da lectina, em Escherichia coli BL21 (DE3), empregando-se plasmídeos pET-21a (+) contendo o gene que codifica BhL. Assim, os resultados alcançados pelo presente trabalho permitiram não só o estabelecimento de um protocolo para a obtenção de BhL recombinante, como também viabilizaram a exploração futura do seu potencial terapêutico e farmacológico.

As espécies de peixes migratórios Salminus brasiliensis, Brycon orbignyanus, Prochilodus lineatus e Megaleporinus obtusidens possuem grande importância ecológica, econômica e cultural na América do Sul. Estes organismos encontram-se ameaçados por vários fatores como barragens hidrelétricas, introdução de espécies invasoras, poluição e degradação do habitat. Os marcadores moleculares microssatélites são importantes ferramentas biotecnológicas, particularmente para o levantamento da variação genética de populações devido à codominância, hipervariabilidade e distribuição no genoma. Embora esses marcadores sejam normalmente de caráter espécie-específicos, o que exige o seu desenvolvimento de novo para organismos de interesse, uma forma tradicional de contornar essa limitação é sua transferência para espécies próximas (amplificação cruzada ou heteróloga). No entanto, isso apresenta alguns entraves, como o baixo aproveitamento de loci testados, além da possível ocorrência de alelos nulos. A facilitação recente de obtenção de dados genômicos permite a comparação direta de regiões de DNA conservadas entre espécies. Assim, este trabalho visa o desenvolvimento biotecnológico de marcadores microssatélites multiespecíficos, capazes de serem aplicados simultaneamente em uma ampla gama filogenética de peixes migratórios, como S. brasiliensis, B. orbignyanus, P. lineatus e M. obtusidens, abrangendo pelo menos três famílias taxonômicas distintas, assim como o desenvolvimento de sistemas multiplex com estes marcadores de DNA. Foram selecionados 40 loci candidatos conservados e compartilhados entre genomas, a partir de um painel mais amplo de 977 microssatélites caracterizados por sequenciamento de nova geração. Dentre estes, 16 marcadores (Poli09, Poli11, Poli12, Poli18, Poli19, Poli20, Poli21, Poli23, Poli25, Poli26, Poli28, Poli31, Poli32, Poli34, Poli35 e Poli40) apresentam amplificação em todas as espécies-alvo; 14 amplificam em pelo menos duas espécies-alvo, enquanto 10 microssatélites não apresentam amplificação. A avaliação da variabilidade genética é realizada com uma amostra populacional de 20 indivíduos de cada espécie-alvo, provenientes da bacia do rio Grande, MG. A análise populacional evidencia até 17 alelos em S. brasiliensis, até 16 alelos em B. orbignyanus, até 13 alelos em P. lineatus e até 12 alelos em M. obtusidens. Os loci que estão em conformidade com o Equilíbrio de Hardy-Weinberg são: Poli18, Poli20 e Poli26 em S. brasiliensis; Poli20, Poli25, Poli26 e o Poli31 em B. orbignyanus; Poli18, Poli25 e Poli35 em P. lineatus, e em M. obtusidens Poli11, Poli20, Poli25, Poli26, Poli28 e o Poli40. No locus Poli11, a amostra de B. orbignyanus exibe caráter monomórfico o que pode evidenciar a baixa variabilidade genética em estoques dessa espécie. Além do conjunto de 16 marcadores microssatélites multiespecíficos apresentado, três sistemas multiplex totalizando 12 marcadores multiespecíficos é desenvolvido, representando uma redução de 75% no número de reações tipo PCR relativo à amplificação individualizada de cada marcador. A utilização desses marcadores multiespecíficos e dos sistemas multiplex oferecem vantagens como a redução de custos e aumento da celeridade nas análises genéticas, o que facilita o manejo de estoques naturais e cultivados dessas espécies, para finalidades comerciais ou de mitigação de impactos ambientais, fornecendo subsídios para o manejo da pesca e desenvolvimento da aquicultura no país.

Preservar a água tem sido uma prioridade global devido a uma crescente escassez e contaminação deste recurso. Contaminantes emergentes presentes na água, como corantes, representam riscos para a saúde e para o meio ambiente. Entre eles, o Azul Reativo 4 e o Preto Reativo 5, corantes utilizados na indústria têxtil, são frequentemente detectados em corpos d'água, mostrando resistência aos processos convencionais de tratamento. Este estudo investigou a eficiência e a capacidade de adsorção da coroa de abacaxi (Ananas comosus), uma planta amplamente disponível, na remoção de Azul Reativo 4 e Preto Reativo 5. Foram realizados estudos de Planejamento Fatorial para avaliar o efeito de quatro fatores (pH, massa do adsorvente, tempo de contato e concentração do adsorvato) na adsorção do corante com o uso de carvão ativado da coroa de abacaxi. Com o carvão ativado por 168 horas, foram obtidos os melhores resultados na escolha do material a ser utilizado na remoção de ambos os corantes, nas condições de pH 3, 100 mg do adsorvente e 50 mg L-1 do adsorvato. Os fatores mais significativos para a eficiência de adsorção foram a massa e o pH, enquanto a concentração inicial do adsorvato não apresentou efeito significativo no estudo. De forma geral, o modelo de Freundlich se mostra mais adequado para os sistemas analisados embora, devido à proximidade de valores, o modelo de Langmuir não se mostre descartável. Os achados sugerem que o uso da coroa de abacaxi pode ser uma solução viável e ecológica para a remoção de contaminantes emergentes.

A presença de contaminantes emergentes, como fármacos, em corpos hídricos tem despertado preocupação devido às potenciais implicações ambientais e à dificuldade de remoção por processos convencionais de tratamento de água. Nesse contexto, a adsorção surge como um método eficaz e de baixo custo para a remoção desses compostos. O presente estudo investigou a eficiência da adsorção de carbamazepina (CBZ) e ciprofloxacino (CIP) em carvão ativado produzido a partir da biomassa do caule e das folhas de aguapé (Eichhornia crassipes). As caracterizações estruturais e químicas do material foram realizadas para avaliar suas propriedades superficiais e os grupos funcionais responsáveis pela interação com os fármacos. Ensaios de equilíbrio, cinética e termodinâmica de adsorção foram conduzidos para determinar a capacidade de remoção e os mecanismos envolvidos. Os resultados mostraram que o modelo de Langmuir melhor descreveu as isotermas, indicando adsorção em monocamada, com capacidades máximas de adsorção de 113,5 mg g-1 para CBZ e 57,6 mg g-1 para CIP. Além disso, o ajuste ao modelo de Temkin sugere influência das interações entre adsorvato e adsorvente. A cinética foi mais bem ajustada ao modelo de pseudo-segunda ordem, indicando quimissorção como o mecanismo predominante. A análise pelo modelo de difusão intrapartícula indicou que esse não é o estágio limitante do processo. Já a análise termodinâmica demonstrou que a adsorção ocorre de forma espontânea e exotérmica. Interações hidrofóbicas e interações π–π desempenharam um papel significativo na adsorção. Os resultados demonstram que o carvão ativado derivado do aguapé é uma alternativa promissora para a remoção de fármacos de águas contaminadas, destacando-se por sua eficiência, baixo custo e sustentabilidade, com potencial para aplicações em processos industriais e ambientais.

Devido à constante busca por novas opções terapêuticas eficazes e seguras, a pesquisa e desenvolvimento de fármacos sintéticos vêm se intensificando e representam um progresso importante na medicina atual. Os compostos N-heterocíclicos, incluindo os alcaloides 3-alquilpiridínicos (3-APA) são moléculas com estrutura química distinta, que apresentam conhecida atividade antimicrobiana, antimalárica, antitumoral e antifúngica. Entretanto sua atividade citotóxica limita seu uso. Neste contexto, a pesquisa e desenvolvimento de análogos sintéticos pode fornecer opções terapêuticas seguras. Por isso, este estudo buscou avaliar a genotoxicidade de diferentes concentrações de três compostos sintéticos N-heterocíclicos em diferentes tipos celulares, a fim de entender o potencial terapêutico e possíveis efeitos danosos. Foram testados os compostos aqui denominados VKM28, VKM33 nas concentrações de 1,25 μM; 12,5 μM; 50 μM e 100 μM, e GSCB87 nas concentrações de 1 μM; 2 μM; 10 μM e 50 μM, selecionados com base em estudos prévios, empregando-se células tumorais humanas da linhagem A549 e células de fibroblasto pulmonar de hamster chinês da linhagem V79. A viabilidade celular foi determinada pelo método de exclusão do azul de Trypan enquanto para determinar a genotoxicidade o método utilizado foi o ensaio cometa alcalino. Resultados preliminares associados aos dados aqui obtidos revelaram que nenhum dos compostos se mostrou muito promissor no contexto de atividade antimalárica. No entanto os compostos VKM33 e GSCB87 se mostram como importantes candidatos a agentes terapêuticos quimioterápicos antitumorais, tendo em vista que, em determinadas condições, foram capazes de causar danos genéticos às células cancerígenas sem afetar a integridade genética de células normais. Entretanto, estudos adicionais devem ser realizados para melhor compreensão dos mecanismos de ação desses compostos e de sua efetiva segurança in vitro e in vivo.

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As sementes podem apresentar estado de dormência física resultante do aumento da impermeabilidade tegumentar e aumento da produção de inibidores, principalmente quando em maior tempo de armazenamento. Além da dormência física, as condições de armazenamento estão diretamente relacionadas à viabilidade das sementes, caracterizada pela capacidade ou não das sementes germinarem ao serem colocadas em um ambiente propício à germinação. Este estudo apresenta uma abordagem inovadora para avaliar a viabilidade e conservação de sementes de Cannabis sativa por meio de métodos avançados de armazenamento e análise. As sementes utilizadas foram doadas por uma associação de pacientes - lote S1 - e por pacientes que detém autorização judicial - lote S2 e S3 – e foram armazenadas sob diferentes condições de temperatura (25°, 4°, -16° e -195°C) e períodos de tempo (45, 90, 135 e 180 dias) além de serem submetidas a um teste de viabilidade utilizando tetrazólio. As sementes foram germinadas e avaliadas perante sua viabilidade em cada tratamento, temperatura e tempo de armazenamento. Os resultados indicaram que sementes desinfestadas apresentaram taxas de germinação mais baixas em comparação com sementes não desinfestadas, sugerindo que a presença de microrganismos pode ter uma influência no processo germinativo. De forma geral, sementes provenientes de fontes com controle de qualidade apresentaram melhores resultados germinativos, enquanto aquelas de origem desconhecida ou com histórico de armazenamento inadequado demonstraram menor viabilidade. Este estudo reforça a importância do controle de temperatura e da qualidade das sementes para a conservação e utilização eficaz de Cannabis sativa, contribuindo para o desenvolvimento de protocolos eficazes para a conservação e utilização de sementes dessa espécie especialmente para fins medicinais.

A hepatite delta (HDV) é considerada uma das formas mais graves das hepatites, necessitando
da presença do vírus da hepatite B (HBV) para que ocorra a infecção. Cerca de 18 milhões
dos 350 milhões portadores do HBV crônicos estão também infectados pelo HDV no mundo,
estimando-se que a infecção por HDV afete quase 5% das pessoas em todo o mundo, sendo
presente em todos os continentes. No Brasil, é identificada predominantemente na região da
Bacia Amazônica, representando 0,6% dos casos totais de todas as hepatites entre os anos de
2000 e 2022. Seu diagnóstico ainda possui gargalos significativos, o que leva a necessidade
de aperfeiçoamento das técnicas e antígenos disponíveis e desenvolvimento de novos testes.
Atualmente, o teste considerado mais adequado para diagnosticar a doença é o PCR,
entretanto, trata-se de um teste de alto custo e demanda de mão de obra, estrutura e
equipamentos especializados. Dessa forma, o desenvolvimento de um teste sorológico eficaz
em diagnosticar o HDV em fase aguda e crônica beneficiaria todo o cenário atual. A fim de
desenvolver um teste sorológico acurado, o objetivo desse trabalho foi triar por meio de
diversas análises de imunobioinformática os peptídeos mais promissores e avaliá-los
posteriormente em uma prova de conceito (ELISA). A proteína a ser utilizada nas análises in
silico foi definida com base em uma busca na literatura disponível sobre a doença, e, para
triagem dos epítopos mais promissores, a proteína foi submetida a análises de predição de
epítopos lineares com afinidade pelos receptores de antígenos de células B, antigenicidade,
similaridade com proteínas humanas ou com proteínas virais., Pe por fim, foi realizado o
alinhamento das diversas sequências da proteína disponíveis do GenBank. Após as
realizações das análises in silico propostas, foram selecionados dois peptídeos a serem
sintetizados, denominados Pep1 e Pep2, além de e um terceiro peptídeo denominado Pep3,
sendo este a junção de Pep1+Pep2. Os peptídeos foram testados em um ELISA ppreliminar
para avaliar sua reatividade, . Pep1 e Pep2 foram reconhecidos por somente dois de seis soros
positivos, não apresentando diferenças estatísticas significantes no reconhecimento por soros
de indivíduos negativos e positivos para HDV. Por outro lado, Pep3 apresentou reatividade
frente a cinco de seis soros positivos, além de significativa diferença estatística entre soros
negativos e positivos e foi observado que o Pep3 apresentou maior reatividade e capacidade
diagnóstica sob a concentração de 100ng, demonstrando sua potencialidade a ser utilizado em
um teste diagnóstico. Apesar de o ELISA preliminar se mostrar promissor com relação ao
Pep3,Entretanto, novas avaliações ainda se fazem necessárias para resultados conclusivos a
cercaacerca da utilidade diagnóstica de Pep1 e Pep2. Visto a importância do diagnóstico
precoce para o tratamento e rastreamento da doença, o desenvolvimento de um teste
sorológico sensível e específico é crucial, especialmente considerando a gravidade e
prevalência da doença ao redor do mundo.

A intensificação da aquicultura tem impulsionado a busca por alternativas ao uso dos antimicrobianos já comercializados. Este estudo avaliou a atividade antimicrobiana in vitro e antibiofilme de extratos de própolis verde (etanólico e aquoso) frente às bactérias patogênicas Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeruginosa e Streptococcus agalactiae, além de propor um protocolo inédito para a análise da microbiota intestinal de peixes Hyphessobrycon eques alimentados com ração suplementada com própolis. Os testes de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) revelaram que o extrato aquoso apresentou atividade bacteriostática e bactericida contra A. hydrophila (CIM e CBM de 275 µg/mL), enquanto o extrato etanólico apresentou efeito bacteriostático contra P. aeruginosa (MIC de 573 µg/mL). Nenhum dos extratos foi eficaz contra S. agalactiae. Na avaliação antibiofilme, apenas o extrato aquoso reduziu significativamente biofilmes maduros de A. hydrophila, embora não tenha inibido sua formação. O protocolo in vivo demonstrou que a suplementação com extrato aquoso de própolis se relacionou a redução da abundância de bactérias Gram-negativas, com destaque para a menor abundancia de microrganismos do gênero Pseudomonas. Os resultados apontam a própolis como uma ferramenta terapêutica na aquicultura, atuando tanto na prevenção de infecções bacterianas quanto na promoção da saúde intestinal dos peixes.

O vírus Mayaro (MAYV), antes restrito a ciclo silvestre entre primatas não humanos e mosquitos Haemagogus, era dado como causa de infecção humana esporádica, com incidências limitadas a populações ribeirinhas do norte do país. Entretanto, já foi detectado ou tiveram casos suspeitos em pelo menos 11 estados, com destaque para Goiás, sugerindo uma expansão geográfica para áreas urbanas. Não há antivirais específicos ou vacinas licenciadas contra o MAYV, o que ressalta a importância da pesquisa de alternativas terapêuticas. Nesse contexto, extratos e compostos vegetais têm se mostrado promissores na busca por novos antivirais. O presente estudo avaliou a atividade antiviral de extratos, frações enriquecidas e compostos isolados a partir das espécies vegetais Smilax brasiliensis e Phyllanthus brasiliensis contra o MAYV. O estudo determinou os extratos mais promissores, os mecanismos de ação, e os ensaios foram aprofundados para as lignanas filantostatina A e tuberculatina, isoladas de P. brasiliensis. Inicialmente, foi avaliada a citotoxicidade para determinar a concentração citotóxica para 50% das células (CC₅₀). Em seguida, foi obtida a concentração efetiva protetiva para 50% das células infectadas (CE₅₀) e determinado o índice de seletividade (IS). Aos mais promissores, foram investigados possíveis mecanismos de ação. Para a espécie S. brasiliensis, os dados
mostraram que frações enriquecidas de ácidos graxos (AG) e ésteres metílicos (FAME) apresentam ação antiviral com CE₅₀ de 6,0 e 1,9 μg/mL e IS de 7,3 e 75,6, respectivamente. Quanto à P. brasiliensis, quatro extratos avaliados mostraram potente ação antiviral, com CE₅₀ entre 1,4 e 6,0 μg/mL e IS entre 90 e 337. Os extratos hexânico (16HEX) e hidroetanólicos (19HET-60 e 22HET-95) mostraram efeito virucida, o qual não foi
observado para o extrato etanólico (18ET-100), sem impacto na partícula viral. Os extratos 19HET-60 e 22HET-95 exibiram forte efeito inibitório na adsorção do vírus à célula hospedeira. A etapa de penetração viral, que é dependente de enzimas celulares, foi afetada apenas pelo extrato 22HET-95. Na avaliação dos compostos isolados, uma potente e seletiva ação antiviral foi detectada para as moléculas filantostatina A e tuberculatina, as quais reduziram fortemente a carga viral por diferentes mecanismos de ação. A filantostatina A afetou a etapa de adsorção viral, e a tuberculatina teve potente ação virucida. A análise por microscopia eletrônica revelou que, além desses efeitos, ambas as lignanas podem afetar também etapas intracelulares do ciclo viral, e a pesquisa in silico de alvos moleculares revelou que as lignanas interagem com a proteína C do capsídeo viral. Em conjunto, os dados mostram que as espécies vegetais em estudo são promissoras contra o MAYV, e seus compostos são altamente relevantes para futuros ensaios in vivo.

A busca por fontes alternativas de energia que possam substituir os combustíveis fósseis e
mitigar os impactos gerados pela aceleração do aquecimento global, impulsiona o
desenvolvimento e aprimoramento de tecnologias para geração de biocombustíveis. A
biomassa da semente de açaí (Euterpe oleracea Mart.) destaca-se como uma matéria-prima
promissora, devido a suas características estruturais, bem como seu significativo impacto
social, econômico e ambiental na região Norte do Brasil. Nesse sentido, o presente trabalho
propõe um estudo de pré-tratamento, sacarificação e fermentação da biomassa lignocelulósica
a partir de resíduos de sementes de açaí (Euterpe oleracea Mart.) para produção de etanol.

A malária é uma doença infecciosa causada pelo parasito do gênero
Plasmodium. Existem cincos espécies que infectam seres humanos. O
crescimento aumento no aparecimento de cepas multirresistentes ao atual
arsenal terapêutico antimalárico coloca em necessidade a busca por novos
compostos biologicamente ativo para tratamento da doença. O uso de técnicas
de modelagem molecular tem ganhado destaque nas últimas décadas por
tornar o processo de desenvolvimentos de fármacos mais rápido de barato.
Esse trabalho avaliou in sílico duas classes de potenciais compostos
antimaláricos, as N-acilhidrazonas e os β-carbolinicos. Os resultados foram
gerados a partir de cálculos de ancoragem molecular contra um banco de alvos

de Plasmodium facilparum, o BraMMT. Dos setes derivados de N-

acilhidrazonas avaliados durante testes in vitro, três deles mostraram atividade

e foram avaliados in sílico para análise do mecanismo de ação. O composto
AH5 mostrou pouca seletividade aos alvos, enquanto o AH4 mostrou maior
afinidade para o alvo 3PHC, que está associado a síntese de purinas no
parasito. A outra parte do trabalho avaliou 20 derivados β-carbolinicos, dos
quais 10 foram selecionados in sílico para serem sintetizados. Os derivados
mostraram afinidade pelo alvo 2OK8, que está associado a síntese de
isoprenóides. Os derivados selecionados para síntese mostraram atividade
antiplasmodial in vitro e posteriormente in vivo, sendo que nesse último inibiram
o desenvolvimento de malária cerebral em camundongos. Esses resultados
mostram que o uso de métodos de modelagem molecular pode auxiliar tanto no
estudo de mecanismo de ação de novos compostos, quanto na seleção de
compostos biologicamente ativos.

O vírus Zika (ZIKV) pertence ao gênero Flavivirus e teve atenção global em 2015-2016. Neste período ocorreu um surto no Brasil, e continua sendo um problema de saúde pública, principalmente para gestantes. Infelizmente, há uma falta de tratamentos específicos ou vacinas disponíveis para a doença do vírus Zika, tornando a prevenção o principal modo de controlar sua propagação. Como potencial solução para este problema, as plantas medicinais são uma rica fonte de compostos bioativos com inúmeras propriedades terapêuticas e têm sido exploradas por seu potencial no tratamento de infecções virais. O gênero Bauhinia possui aproximadamente 300 espécies, também conhecidas como 'Pata-de-vaca' ou 'Unha-de-boi', amplamente distribuídas e frequentemente utilizadas na medicina popular para tratar infecções, dores e diabetes. Bauhinia holophylla demonstrou uma promissora atividade anti-Dengue. Diante disso, considerando que o ZIKV e o vírus da Dengue compartilham muitas semelhanças, incluindo vetores, modo de transmissão e sintomas, o presente estudo teve como objetivo investigar a atividade anti-Zika vírus in vitro do extrato e frações das folhas de Bauhinia holophylla. O extrato hidroetanólico bruto das folhas foi obtido por percolação extensiva e partições líquido-líquido foram usadas para produzir as frações hidroetanólica, diclorometano e acetato de etila. Para identificação das amostras, foram realizadas análises fitoquímicas por meio de cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos e espectrometria de massas (HPLC-DAD-MS). Para avaliar a citotoxicidade e atividade antiviral, a concentração de 50% de citotoxicidade (CC50) e 50% de concentração efetiva (CE50) do extrato e frações foram determinadas pelo 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2 , ensaio de brometo de 5-difenil-2H-tetrazólio (MTT) usando células Vero. As concentrações do extrato e frações testadas variaram de 3,12 – 200 µg/mL e o índice de seletividade (SI) foi calculado pela razão de CC50 para EC50. Como resultados, os resultados CC50 de todas as amostras testadas ficaram entre 92,4 a 191,1 µg/mL, mostrando atividade citotóxica moderada de acordo com as diretrizes do NCI. Com EC50 inferior a 15,0 µg/mL e SI de 13,4, o extrato bruto demonstrou a atividade anti-Zika mais forte. Os resultados indicaram que B. holophylla tem uma atividade anti-Zika promissora, que pode ser atribuída principalmente à presença de flavonoides. Até onde sabemos, a atividade biológica do gênero Bauhinia não foi relatada anteriormente contra o ZIKV. Pesquisas futuras são necessárias para avaliar os mecanismos antivirais, bem como estudos in vivo.

Nos últimos anos a preocupação e busca por combustíveis alternativos tem se intensificado de forma global. Neste cenário, estudos voltados a produção de álcool combustível e biodiesel no Brasil e no mundo tem se tornado de fundamental importância impulsionando vários setores a buscar tecnologias que possam contribuir para o desenvolvimento socioeconômico e ambiental. Neste contexto o presente trabalho teve por objetivo integrar as duas principais matrizes energéticas brasileira, a partir da caracterização dos coprodutos oriundos da cadeia do biodiesel para avaliação do potencial para produção de etanol, e ainda a produção deste combustível a partir das mais promissoras. 

Objetivou-se com esse trabalho analisar diferentes tratamento no cultivo in vitro de Cannabis sativa L., desde a germinação até a propagação das plântulas. Na etapa da germinação das sementes, realizou-se um ensaio de desinfestação com as sementes. Após esse processo, as sementes foram inoculadas em diferentes meios de cultivo, com e sem a influência da luz para a análise de germinação, além da aplicação de testes de escarificação na quebra de dormência. Concluiu-se que o uso de fungicida não influencia no processo de desinfestação, sendo eficaz apenas o uso de hipoclorito de sódio e etanol 70%. A escarificação física é eficiente na superação da dormência, reduzindo o tempo de germinação. Em 36 horas já foram observadas sementes germinadas, comparadas ao grupo controle. Além disso, constatou-se a perda da viabilidade das sementes em longos períodos de armazenagem em temperatura ambiente. Na segunda etapa do trabalho, realizou-se testes para a propagação das plântulas. Segmentos nodais de plântulas in vitro foram inoculados em meio de cultivo MS, com diferentes concentrações de auxinas, AIA, AIB e ANA (0,5, 1,0 e 2,0 mg/L) e também, em meios de cultivo MS com variações de pH, visando verificar a capacidade de multiplicação do explante. Os melhores resultados no desenvolvimento das plântulas foram obtidos utilizando-se o meio MS com AIB, especialmente na menor concentração (0,5 mg/L). Já o pH 5.8 favoreceu o crescimento das plantas in vitro e com melhor desenvolvimento das raízes.

Smilax brasiliensis Sprengel é uma monocotiledônea, nativa do Cerrado e popularmente conhecida como japecanga ou salsaparrilha. Na medicina popular é utilizada no tratamento de infecções sexuais transmissíveis, condições cutâneas, doenças inflamatórias e como diurético, diaforético e agente depurativo. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as atividades antioxidante, alelopática e larvicida do extrato etanólico e das frações obtidos dos caules de Smilax brasiliensis. Os caules foram seccionados, secados em estufa e triturados em moinho de facas. O extrato etanólico (EE) foi obtido por percolação com etanol e secado em rotaevaporador. Parte do extrato seco foi solubilizado em etanol/água e particionado com hexano, diclorometano e acetato de etila, para a obtenção das frações hexânica (HEX), diclorometânica (DCM), acetoetílica (AC) e fração residual hidroetanólica (H). A análise por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas permitiu caracterizar os compostos majoritários hentriacontanona, nonacosano, palmitato de etila, octadecenoato de metila, linoleato de etila, hentriacontano, estearato de etila e beta-estigmasterol presentes na fração HEX. Pela cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas foram anotados flavonoides glicolisados e não glicolisados, especialmente com quercetina, e outros compostos como a dioscina para o extrato e frações DCM, AC e H, sendo o composto predominante em todas as amostras, a rutina. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante pelo ensaio. As amostras apresentaram efeito inibitório na germinação e desenvolvimento, especialmente sobre as sementes de cebola. Pela análise do índice mitótico observou diminuição proliferativa nas células de Allium cepa, no entanto não houve efeito citotóxico e genotóxico nos tratamentos com as amostras. Todas as amostras de S. brasiliensis exibiram efeito antigenotóxico para as sementes previamente tratadas com glifosato e atrazina. O efeito larvicida foi observado com o aumento da mortalidade das larvas de Culex quinquefasciatus promovida pelas frações HEX e H, durante o decorrer do experimento. Quanto a toxicidade sobre de Artemia salina, as frações HEX, DCM e AC promoveram a mortalidade dos náuplios. A avaliação do extrato e das frações dos caules de S. brasiliensis, em relação às atividades antioxidante, alelopática e larvicida testados nesse estudo, assim como a composição química, foram descritos pela primeira vez.

Paralelamente ao vasto uso empírico de plantas medicinais por diferentes culturas, sua diversidade bioquímica e metabólica sempre despertou interesse na comunidade científica quanto à possibilidade de diferentes ações biológicas em prol da saúde humana e animal. A esse respeito, destacam-se pesquisas envolvendo prospecção de antimicrobianos, como antibacterianos, antivirais e antifúngicos. O presente estudo avaliou o potencial antibacteriano dos extratos e compostos derivados de Tontelea micrantha frente a um grupo de bactérias e ao vírus Chikungunya. Bactérias pertencentes aos gêneros Staphylococcus, Bacillus e Klebsiella têm evidenciado resistência aos antibióticos convencionais, e foram utilizadas como alvo na primeira parte do estudo. As concentrações inibitórias mínimas (CIM) e bactericidas mínimas (CBM) foram determinadas, e os extratos clorofórmico e hexânico de raízes de T. micrantha mostraram significativo potencial, com CIM variando de 4,8 a 78 µg/mL e CBM de 312 a 2500 µg/mL. O estudo de mecanismos de ação indicou que a permeabilidade não é o alvo primário da ação. A combinação dos extratos com o aminoglicosídeo estreptomicina foi sinérgica, reduzindo a concentração efetiva necessária e mitigando possível efeito citotóxico. Na abordagem antiviral, o vírus Chikungunya (CHIKV) foi utilizado face a sua relevância atual e à inexistência de antivirais licenciados. Nesse foco, foi avaliado um conjunto de oito extratos quanto a/o (i) citotoxicidade frente às células de mamífero, Vero; (ii) concentração efetiva protetiva para 50% das células infectadas pelo CHIKV (CE₅₀); (iii) inibição na produção de vírus; (iv) inibição do efeito citopático viral (ECP), e (v) efeito na expressão gênica viral. Dentre os extratos avaliados, EAEF (Aceto-etílico) e EMF (Metanólico), derivados de folhas de T. micranta, se mostraram mais promissores, com índices de seletividade (IS) de 12,50 e 8,16, respectivamente. EAEF e EMF também mostraram inibição significativa da multiplicação do CHIKV e do efeito citopático nas concentrações de 125 e 31,25mg/mL, respectivamente. Quanto a possíveis mecanismos de ação, potente atividade virucida foi verificada para EAEF e EMF, ou seja, afetam diretamente a partícula viral, mas também podem agir ao longo do ciclo multiplicativo viral.  Quando adicionados em diferentes horas após a infecção (hpi), EAEF afetou a produção de vírus se adicionado até 12hpi, enquanto EMF foi efetivo se adicionado até 24hpi. EAEF e EMF inibiram drasticamente a expressão do RNA viral. Nas etapas adsorção e penetração do vírus na célula, a ação de EAEF e EMF foi observada ainda que em concentrações mais altas. Nossos resultados indicam que extratos provenientes de diferentes partes da planta T. micrantha apresentam também potenciais diferentes na inibição de bactérias e vírus, tendo se mostrado extremamente promissores para o desenvolvimento de novos agentes antibacterianos e antivirais.

A atividade mineradora se destaca como uma das principais fontes de contaminação da água por metais pesados, especialmente após eventos de rompimento de barragens, como os da barragem de Fundão e Mina Córrego do Feijão, que liberaram rejeitos de minério, contendo metais pesados, às bacias dos rios Doce e Paraopeba, respectivamente. Os metais quando presentes na água como contaminantes podem causar intoxicação humana, bem como contribuir para o desenvolvimento de resistência antimicrobiana, visto que os mecanismos de resistência a metais e antimicrobianos podem ser semelhantes. Neste estudo foi investigado os efeitos tóxicos causados por metais pesados liberados após o rompimento das barragens de Fundão e Mina Córrego do Feijão, acerca dos casos de intoxicação humana e desenvolvimento de resistência antimicrobiana. Inicialmente foi realizado um estudo documental no banco de dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação a fim de traçar o perfil epidemiológico das intoxicações por metais em Minas Gerais e no Brasil, antes e após o rompimento das barragens. Foi observado um aumento de 5,3% / 23,3% dos casos de intoxicação por metais no Brasil e 34,7% / 34,3% em Minas Gerais após o rompimento das barragens de Fundão e Mina Córrego do Feijão, respectivamente. Posteriormente, foi realizada uma revisão integrativa da literatura para analisar estudos que descrevessem a relação entre bactérias recuperadas de locais impactados pelos rejeitos de mineração decorrentes do rompimento das barragens supramencionadas e o desenvolvimento de resistência antimicrobiana. As buscas foram realizadas nas bases de dados PubMed, BVS, Science Direct e Web of Science, sendo seis artigos selecionados e de forma geral, todos sugeriram que a contaminação ambiental por metais pesados, decorrentes dos rejeitos de mineração liberados após os desastres, favoreceu o aparecimento de genes de resistência a antimicrobianos. Adicionalmente foi realizada a quantificação de metais na água do rio Itapecerica, um rio urbano poluído, e bactérias gram-negativas multirresistentes (colistina, gentamicina e ciprofloxacina) foram recuperadas destas amostras e identificadas. Foi constatada a presença dos metais ferro, cobalto, chumbo, alumínio e mercúrio na água, este último em concentrações acima do permitido pela legislação, e 13 morfotipos multirresistentes foram identificados, sendo todos Enterobacteriales (quatro Citrobacter amalonaticus; quatro Pantoea agglomerans; duas Morganella morganii e três Escherichia coli). Se tratando da bactéria E. coli, constantemente presente no ambiente aquático, esta apresentou resistência ainda a outros antimicrobianos, incluindo betalactâmicos. Por fim, foi realizado um estudo de indução de resistência ao meropenem por metais pesados em concentrações encontradas na água da bacia do rio Doce após o rompimento da barragem de Fundão, em E. coli. Um estudo de indução de resistência in vitro por múltiplas passagens (21 dias) foi conduzido utilizando a bactéria Escherichia coli ATCC 25922 multisensível, a qual foi exposta a uma mistura de metais composta por ferro (0,15 mg L^-1), manganês (0,06 mg L^-1) e cádmio (0,0002 mg L^-1). Ao longo dos 21 dias foi observado um aumento na concentração inibitória mínima frente ao meropenem, indicando desenvolvimento e indução de resistência a este antimicrobiano. Os dados deste estudo alertam para efeitos tóxicos causados por metais pesados presentes como contaminantes ambientais após desastres de mineração aos seres humanos (intoxicação) e a microrganismos (resistência antimicrobiana), o que pode levar ao comprometimento da saúde pública.

As infecções fúngicas e bacterianas tratam – se de um problema de saúde pública mundial cada vez maior,  e segundo a OMS, resultando em um enorme gasto econômicostas infecções  representam as principais causas de Infecções Relacionadas a Assistência à Saúde (IRAS). A alária é uma doença negligenciada predominante nos países em desenvolvimento, o que leva a um número agravante na taxa de mortalidade. O tratamento desta doença necessita de antiplasmodiais que são compostos chave para o controle da malária. Atualmente relatos na literatura mostram o surgimento rápido da resistência aos medicamentos já existentes, resistência cruzada e dependência de um número limitado de classes de antiplasmodiais, antifúngicos e antibacterianos. Neste projeto de pesquisa avaliamos a contribuição da síntese orgânica na preparação de compostos bioativos que são importantes no contexto da multidisciplinaridade e na potencialização dos resultados descritos para as moléculas de ocorrência natural. Propomos novos protótipos que apresentam estruturas químicas inovadoras como candidatos à novos antiplasmodiais, assim como a avaliação da atividade antifúngica e antibactericida de dois análogos do alcaloide marinho 3-alquilpiridpinico. Os novos análogos, 6a e 6b, apresentaram atividade antifúngica e foram ativos contra C. albicans, C. glabrata e C. tropicalis com valores de CIM 7,8 μg/mL e mostraram contra C. krusei (CIM 3,9 μg/mL). A atividade antibacteriana frente a Staphylocucus aureus resistente a meticilina, apresentou atividade antiestafilocócica e resultado de CIM com uma faixa de 0,98 - 3,9 μg/mL contra cepas de Staphylococcus. Esses resultados indicam que o composto 6a apresenta atividade antibacteriana e pode ser usado com um protótipo no desenvolvimento de novos antibióticos contra Gram-positivos, especialmente frente cepas de S. aureus resistentes à meticilina (MRSA).

A própolis é uma resina coletada por abelhas da espécie Apis mellifera de diversas espécies da flora. Tem como objetivo proteger a colmeia de ataques bacteriológicos. Destaca-se por suas ações terapêuticas, antimicrobiana, anti-inflamatória, cicatrizante, anticariogênica e anticancerígena. Possui uma vasta composição que inclui ácidos fenólicos, ácido cumárico, flavonóides, terpenos, dentre outros. Muitas possuem propriedades antimicrobianas nas bactérias responsáveis pela doença periodontal, como a gengivite/periodontite, e nos micro-organismos, que constituem o biofilme dental, precursores da doença bucal. É vista como promissora pela periodontia, tanto preventiva como curativa. Portanto, o objetivo deste trabalho é realizar uma revisão bibliográfica acerca do uso da própolis na doença periodontal, além de dar suporte para discutir os resultados e as formas de uso. Por meio das bases de dados LILACS, Embase, CINAHL, Web of Science, Scopus, PubMed e SciELO, serão avaliados os efeitos clínicos da própolis na doença periodontal e discutidos os resultados dos benefícios da terapia da própolis. Pesquisadores da área odontológica reconhecem a necessidade de constantes pesquisas clínicas capazes de avaliar a existência da interação medicamentosa da própolis. Para tanto, estudos com o objetivo de desenvolver, testar e tornar conhecidas novas formulações, concentrações e combinações são interessantes não apenas aos profissionais da Odontologia, mas para saúde em geral.

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O sexto tipo de câncer mais comum é o de cabeça e pescoço (CCP), representando 4% de todos os cânceres em todo o mundo. Cerca de 66,9% dos pacientes com esse tipo tumoral terão uma sobrevida média de 5 anos após o diagnóstico. Os tratamentos atuais, como a quimioterapia, radioterapia e cirurgia têm sido limitadas, uma vez que promovem vários efeitos adversos, resistência aos agentes citotóxicos e com isso, uma provável recidiva do tumor. O canabidiol (CBD) tem sido mostrado como um promissor antitumoral para vários tipos de cânceres, tanto in vitro quanto in vivo. Porém, existem apenas dois estudos na literatura que relatam sobre a ação do CBD em linhagens de Carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço (CCECP) negativas para papilomavírus (HPV-), além disso não foi revelado qual o mecanismo de ação pelo qual o CBD atua neste tipo tumoral.  Diante disso, torna-se necessário mais estudos com o CBD em linhagens de CCECP, a fim de desvendar qual possível mecanismo de morte ele atua e descrever sobre os possíveis mecanismo de morte já descritos na literatura em que o CBD atua no câncer. Assim o objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a ação citotóxica do CBD em linhagens de CCECP, além de fazer uma revisão bibliográfica sobre os possíveis mecanismos de morte de células tumorais causadas pelo CBD descritos na literatura. Assim, a citotoxidade celular do CBD foi avaliada através do método MTT em linhagens de CCECP (HN13 e FaDu) e linhagens normais de fibroblastos (WI38) e queratinócitos (Hacat). Em seguida, foi avaliada a seletividade tumoral do CBD. Foi observado que o CBD foi citotóxico para as células tumorais HN13 e FaDu, com valores de IC50 de 9,7 e 14,3 µM, respectivamente. Entretanto, além de citotóxico, o CBD foi seletivo para as células tumorais, os valores de IC50 para as células normais WI38 e Hacat foram, respectivamente 17,6 e 36,4 µM. Os valores do índice de seletividade (IS) foram de (1,8 e 3,72) para HN13 e (1,15 e 2,37) para FaDu. Dessa forma, os resultados mostraram que o CBD é citotóxico e seletivo para as células tumorais, representando um promissor candidato antitumoral para CCP.

As mudanças globais têm impactado diretamente os ecossistemas aquáticos, e impulsionadas pelas atividades antrópicas podem causar danos irreversíveis na diversidade biológica. Dentre as consequências dessas mudanças globais estão o excesso de nutrientes nos lagos, associado a atividades agropecuárias, principalmente pelo uso de fertilizantes e agrotóxicos nitrogenados, e as mudanças climáticas, como aumento de temperatura, alterações nos regimes de chuva e consequentemente redução da profundidade dos lagos. Com o objetivo de investigar os efeitos dessas mudanças nos peixes foram conduzidos dois estudos: o primeiro foi revisando a literatura para abordar os efeitos dos compostos nitrogenados (nitrito, nitrato e amônia) e como os parâmetros físico-químicos influenciam na sua toxicidade, e o segundo foi um estudo de caso utilizando fígado de Hoplias malabaricus em um lago impacto por acúmulo de compostos nitrogenados. Os efeitos dos compostos nitrogenados podem ser influenciados por parâmetros físico-químicos, podendo ter efeitos sinérgicos, antagônicos ou efeito protetor. Altas salinidades mostraram efeito protetor na toxicidade por amônia e nitrito, hipóxia e baixo pH foram capazes de intensificar os efeitos causados por amônia e nitrato, com efeitos sinérgicos. Já o aumento da temperatura causou efeitos distintos dentre os compostos nitrogenados, com efeitos sinérgicos quando os peixes foram expostos simultaneamente à amônia, e efeitos antagônicos quando expostos ao nitrito e nitrato. A dureza também influenciou na toxicidade, e seus efeitos são dependentes da espécie em estudo. No segundo estudo, as secas prolongadas tem impactado diretamente a fauna aquática. Os exemplares de Hoplias malabaricus apresentaram alterações histológicas e ocorrência de apoptose que estão associadas ao processo de detoxificação no fígado devido ao acúmulo de compostos nitrogenados na lagoa Carioca. O aumento em número e área de centros melanomacrofágicos podem estar associadas a exposição dos peixes aos poluentes, como amônia e nitrito. Os biomarcadores histológicos, histoquímicos, e imunohistoquímicos se mostraram bioindicadores de impacto ambiental. 

Handroanthus impetiginosus (Mart. ex Dc.) Mattos (Bignoniaceae), conhecida popularmente como ipê roxo é uma espécie de floresta estacional que pode ser encontrada em alguns biomas brasileiros. Possui grande importância econômica, devido sua utilização em construções civis e navais, importância ecológica, na recuperação de ecossistemas florestais, e também importância medicinal, por seus compostos bioativos. Os objetivos desse trabalho foram obter ácidos graxos e ésteres metílicos de ácidos graxos a partir do extrato hexânico de sementes de H. impetiginosus e avaliar as atividades antioxidante e larvicida frente a Artemia salina e Culex quinquefasciatus do extrato hexânico (EH), dos ácidos graxos (AG) e dos ésteres metílicos de ácidos graxos (EMAG). O EH foi obtido por extração em aparelho de Sohxlet e triagem fitoquímica foi realizada. Os AG foram obtidos por hidrólise dos triglicerídeos presentes no extrato hexânico, por uma base forte, por 30 e 60 minutos e os EMAG foram produzidos por meio da reação de transesterificação dos ácidos graxos por catálise ácida. A composição dos ácidos graxos e dos ésteres metílicos de ácidos graxos foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas. A atividade antioxidante foi determinada pelo método de radicais 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e a atividade larvicida foi testada frente a Artemia salina e Culex quinquefasciatus. Os resultados demonstraram que o EH apresentou um rendimento de 20,47%, com a presença de alcaloides, de acordo com a triagem fitoquímica. Foram obtidos os ácidos graxos por meio de hidrólise por 30 (AG30) e 60 minutos (AG60) dos triglicerídeos presentes e ésteres metílicos de ácidos graxos (EMAG 30 e EMAG60), sendo que para os AG verificou-se um maior rendimento de AG30 (44,95%), enquanto que para os EMAG, maior rendimento foi verificado para EMAG60 (35,96%). No extrato hexânico foram identificados três AG (ácidos palmítico, linoleico e oleico), sendo ´ácido oleico o constituinte majoritário (10,08%) e cinco ésteres etílicos de ácidos graxos, sendo quatro deles majoritários, com predominância do oleato de etila (34,93%). A mistura de EMAG30 apresentou-se constituída por dez ésteres metílicos e EMAG60 apresentou uma mistura de oito ésteres metílicos, sendo os compostos majoritários em ambas as amostras representados pelo palmitato de metila, linoleato de metila, oleato de metila e esterato de metila, com predominância de oleato de metila (28,70% e 30,44%, respectivamente). As amostras de EH, AG30, AG60, EMAG30 e EMAG60 apresentaram atividade antioxidante inferior a 50%, em comparação com o padrão BHT, o qual apresentou inibição superior a 90% nas concentrações de 250 e 500 µg/mL e de 86% na concentração de 100 µg/mL (P < 0,0001). Nas concentrações de 1 a 10 µg/mL houve uma ligeira redução na atividade antioxidante das amostras, entretanto, estas atividades foram superiores àquela observada para o padrão BHT. As amostras AG30, AG60, EMAG30 e EMAG60 apresentaram toxicidade significativa frente a A. salina na concentração de 1000 µg/mL (P < 0,0001). AG60 foi a amostra que apresentou maior efeito tóxico frente a A. salina, promovendo 100% de mortalidade, em todas as concentrações testadas (125 a 1000 µg/mL) (P < 0,0001). Todas as amostras testadas provocaram uma elevada mortalidade de larvas C. quinquefasciatus, independente da concentração empregada (P < 0,0001).  Os dados encontrados até o momento encorajam a realização de novos testes para a confirmação dos resultados encontrados e também para a detecção de outras atividades biológicas.

O soro resultante da produção de ricota é um co-produto da indústria láctea que possui alto potencial poluidor, pois a carga de matéria orgânica é muito alta e há excesso de nutrientes como lactose, potássio, gorduras e proteínas, e uma alta demanda química de oxigênio (DQO). A biorremediação vem sendo amplamente indicada para o tratamento de resíduos de origem láctea e essa tecnologia faz uso de microrganismos ou de suas enzimas para converter o ambiente poluído em sua condição original (resumo limitado devido à necessidade de sigilo para proteção da propriedade intelectual).

A iturina A, um biossurfactante lipopeptídico, possui propriedades físico-químicas eficientes para cosméticos naturais por ser ecologicamente correta, ter alta compatibilidade com a pele, ter baixa concentração micelar crítica (CMC), alta formação de espuma e atividade emulsificante. Entretanto, de modo geral, a produção em larga escala de biossurfactantes continua limitada devido seu baixo rendimento, elevado custo do meio de cultivo e purificação. O objetivo deste trabalho foi validar a otimização da produção do biossurfactante lipopeptídico e caracterizá-lo para fins comerciais com foco no desenvolvimento de novos produtos cosméticos. O meio de cultivo previamente otimizado pelo grupo de pesquisa apresentou como teor de nitrogênio 0,019 µg.µL^-1, oriundo do teor proteico presente no extrato de farinha de soja. A curva de crescimento do Bacillus subtilis (ATCC 19659) foi relacionada com a produção do lipopeptídeo devido a diminuição da tensão superficial até o final da fase exponencial (55 horas de cultivo), acima de 1x10¹⁰ UFC.mL^-1. Foram validados os constituintes do meio de cultivo e suas concentrações pelo delineamento do composto central rotacional (DCCR) em relação à tensão superficial (TS) relacionada ao lipopeptídeo gerado, sendo, em g.L^-1, 20 de açúcar, 1 de L-arginina e 50 de farinha de soja (extrato). O lipopeptídeo foi purificado utilizando um modelo de utilidade por fracionamento de espuma (em processo de patente). Fontes alternativas de nitrogênio derivadas da soja como farelo, farinha e proteína foram avaliadas em relação ao rendimento do lipopeptídeo produzido, em massa seca, sendo, respectivamente, em g.L^-1, 0,28; 1,43 e 0,34. O lipopeptídeo foi caracterizado molecularmente como sendo a iturina A. A iturina A foi considerada pouco solúvel em água deionizada; insolúvel em etanol, óleo de canola, óleo de milho e propilenoglicol; muito pouco solúvel em glicerol e óleo mineral. No teste de colapso da gota, a iturina A (1 mg.mL^-1) apresentou atividade tensoativa, em média, 22% a mais de dilatação em relação ao controle (água deionizada). A concentração micelar crítica (CMC) da iturina A foi de 0,176 mg.mL^-1, capaz de reduzir a TS da água deionizada  de 73,1 ± 0,1 mN.m^-1 (controle) para 34,5 ± 0,05 mN.m^-1, a 25 ºC e a 1 mg.mL^-1 para 33 ± 0,3 mN.m^-1. A iturina A apresentou pI em pH 3. A iturina A apresentou o terceiro melhor desempenho tensoativo (35,6 ± 0,94 mN.m^-1) em relação às TS de alguns tensoativos comerciais e permaneceu relativamente estável em uma ampla faixa de pH (2 a 11); temperatura (-20 ºC a 100 ºC); concentração salina (2,5 a 20 %); após autoclavagem e secagem em estufa (50 ºC). Em comparação com alguns emulsificantes comerciais, a iturina A apresentou o melhor índice de emulsificação (IE₂₄) em óleo de cadeia longa (85%) e foi a mais estável em emulsões com diferentes óleos cosméticos, ao longo das 72h avaliadas. A iturina A apresentou a melhor estabilidade de espuma em comparação com agentes tensoativos comerciais; foi atóxica ambientalmente em todas as concentrações avaliadas; apresentou um EHL de 6, sendo capaz de estabilizar formulações cosméticas. No aumento de escala da produção, o rendimento de iturina A proveniente do cultivo em Erlenmeys de 2 L passou de 3,8 ± 0,3 g.L^-1 semi-purificada (centrifugação e precipitação ácida), tendo uma TS de 37 ± 0,2  mN.m^-1, para 16 ± 0,5 g.L^-1 em biorreator contendo 3 L úteis de meio de cutivo, tendo uma TS de 37 ± 0,2  mN.m^-1. Após a purificação por fracionamento de espuma e liofilização, o rendimento de iturina A purificada foi de 8 ± 0,4 g.L^-1 tendo uma TS de 31,8 ± 0,1  mN.m^-1. Assim, concluímos a efetividade da otimização do bioprocesso de produção da iturina A, com grande potencial de sua aplicação na indústria de cosméticos.

Tumores malignos do cérebro são uma ocorrência rara, representando aproximadamente 2% de todos os cânceres em adultos. Apesar da baixa frequência, estes tumores apresentam elevada taxa de mortalidade. As neoplasias primárias mais comuns do Sistema Nervoso Central (SNC) são as de origem glial, dessas, o glioblastoma (GBM) é o mais prevalente, sendo também o de maior agressividade. Suas características histopatológicas o apresentam como um processo neoplásico grau IV, derivado dos astrócitos, com altos índices de proliferação microvascular, necrose tumoral, invasão tecidual, porém com restrita capacidade de promover metástases fora do SNC. A taxa de mortalidade permanece significativa, apesar dos grandes avanços em biologia molecular, imunologia e quimioterapia. Produtos derivados de plantas têm oferecido, historicamente, compostos para o desenvolvimento de novos e efetivos agentes quimioterápicos. Diante desse imensurável desafio, este trabalho teve como objetivo avaliar o potencial terapêutico da combinação entre o composto Matteucinol (Matt), derivado da espécie Miconia chamissois Naudin, associado ao quimioterápico padrão ouro para o tratamento do GBM, o temozolamida (TMZ). Demonstrou-se que a combinação Matteucinol/temozolamida (Mat-TMZ) apresentou seletividade, com ação citotóxica para a linhagem celular de GBM U251, poupando as células de astrócitos NHA. Assim como observado por Zimograma, Mat-TMZ diminuiu a atividade da metaloproteinase 2. Associado a isso, verificamos que o tratamento não atuou sobre a adesão das células U251 à matriz. Estudo específico com laranja de acridina e iodeto de propídio sugeriu que um dos mecanismos de morte implicado no tratamento das células U251 com a combinação (Mat-TMZ) é a apoptose, uma vez que se observou a formação de microbolhas, indicando fragmentações nucleares. Além disso, a avalição antitumoral e anti-angiogênica, in vivo, pelo ensaio da membrana coriolantóide de galinha (CAM) foi realizada e indica que o composto apresenta-se como uma possível opção de tratamento para o GBM

A tripanossomíase bovina é uma doença causada por protozoários Trypanosoma spp., dentre eles, a espécie Trypanosoma vivax (T. vivax). Essa doença possui relevância econômica no setor pecuário devido ao seu impacto negativo na bovino cultura. Diante das dificuldades encontradas para um diagnóstico correto e precoce, o imunodiagnóstico apresenta-se como vantagem frente aos demais métodos devido à confiabilidade, facilidade de automação e implementação em campo. Dessa forma, o objetivo desse trabalho é a busca de novos alvos antigênicos do T. vivax, utilizando ferramentas de bioinformática para serem empregados em testes de imunodiagnósticos para a tripanossomíase bovina. Para isso, foi feito um levantamento das principais proteínas antigênicas do T. vivax em artigos e patentes. Em seguida, foi realizada a análise in sílico das proteínas, utilizando programas de bioinformática para selecionar epítopos com potencial antigênico. Posteriormente, foi feita a construção racional de uma proteína (rTV1) e um peptídeo sintético (TV1P). Através de uma parceria com a FIOCRUZ- MG, duas proteínas também candidatas ao diagnóstico da doença (M1 e M2) foram selecionadas para serem produzidas através de expressão heteróloga, para posteriormente serem utilizadas em ensaios biológicos. As proteínas TV1, M1 e M2 foram utilizadas na expressão heteróloga utilizando células de Escherichia coli BL21 (λDE3) pLysS e pLysE utilizando diferentes protocolos de expressão. Dentre os protocolos utilizados a expressão foi bem-sucedida apenas com a proteína rTV1, que foi purificada e utilizada em um imunoensaio preliminar do tipo ELISA para verificar sua reatividade frente a soros infectados por T. vivax. O ensaio sugere que a rTV1 possui capacidade de discriminar entre animais saudáveis e infectados. O peptídeo TV1P foi sintetizado por síntese química e foi utilizado em ensaios de ELISA para avaliar sua reatividade frente a soros infectados por T. vivax. O peptídeo sintético não apresentou capacidade de imunodeteção, mesmo sendo avaliado em diversas condições. Esses dados preliminares mostram a viabilidade de aprofundar as pesquisas sobre a proteína rTV1, visto que a mesma apresenta potencial para ser empregada em Kits de diagnóstico. Para o peptídeo TV1P são necessários maiores estudos objetivando avaliar o potencial do mesmo para diagnóstico do T. vivax.

O uso indiscriminado de agrotóxicos é uma preocupação mundial devido à contaminação do meio ambiente e a possibilidade de causar efeitos deletérios em organismos não-alvo, como os peixes. Para analisar os efeitos da abamectina, da família das avermectinas, peixes-zebra adultos (Danio rerio) foram expostos a uma fórmula comercial comumente usada no Brasil. Os animais foram submetidos a uma exposição aguda (96 h) e crônica de curta duração (15 dias) a distintas concentrações de abamectina. Determinou-se a CL50 e realizou-se estudo histológico seguido de análise imunohistoquímica para identificação da P-gp e HSP70 em fígados de animais submetidos ao tratamento agudo e crônico, respectivamente. Além disso, os padrões de comportamento foram observados diariamente em ambas as tentativas. Foi determinado um valor de LC50 de 105,68 μg/L. A análise histológica revelou alteração morfológica dos hepatócitos, acúmulo de glicogênio, degeneração e desorganização do citoplasma, além de núcleos picnóticos, irregulares e localizados lateralmente. A imunohistoquímica para HSP70 e P-gp mostrou forte coloração nos hepatócitos dos grupos controle e diminuição progressiva com o aumento da concentração de abamectina. Foram observadas alterações na postura corporal, movimentação no aquário, atividade opercular, coloração corporal e busca por alimento nos grupos tratados com abamectina. Os resultados apresentados sugerem que a abamectina pode afetar o padrão comportamental dos animais, promover alterações morfológicas e diminuir a expressão de HSP70 e P-gp no fígado do peixe-zebra.

O fitato ou ácido fítico (Inositol hexafosfato: C6H18O24P6 – IP6) está presente nas plantas, especialmente em cereais como soja, milho, trigo, aveia e leguminosas. Atualmente, o fitato é considerado um fator antinutricional por se ligar a metais e minerais, como ferro, zinco, cobre e principalmente o fósforo, reduzindo sua absorção durante a digestão em animais monogástricos ou mesmo em humanos. As fitases são enzimas capazes de degradar o ácido fítico e possuem um amplo espectro de aplicação em indústrias, como na suplementação de ração animal com intuito de se melhorar a digestibilidade através da liberação de nutrientes como o fósforo, presente na forma de fitato. Este trabalho diz respeito à construção de uma linhagem da levedura Komagataella phaffii (Pichia pastoris) como sistema de expressão para produção da enzima fitase. Para tanto, um screening de fitases com características biotecnológicas relevantes visando um desenho racional da proposta foi realizado. Fitases de fungos filamentosos se mostram atualmente promissoras, por possuírem propriedades bioquímicas desejáveis para aplicação na indústria animal, como termoestabilidade e estabilidade em diferentes perfis de pH. Diante disso, a fitase de Aspergillus nidulans foi escolhida para produção e a linhagem K. phaffii GS115 foi usada como sistema para expressão. Foram realizadas análises bioinformáticas (análises in silico) da sequência gênica para otimização das sequências obtidas no GenBank. O plasmídeo pPICZα-B contendo a ORF da fitase foi sintetizado e clonado in vitro com códons otimizados para expressão em K. paffi. A partir disso o plasmídeo foi amplificado em cepas de Escherichia coli, posteriormente extraído por preparação em média escala e detectado através de PCR. O vetor foi linearizado com a enzima de restrição Sac I e clonado em K. phaffii GS115. A expressão foi realizada com 0,5% de metanol em diferentes tempos de indução, de modo que as bandas proteicas foram analisadas através de gel de poliacrilamida SDS-PAGE. Os fenótipos dos clones obtidos foram determinados quanto ao metabolismo de metanol. Além disso, foi possível selecionar o clone com maior atividade enzimática frente à hidrólise do fitato de sódio. Também foram realizados estudos de dinâmica molecular e metadinâmica para verificação da estabilidade enzimática em diferentes faixas de potencial hidrogeniônico (pH), em relação à presença e ausência de glicosilação proteica

O câncer de mama se destaca por representar o tipo tumoral mais prevalente em todo o mundo. A metástase consiste na principal causa de morte de pacientes portadores deste tipo tumoral. Considerando os diversos efeitos colaterais causados pelos tratamentos atuais e a resistência aos agentes citotóxicos, torna-se necessário a busca por novas fontes de terapias antitumorais e antimetastáticas. Diante dos inúmeros estudos envolvendo a síntese de compostos derivados das naftoquinonas lapachol e lausona, com base em suas ações antitumorais comprovadas, este trabalho teve por objetivo a investigação do potencial antineoplásico de novos sintéticos derivados destas naftoquinonas sobre a linhagem de câncer de mama murino 4T1. Assim, a viabilidade celular foi avaliada no ensaio de MTT e, a partir desta triagem, os compostos APO-3, APO-4, APO-6 e APO-7 foram selecionados para os testes subsequentes. Também foram realizados os ensaios de migração por fechamento de ferida e zimograma utilizando sobrenadante celular onde APO-3, APO-4 inibiram a migração celular, e APO-4, APO-6 diminuíram a atividade de MMP-9 secretadas pelas células 4T1. Ademais, foi avaliada a ação destes compostos sobre esplenócitos murinos normais, onde todos se mostraram seletivos para células tumorais. Após, foi realizada a combinação do composto que se mostrou mais promissor (APO-3) com o quimioterápico paclitaxel (PTX). A combinação APO-3/PTX demonstrou maior ação citotóxica seletiva sobre as células 4T1 que PTX isoladamente; além disso, APO-3/PTX inibiu a migração celular e diminuiu a atividade das MMP-9 ativas no sobrenadante destas células, atuando de maneira semelhante a PTX quando avaliado isoladamente. Além destes testes, também foi avaliado o potencial tumorigênico de APO-3, APO3/PTX e PTX, através do ensaio clonogênico, onde APO-3/PTX apresentou uma redução do número de colônias formadas pelas células 4T1 mais efetiva que APO-3 e PTX, isoladamente. Também foi avaliada a ação dos compostos sobre a morte celular através do ensaio de morfologia por fluorescência e Western Blotting, onde o tratamento com APO-3 induziu o aumento da expressão de PARP total, Caspase-9 total e RIP1 e diminuiu a expressão de Caspase-3 clivada, além de provocar, nas células 4T1, alterações morfológicas características de apoptose e necroptose; já APO-3/PTX diminuiu a expressão de PARP total, Caspase-9 total e RIP1 e aumentou a expressão de Caspase-8 total e Caspase-3 clivada, e ainda induziu alterações morfológicas celulares características de apoptose, atuando de forma semelhante à PTX isoladamente. Dessa forma, os resultados sugerem que os compostos derivados de naftoquinonas, isoladamente ou em combinação, podem representar novos agentes terapêuticos com potencial atividade antitumoral e antimetastática.

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As infecções hospitalares podem ocorrer devido a inserção de dispositivos médicos como os cateteres urinários, que permitem a migração de microrganismos do meio externo para o organismo do paciente, assim como pela presença dos microrganismos em superfícies inanimadas nos hospitais, como paredes, armários, corrimãos, maçanetas e torneiras. Essas duas vias de infecção hospitalar possuem como características em comum superfícies que favorecem a adesão e proliferação de células e formação de biofilme. Sendo assim, novas tecnologias estão sendo desenvolvidas com o objetivo de modificar superfícies para que a adesão ou sobrevivência dos microrganismos seja impedida ou dificultada. Dentre as moléculas com propriedade anti-adesiva de biofilmes, capazes de revestir superfícies, destaca-se o DMPEI. O DMPEI é um polímero sintético que reveste superfícies sem se ligar covalentemente a ela, com alta capacidade anti-adesiva de biofilme. No presente trabalho, superfícies de cateter de látex foram revestidas com DMPEI e foram avaliadas o efeito anti-adesivo de biofilme contra Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Candida albicans. O cateter revestido com DMPEI apresentou anti-adesão de biofilme de 82%, 88% e 92% para E. coli, S. aureus e C. albicans, respectivamente. A molhabilidade do cateter revestido e não revestido também foi avaliada. O ângulo de contato diminuiu de 50,48º para 46,93º nas superfícies dos cateteres de látex tratadas com o polímero DMPEI, tornando-as mais hidrofílicas. Foram desenvolvidas duas amostras de tinta (A e B) para revestimento de parede e uma de verniz (C) para revestimento de armário, maçaneta, torneira e corrimão, todas contendo DMPEI. O efeito anti-adesivo de diferentes concentrações de DMPEI nas formulações de tintas e do verniz foi avaliado frente a bactéria S. aureus. A amostra de tinta A apresentou 88%, 90% e 91% de anti-adesão de biofilme nas concentrações de 0,2; 2 e 20 mg mL-1 , respectivamente. A amostra B apresentou 89%, 90% e 91% de anti-adesão de biofilme nas concentrações de 0,2; 2 e 20 mg.mL-1 , respectivamente. A amostra C apresentou 88%, 90% e 90% de anti-adesão de biofilme nas concentrações de 0,2; 2 e 20 mg mL-1 , respectivamente. A propriedade anti-adesiva de biofilme das amostras A, B e C foi avaliada por até 32 semanas. Durante esse tempo, a amostra A não apresentou diminuição da atividade anti-adesiva de biofilme, enquanto as amostras B e C apresentaram redução de 91% para 10% e 91% para 26%, respectivamente. O polímero DMPEI apresenta potencial para revestimento de dispositivos médicos e superfícies inanimadas com expressiva anti-adesão de biofilme.

ESTUDOS DE PROVA DE CONCEITO POR ELISA DA PROTEÍNA rMELEISH2 EM CONDIÇÕES EMPRESARIAIS PARA O DIAGNÓSTICO DE LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA E MAXIMIZAÇÃO DO SEU PROCESSO DE PRODUÇÃO VISANDO LICENCIAMENTO DE TECNOLOGIA

Os glioblastomas (GBM) são tumores do sistema nervoso central, muito vascularizados e que apresentam etiologia desconhecida. A sobrevida média dos pacientes acometidos é de apenas 15 meses, mesmo com os tratamentos atuais, fazendo com que a busca de quimioterápicos eficazes seja de extrema importância. Entre os anos 1940-2010, cerca de 75% dos antineoplásicos descobertos foram originados do Reino Plantae. Neste
trabalho, uma espécie endêmica do Cerrado brasileiro, Tapirira guianensis, e um canabinoide sintético (WIN 55,212-5), que possui afinidade pelos receptores do sistema endocanabinoide, foram avaliados em duas linhagens de glioblastoma humano, GAMG e U251 e em uma linhagem não tumoral, NHA. Após uma triagem inicial e cálculo do índice de seletividade tumoral (IST) do extrato bruto (EB) e das partições hidroalcóolica
(PH), hexânica (PH), clorofórmica (PC) e acetoetílica (PC) da espécie vegetal, foram realizados os ensaios funcionais in vitro e ensaios in vivo. Todos os extratos inibiram a migração celular, contudo, com exceção do PC, todos foram capazes de inibir o crescimento de colônias das células tumorais. O EB, PH e PA causaram a formação de bolhas e alterações nucleares, além de encolhimento celular e condensação da cromatina, apenas na linhagem U251. No ensaio in vivo da membrana corioalantóide de galinha (CAM), o tratamento com as PH, PC e PA, ricas nos compostos secundários cumarinas, esteroides e flavonoides, causaram redução do tumor. Estas partições também foram avaliadas no teste de irritação da membrana corioalantóide do ovo de galinha (HET- CAM) e não provocaram alterações nos vasos sanguíneos. Estas partições foram fracionadas e avaliadas quanto a citotoxicidade e ao IST, e duas frações (01ID-F2 e 01ID-F4) da PA foram as que apresentaram menor IC50 e maior IST. Direcionadas para os ensaios in vivo, apenas a fração 01ID-F4 inibiu o crescimento tumoral e não provocou nenhuma alteração nos vasos sanguíneos, porém nenhuma delas inibiu a angiogênese. Esses extratos também atuaram induzindo a morte celular por apoptose pela via extrínseca. Tais achados nos permitem concluir que que os extratos da espécie Tapirira guianensis apresentam potencial antitumoral para os glioblastomas, sendo as PH, PC e PA ativas tanto in vitro quanto in vivo. Por sua vez, o composto WIN foi seletivamente citotóxico para as células GBM e inibiu significativamente a migração celular e a capacidade clonogênica das linhagens GAMG e U251. O tratamento causou características indicativas de morte celular por apoptose, como bolhas e alterações nucleares, além de encolhimento celular e condensação da cromatina. Além disso, ele inibiu a atividade das metaloproteínases 2 e 9 que pode estar relacionada à inibição da invasão celular encontrada após o tratamento. Além disso, os dados também mostraram que os efeitos antitumorais do WIN são exercidos pelas expressões de p53 e catepsina D aumentadas, além da expressão diminuída de HSP70. Esses dados podem indicar um mecanismo de morte celular por apoptose independente de caspases. Finalmente, o tratamento com o WIN diminuiu o perímetro tumoral (in vivo) e os vasos sanguíneos nessa área, sem causar lise, hemorragia ou coagulação sanguínea. Estes achados reforçam a utilidade dos canabinóides como candidatos a futuras avaliações no tratamento do glioblastoma.

Toxoplasmose ocular é uma apresentação clínica caracterizada pela inflamação da retina/coroide, sendo a principal causa de uveíte posterior infecciosa no mundo. O objetivo desse trabalho consistiu no desenvolvimento de micro implantes intraoculares de poli(D,Lácido láctico-co-ácido glicólico) (PLGA) e espiramicina destinados ao tratamento da toxoplasmose ocular. Foram preparadas soluções dissolvendo entre 8,33% a 25% (p/p) de espiramicina e 75% a 91,67% (p/p) de PLGA 50:50, PLGA 80:20 e PLGA 85:15, em acetonitrila. Após evaporação da acetonitrila, a mistura de pós foi moldada em temperatura entre 40 e 45 ºC. Os micro implantes obtidos foram caracterizados por meio de Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), Termogravimentria (TGA), Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Difração de RaiosX (DRX) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). O método de quantificação por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) da espiramicina presente nos micro implantes e em humor vítreo foi desenvolvido e validado. O estudo de liberação in vitro foi realizado em tampão fosfato de potássio (PBS) pH 7,4 seguindo as condições de esgotamento e avaliada a tolerância ocular por meio do teste em membrana córionalantóide de ovo embrionado de galinha (HET-CAM). O estudo de biocompatibilidade in vitro foi realizado utilizando-se as células do epitélio pigmentar da retina humana (ARPE19), avaliando-se a citotoxicidade pelo ensaio de redução de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5- difenil-2H tetrazolato de bromo (MTT), bem como por meio da interferência do ciclo celular e migração destas células. A eficácia anti-toxoplasma dos implantes também foi conduzido. Obtiveram-se micro implantes cilíndricos com massa entre 2,85 mg e 3,15 mg, comprimento entre 2,78 e 3,22 mm e diâmetro entre 0,85 mm a 0,95 mm. Os espectros FTIR demonstraram preservação das bandas de absorção típicas dos PLGA e da espiramicina após incorporação deste fármaco às matrizes poliméricas. Os termogramas TGA e DSC evidenciaram o desaparecimento do pico característico da espiramicina após o desenvolvimento da formulação, atribuido à dispersão molecular do fármaco dentro da matriz polimérica. A análise dos difratogramas mostraram picos sugestivos de compostos semicristalinos, provavelmente induzidos pelo aquecimento. A análise morfológica dos micro implantes obtidos a partir de PLGA 50:50 mostrou que a superfície era lisa e homogênea. Já as superfícies dos micro implantes obtidos de PLGA 80:20 e 85:15 mostraram-se rugosas e heterogêneas, com presença de poros ou canais. O método analítico desenvolvido foi validado mostrando-se linear, seletivo, preciso, exato e robusto. O fármaco apresentou-se uniformemente distribuído nos micro implantes, com teores que variaram entre 97% e 103% do valor rotulado. Através da análise por MEV foi possível verificar a influência de poros ou canais presentes na matriz polimérica sob a difusão da espiramicina. Os micro implantes promoveram a liberação controlada da espiramicina, sendo que aproximadamente 99% a 103% fármaco foram liberados pelos micro implantes compostos de PLGA 50:50 em 56 dias consecutivos e, PLGA 80:20 ou PLGA 85:15 em 42 dias consecutivos. Os micro implantes foram classificados como não irritantes de acordo com o HET-CAM, sugerindo que esses sistemas serão bem tolerados após inserção na cavidade vítrea do olho. Os micro implantes tiveram baixa toxicidade frente às células ARPE-19 e não promoveram distúrbios no processo de migração destas células ou modulação do ciclo celular e demonstraram serem efetivos contra o Toxoplasma gondii. Atualmente, no mercado farmacêutico não existem micro implantes intraoculares poliméricos contendo fármacos anti-toxiplasmose aprovados e disponíveis, o que destaca esses sistemas como uma alternativa para o tratamento da toxoplasmose ocular. 

Smilax brasiliensis Sprengel é uma espécie nativa do Cerrado, conhecida popularmente como japecanga ou salsaparrilha. Na medicina popular é utilizada como tônico, antirreumático e antissifilítico. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as atividades antioxidante e alelopática, assim como os efeitos citotóxico e genotóxico do extrato etanólico e das frações obtidos dos caules de Smilax brasiliensis. Os caules foram seccionados, secados em estufa e triturados em moinho de facas. O extrato etanólico (EE) foi obtido por percolação com etanol e secado em rotaevaporador. Parte do extrato seco foi solubilizado em etanol/água e particionado com hexano, diclorometano e acetato de etila, para a obtenção das frações hexânica (HEX), diclorometânica (DCM), acetoetílica (AC) e fração residual hidroetanólica (H). O estudo fitoquímico do extrato e das frações revelou a presença de alcaloides, cumarinas, esteroides, triterpenoides, flavonoides, saponinas e taninos condensados. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante, destacando-se as frações acetoetílica e diclorometânica, com valores de concentração efetiva para capturar 50% dos radicais livres (CE₅₀) de 1,71 e 1,91 µg/mL, respectivamente, sendo mais ativas que o padrão 2,6-di-tert-butil-4-metilfenol (BHT, 16,36 µg/mL). Essas frações também apresentaram o maior conteúdo de compostos fenólicos, taninos e flavonoides totais. As amostras apresentaram efeito inibitório no crescimento das sementes, especialmente das sementes de cebola. Na análise citogenética foi observado que houve efeito citotóxico. As frações H (250 µg/mL), HEX (250 e 500 µg/mL) e AC, em todas as concentrações testadas (250, 500 e 1000 µg/mL), apresentaram efeito citotóxico, uma vez que interferiram no processo de divisão celular da cebola. No entanto, não foi possível correlacionar o efeito citotóxico com o efeito genotóxico, uma vez que não foi observada a presença de alterações genotóxicas, considerando então, a espécie S. brasiliensis uma planta atóxica. A análise fitoquímica e biológica do extrato e das frações dos caules de S. brasiliensis, em relação às atividades antioxidante, alelopática e os efeitos citotóxico e genotóxico, testados nesse estudo, foram pela primeira vez descritos.

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DESENVOLVIMENTO E ANÁLISE DE EFICÁCIA DE IMPLANTES OCULARES BIODEGRADÁVEIS À BASE DE QUITOSANA E TARTARATO DE BRIMONIDINA PARA TRATAMENTO DE GLAUCOMA