Dissertações/Teses
2024
Dissertações
1
  • CAÍQUE LOPES DUARTE
  • BUSCA RACIONAL DE UM NOVO COMPOSTO COM AÇÃO ANTIMALÁRICA

  • Orientador : FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • SILMARA NUNES ANDRADE
  • AMANDA LUISA DA FONSECA
  • Data: 29/01/2024

  • Mostrar Resumo
  • A malária é uma doença infecciosa causada pelo parasito do gênero
    Plasmodium. Existem cincos espécies que infectam seres humanos. O
    crescimento aumento no aparecimento de cepas multirresistentes ao atual
    arsenal terapêutico antimalárico coloca em necessidade a busca por novos
    compostos biologicamente ativo para tratamento da doença. O uso de técnicas
    de modelagem molecular tem ganhado destaque nas últimas décadas por
    tornar o processo de desenvolvimentos de fármacos mais rápido de barato.
    Esse trabalho avaliou in sílico duas classes de potenciais compostos
    antimaláricos, as N-acilhidrazonas e os β-carbolinicos. Os resultados foram
    gerados a partir de cálculos de ancoragem molecular contra um banco de alvos

    de Plasmodium facilparum, o BraMMT. Dos setes derivados de N-

    acilhidrazonas avaliados durante testes in vitro, três deles mostraram atividade

    e foram avaliados in sílico para análise do mecanismo de ação. O composto
    AH5 mostrou pouca seletividade aos alvos, enquanto o AH4 mostrou maior
    afinidade para o alvo 3PHC, que está associado a síntese de purinas no
    parasito. A outra parte do trabalho avaliou 20 derivados β-carbolinicos, dos
    quais 10 foram selecionados in sílico para serem sintetizados. Os derivados
    mostraram afinidade pelo alvo 2OK8, que está associado a síntese de
    isoprenóides. Os derivados selecionados para síntese mostraram atividade
    antiplasmodial in vitro e posteriormente in vivo, sendo que nesse último inibiram
    o desenvolvimento de malária cerebral em camundongos. Esses resultados
    mostram que o uso de métodos de modelagem molecular pode auxiliar tanto no
    estudo de mecanismo de ação de novos compostos, quanto na seleção de
    compostos biologicamente ativos.


  • Mostrar Abstract
  • Malaria is an infectious disease caused by parasites of the genus Plasmodium.
    There are five species that infect humans. The increase in the appearance of
    multiresistant strains to the current antimalarial therapeutic arsenal makes it
    necessary to search for new biologically active compounds to treat the disease.
    The use of molecular modeling techniques has gained prominence in recent
    decades for making the drug development process faster and cheaper. This

    work evaluated in silico two classes of potential antimalarial compounds, the N-
    acylhydrazones and the β-carbolines. The results were generated from

    molecular docking calculations against a Plasmodium facilparum target
    database, the BraMMT. Of the seven derivatives of N-acylhydrazones evaluated
    during in vitro tests, three of them showed activity and were evaluated in silico
    for analysis of the mechanism of action. Compound AH5 showed little selectivity
    to targets, while AH4 showed greater affinity for the target 3PHC, which is
    associated with purine synthesis in the parasite. The other part of the work
    evaluated 20 β-carboline derivatives, of which 10 were selected in silico to be
    synthesized. Derivatives showed affinity for the 2OK8 target, which is
    associated with isoprenoid synthesis. The derivatives selected for synthesis
    showed antiplasmodial activity in vitro and later in vivo, and in the latter, they
    inhibited the development of cerebral malaria in mice. These results show that
    the use of molecular modeling methods can help both in the study of the
    mechanism of action of new compounds and in the selection of biologically
    active compounds.

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  • LUCAS ANTÔNIO LISBOA RIBEIRO
  • AVALIAÇÃO DE ÓLEOS MEDICINAIS DE Cannabis sativa L. PRODUZIDOS POR UMA ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DESTINADOS AO TRATAMENTO DE PACIENTES COM INDICAÇÃO MÉDICA

  • Orientador : JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • KAMILLA MONTEIRO DOS SANTOS
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MARNA ELIANA SAKALEM
  • WHOCELY VICTOR DE CASTRO
  • Data: 23/02/2024

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  • O número de associações de Cannabis medicinal tem aumentado no Brasil. Elas atuam fornecendo informações sobre o uso da planta para fins medicinais e apoio jurídico a pacientes e familiares. Muitas, também fazem o cultivo e produção do óleo medicinal. Dentro deste contexto, a participação das instituições de ensino e pesquisa é fundamental não apenas para auxiliar na indicação terapêutica, contraindicações e definição do regime posológico, mas também quanto aos aspectos relacionados à produção e controle de qualidade da droga vegetal e do óleo medicinal. A busca por produtos eficazes e seguros para os pacientes foi o princípio norteador deste projeto. Este estudo visou averiguar, por meio da aplicação de um questionário semiestruturado, os possíveis efeitos benéficos e adversos relacionados ao uso do óleo medicinal da Cannabis sativa em pacientes vinculados a uma associação que possui autorização judicial para cultivo da planta e produção do óleo. Avaliou-se, ainda, de forma qualitativa o perfil dos canabinoides presentes nos óleos medicinais produzidos pela associação utilizando-se a cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE). Ao final do período de entrevista, obteve-se adesão de 86 pacientes dentro dos critérios de inclusão da pesquisa. Os dados obtidos mostraram que os efeitos terapêuticos se sobressaíram, como auxiliando na redução de ansiedade e melhoras nas funções cognitivas, entretanto, efeitos adversos também foram relatados pelos pacientes, entre eles alguns mais comuns, como a sonolência. A análise por CLAE mostrou três perfis de óleos diferentes em teores de canabinoides. De modo geral, o óleo de C. sativa pode ocasionar em cada indivíduo uma reação específica e individual, seja contribuindo na otimização do tratamento de patologias ou gerando efeitos adversos. Diante aos resultados obtidos, verifica-se a necessidade de mais estudos acerca do óleo medicinal, para garantir segurança e eficácia deste tratamento e a devida compreensão destas preparações.


  • Mostrar Abstract
  • The number of medical cannabis associations has increased in Brazil. They provide information on the use of the plant for medicinal purposes and legal support for patients and their families. Many also cultivate and produce medicinal oil. Within this context, the participation of educational and research institutions is fundamental, not only to help with therapeutic indications, contraindications and the definition of the dosage regimen, but also with aspects related to the production and quality control of the plant drug and medicinal oil. The search for effective and safe products for patients was the guiding principle behind this project. The aim of this study was to find out, through the use of a semi-structured questionnaire, the possible beneficial and adverse effects related to the use of Cannabis sativa medicinal oil in patients linked to an association that has judicial authorization to grow the plant and produce the oil. The profile of the cannabinoids present in the medicinal oils produced by the association was also assessed qualitatively using high performance liquid chromatography (HPLC). At the end of the interview period, 86 patients met the inclusion criteria. The data obtained showed that the therapeutic effects stood out, such as helping to reduce anxiety and improve cognitive functions; however, adverse effects were also reported by the patients, including some more common ones, such as drowsiness. The CLAE analysis showed three different oil profiles in terms of cannabinoid content. In general, C. sativa oil can cause a specific and individual reaction in each individual, whether it contributes to optimizing the treatment of pathologies or generates adverse effects. In view of the results obtained, there is a need for more studies on medicinal oil to ensure the safety and efficacy of this treatment and a proper understanding of these preparations.

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  • RODRIGO MICHELINI DE OLIVEIRA THOMASI
  • Prospecção da atividade antiviral de extratos e frações de Bauhinia holophylla (Fabaceae:Cercideae) contra Zika virus

  • Orientador : ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALEX GUTTERRES TARANTO
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • GABRIELA FRANCINE MARTINS LOPES
  • SIMONY CARVALHO MENDONÇA
  • Data: 25/02/2024

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  • O vírus Zika (ZIKV) pertence ao gênero Flavivirus e teve atenção global em 2015-2016. Neste período ocorreu um surto no Brasil, e continua sendo um problema de saúde pública, principalmente para gestantes. Infelizmente, há uma falta de tratamentos específicos ou vacinas disponíveis para a doença do vírus Zika, tornando a prevenção o principal modo de controlar sua propagação. Como potencial solução para este problema, as plantas medicinais são uma rica fonte de compostos bioativos com inúmeras propriedades terapêuticas e têm sido exploradas por seu potencial no tratamento de infecções virais. O gênero Bauhinia possui aproximadamente 300 espécies, também conhecidas como 'Pata-de-vaca' ou 'Unha-de-boi', amplamente distribuídas e frequentemente utilizadas na medicina popular para tratar infecções, dores e diabetes. Bauhinia holophylla demonstrou uma promissora atividade anti-Dengue. Diante disso, considerando que o ZIKV e o vírus da Dengue compartilham muitas semelhanças, incluindo vetores, modo de transmissão e sintomas, o presente estudo teve como objetivo investigar a atividade anti-Zika vírus in vitro do extrato e frações das folhas de Bauhinia holophylla. O extrato hidroetanólico bruto das folhas foi obtido por percolação extensiva e partições líquido-líquido foram usadas para produzir as frações hidroetanólica, diclorometano e acetato de etila. Para identificação das amostras, foram realizadas análises fitoquímicas por meio de cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos e espectrometria de massas (HPLC-DAD-MS). Para avaliar a citotoxicidade e atividade antiviral, a concentração de 50% de citotoxicidade (CC50) e 50% de concentração efetiva (CE50) do extrato e frações foram determinadas pelo 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2 , ensaio de brometo de 5-difenil-2H-tetrazólio (MTT) usando células Vero. As concentrações do extrato e frações testadas variaram de 3,12 – 200 µg/mL e o índice de seletividade (SI) foi calculado pela razão de CC50 para EC50. Como resultados, os resultados CC50 de todas as amostras testadas ficaram entre 92,4 a 191,1 µg/mL, mostrando atividade citotóxica moderada de acordo com as diretrizes do NCI. Com EC50 inferior a 15,0 µg/mL e SI de 13,4, o extrato bruto demonstrou a atividade anti-Zika mais forte. Os resultados indicaram que B. holophylla tem uma atividade anti-Zika promissora, que pode ser atribuída principalmente à presença de flavonoides. Até onde sabemos, a atividade biológica do gênero Bauhinia não foi relatada anteriormente contra o ZIKV. Pesquisas futuras são necessárias para avaliar os mecanismos antivirais, bem como estudos in vivo.


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  • Zika virus (ZIKV) belongs to the Flavivirus genus and had global attention in 2015-2016. In this period an outbreak occurred in Brazil, and remains a public health concern, especially for pregnant women. Unfortunately, there is a lack of specific treatments or vaccines available for Zika virus disease making prevention the primary mode of controlling its spread. As a potential solution to this issue, medicinal plants are a rich source of bioactive compounds with numerous therapeutic properties and have been explored for their potential to treat viral infections. The Bauhinia genus has approximately 300 species, also known as 'Pata-de-vaca' or 'Unha-de-boi', that are widely distributed and often used in folk medicine to treat infections, pain and diabetes. Bauhinia holophylla has demonstrated a promising anti-Dengue activity. In light of this, considering that ZIKV and Dengue virus share many similarities, including vectors, mode of transmission and symptoms, the present study aimed to investigate the anti-Zika virus in vitro activity of the extract and fractions of Bauhinia holophylla leaves. The crude hydroethanolic extract of the leaves was obtained by extensive percolation and liquid-liquid partitions were used to produce the hydroethanolic, dichloromethane and ethyl acetate fractions. To identify the samples, phytochemical analyses were performed using high-performance liquid chromatography with a diode-array detector and mass spectrometry (HPLC-DAD-MS). In order to evaluate the cytotoxicity and antiviral activity, the 50% cytotoxicity concentration (CC50) and 50% effective concentration (EC50) of the extract and fractions were determined by the 3-(4, 5- dimethyl-2-thiazolyl)-2, 5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay using Vero cells. The concentrations of the extract and fractions tested ranged from 3.12 – 200 µg/mL and selectivity index (SI) was calculated by the ratio of CC50 to EC50. As results, the CC50 results of all samples tested were between 92.4 to 191.1 µg/mL, showing moderate cytotoxic activity according to the NCI guidelines. With an EC50 less than 15.0 µg/mL and SI of 13.4, the crude extract demonstrated the strongest anti-Zika activity. The results indicated that B. holophylla has a promising anti-Zika activity, which can be primarily attributed to the presence of flavonoids. To our knowledge, the biological activity of the Bauhinia genus has not been reported previously against ZIKV. Future research is required to evaluate antiviral mechanisms as well as in vivo studies

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  • GABRIEL OLIVEIRA FERNANDES
  • ESTUDO DA FERMENTAÇÃO VISANDO O DESENVOLVIMENTO DE UMA BEBIDA A
    BASE DE ÁGUA E AÇÚCAR DE CANA, HARD SELTZER, APLICADA À INDÚSTRIA

     
     
     
     
  • Orientador : DANIEL BONOTO GONCALVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • MARCIA REGINA DA SILVA PEDRINI
  • DANIEL BONOTO GONCALVES
  • DIOGO HENRIQUE HENDGES
  • Data: 29/02/2024

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  • A crescente demanda por bebidas de baixo teor calórico em todo o mundo tem impulsionado o interesse nas hard seltzers, que são bebidas com baixo teor de carboidratos e um teor alcoólico entre 4-5% (v/v). Essas bebidas são obtidas a partir da fermentação de uma mistura de água e açúcar, mas a solução inicial não fornece os nutrientes adequados para a levedura concluir o processo de fermentação. Portanto, o principal desafio para a produção de hard seltzers é encontrar a combinação ideal de leveduras e nutrientes. Este estudo foi desenvolvido para investigar a fermentação de hard seltzers usando diferentes leveduras e nutrientes, com foco na aplicação industrial.

     
     
     

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Teses
1
  • ANDERSON KELVIN SARAIVA MACÊDO
  • AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE COMBINADA DE METAIS PESADOS EM PEIXES ASSOCIADO AO IMPACTO AMBIENTAL CAUSADO POR ATIVIDADES MINERADORAS

  • Orientador : RALPH GRUPPI THOME
  • MEMBROS DA BANCA :
  • RALPH GRUPPI THOME
  • ELISANGELA MARTINS DOS SANTOS
  • DIEGO GUIMARÃES FLORENCIO PUJONI
  • ANDRÉ ALBERTO WEBER
  • ENELISE MARCELLE AMADO
  • Data: 23/01/2024

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  • As atividades mineradoras estão entre as principais fontes de contaminação ambiental por
    metais pesados. No Brasil, os impactos causados pela mineração na bacia do Rio Doce
    ganharam um grande alcance midiático após o rompimento de uma barragem de rejeito
    de minério. Nesse ambiente, foram observadas uma mistura de metais pesados, que
    podem causar alterações importantes em organismos aquáticos como os peixes. Diante
    disso, o objetivo do presente estudo foi identificar e descrever os impactos
    socioambientais promovidos pelas atividades mineradoras na bacia do Rio Doce, assim
    como, investigar o efeito da mistura de metais pesados por meio de mudanças
    comportamentais e no desenvolvimento embrionário de peixes. Para isso, foram
    conduzidos dois estudos, no primeiro (Capítulo 1) foi discutido de forma cronológica o
    que se sabe sobre os impactos ambientais e sociais causados pelas atividades mineradoras
    na bacia do Rio Doce. Nesse estudo, foram identificados impactos da mineração em
    diferentes níveis do ecossistema: desde fatores abióticos e impactos moleculares até
    impactos comunitários. Enquanto que no segundo estudo (Capítulo 2) foram utilizados
    marcadores embrionários e comportamentais do peixe-zebra (Danio rerio) para avaliar
    os impactos causados pela mistura de metais. Nesse estudo foi observado que a mistura
    de metais afeta os marcadores embrionários durante o desenvolvimento inicial
    (somitogênese, eclosão e batimento cardíaco), mas não nos marcadores de
    desenvolvimento tardios (comprimento, comportamento locomotor e tigmotaxia). Outro
    achado importante é que nos marcadores tardios os metais têm efeito antagônico na
    mistura de metais, reduzindo os efeitos relacionados à exposição individual dos metais.
    Esses resultados mostram que a mistura de metais pesados provenientes da mineração na
    bacia do Rio Doce, podem estar afetando a aptidão dos peixes nesse ambiente. 

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  • Mining activities are among the main sources of environmental contamination by heavy metals. In Brazil, the impacts caused by mining in the Rio Doce basin gained wide media coverage after the collapse of a tailings dam
    of ore. In this environment, a mixture of heavy metals was observed, which can cause important changes in aquatic organisms such as fish. Against Furthermore, the objective of the present study was to identify and describe the impacts socio-environmental issues promoted by mining activities in the Rio Doce basin, as well as
    such as investigating the effect of mixing heavy metals through changes behavioral and embryonic development of fish. For this, they were Two studies were conducted, in the first (Chapter 1) the chronological what is known about the environmental and social impacts caused by mining activities in the Rio Doce basin. In this study, impacts of mining on different levels of the ecosystem: from abiotic factors and molecular impacts to community impacts. While in the second study (Chapter 2) we used embryonic and behavioral markers of zebrafish (Danio rerio) to evaluate impacts caused by mixing metals. In this study, it was observed that the mixture of metals affects embryonic markers during early development (somitogenesis, hatching, and heartbeat), but not on markers of late development (length, locomotor behavior and thigmotaxis). Other an important finding is that in late markers the metals have an antagonistic effect on the mixture of metals, reducing the effects related to the individual exposure of metals. These results show that the mixture of heavy metals from mining in Rio Doce basin, may be affecting fish fitness in this environment

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  • BRAYAN JONAS MANO SOUSA
  • ANÁLISE E PURIFICAÇÃO DE CANABINOIDES OBTIDOS A PARTIR DO CULTIVO IN VITRO UTILIZANDO CuFe2O4

  • Orientador : JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • FARAH MARIA DRUMOND CHEQUER BALDONI
  • MARNA ELIANA SAKALEM
  • VIRGINIA MARTINS CARVALHO
  • Data: 19/02/2024

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  •      O uso de substâncias psicoativas por diversas civilizações tem sido comum ao longo da história. A maconha é uma das plantas mais cultivadas e consumidas em todo o mundo para este fim. Os efeitos farmacológicos da Cannabis estão associados a vários compostos denominados canabinoides, entre estes se destacam o delta-9-tetraidrocanabinol (Δ9-THC) e o canabidiol (CBD). O CBD tem propriedades ansiolíticas e não possui efeitos psicoativos ao contrário do Δ9-THC, que possui atividades ansiogênicas em altas doses. Atualmente, a produção de canabinoides é limitada no cultivo tradicional. A cultura in vitro produz plantas livres de doenças, com maiores teores de compostos bioativos e em menor tempo e espaço do que a agricultura convencional. Neste contexto, torna-se de extrema relevância e importância social e econômica para o Brasil a possibilidade de produção e purificação de CBD, dentro das exigências regulatórias do governo. Este projeto visa inovar a análise e purificação de canabinoides a partir do cultivo in vitro de Cannabis sativa.

         O uso de substâncias psicoativas por diversas civilizações tem sido comum ao longo da história. A maconha é uma das plantas mais cultivadas e consumidas em todo o mundo para este fim. Os efeitos farmacológicos da Cannabis estão associados a vários compostos denominados canabinoides, entre estes se destacam o delta-9-tetraidrocanabinol (Δ9-THC) e o canabidiol (CBD). O CBD tem propriedades ansiolíticas e não possui efeitos psicoativos ao contrário do Δ9-THC, que possui atividades ansiogênicas em altas doses. Atualmente, a produção de canabinoides é limitada no cultivo tradicional. A cultura in vitro produz plantas livres de doenças, com maiores teores de compostos bioativos e em menor tempo e espaço do que a agricultura convencional. Neste contexto, torna-se de extrema relevância e importância social e econômica para o Brasil a possibilidade de produção e purificação de CBD, dentro das exigências regulatórias do governo. Este projeto visa inovar a análise e purificação de canabinoides a partir do cultivo in vitro de Cannabis sativa.

     


  • Mostrar Abstract
  • The use of psychoactive substances by different civilizations has been common throughout history. Marijuana is one of the most cultivated and consumed plants worldwide for this purpose. The pharmacological effects of Cannabis are associated with several compounds called cannabinoids, among which delta-9-tetrahydrocannabinol (Δ9-THC) and cannabidiol (CBD) stand out. CBD has anxiolytic properties and has no psychoactive effects unlike Δ9-THC, which has anxiogenic activities at high doses. Currently, the production of cannabinoids is limited in traditional cultivation. In vitro culture produces disease-free plants, with higher levels of bioactive compounds and in less time and space than conventional agriculture. In this context, the possibility of producing and purifying CBD, within the regulatory requirements of the government, becomes of extreme relevance and social and economic importance for Brazil. This project aims to innovate the analysis and purification of cannabinoids from the in vitro cultivation of Cannabis sativa.

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  • RAQUEL VALINHAS E VALINHAS
  • DESENVOLVIMENTO DE UM BIOPROCESSO PARA A PRODUÇÃO DE ETANOL A PARTIR DA MACAÚBA

     
  • Orientador : DANIEL BONOTO GONCALVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LEANDRO VIEIRA DOS SANTOS
  • ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • DANIEL BONOTO GONCALVES
  • GUSTAVO MOLINA
  • VALERIA MONTEZE GUIMARAES
  • Data: 19/02/2024

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  • Nos últimos anos a preocupação e busca por combustíveis alternativos tem se intensificado de forma global. Neste cenário, estudos voltados a produção de álcool combustível e biodiesel no Brasil e no mundo tem se tornado de fundamental importância impulsionando vários setores a buscar tecnologias que possam contribuir para o desenvolvimento socioeconômico e ambiental. Neste contexto o presente trabalho teve por objetivo integrar as duas principais matrizes energéticas brasileira, a partir da caracterização dos coprodutos oriundos da cadeia do biodiesel para avaliação do potencial para produção de etanol, e ainda a produção deste combustível a partir das mais promissoras. 

     

  • Mostrar Abstract
  • In recent years the concern and search for alternative fuels has intensified globally. In this scenario, studies aimed at the production of fuel alcohol and biodiesel in Brazil and in the world have become of fundamental importance, driving several sectors to seek technologies that can contribute to socioeconomic and environmental development. In this context, the present work aimed to integrate the two main Brazilian energy matrices, from the characterization of the co-products from the biodiesel chain to evaluate the potential for ethanol production, and also the production of this fuel from the most promising ones.

     
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  • RAISSA CRISTINA DIAS GRACIANO
  • Caracterização molecular dos parálogos do gene Hormônio liberador de gonadotropina (GnRH) em espécies de peixe de piracema

  • Orientador : GABRIEL DE MENEZES YAZBECK
  • MEMBROS DA BANCA :
  • Fausto Moreira da Silva Carmo
  • EDUARDO PAHOR FILHO
  • GABRIEL DE MENEZES YAZBECK
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • RALPH GRUPPI THOME
  • RONALD KENNEDY LUZ
  • Data: 27/02/2024

  • Mostrar Resumo
  • O hormônio liberador de gonadotropina (GnRH) é um neuropeptídeo central na fisiologia
    reprodutiva dos vertebrados, pois regula a síntese e liberação de gonadotropinas. Os peixes
    teleósteos possuem dois a três genes parálogos GnRH e representam um bom modelo para
    compreensão da história evolutiva e mecanismos funcionais desse hormônio. Este trabalho tem
    como objetivo principal realizar a caracterização molecular de parálogos de genes GnRH (que
    codificam para um pré-pró-GnRH), em duas espécies de peixe de piracema, Salminus brasiliensis e
    Brycon orbignyanus, ambas com grande valor comercial e importância ecológica. A caracterização
    in silico foi realizada com dados de sequenciamento de Nova-geração de DNA produzidas pela
    plataforma HiSeq 2000-Illumina. Foi identificado o gene GnRH1 por meio da anotação genômica
    previamente realizada via MAKER, em uma montagem genômica de novo. A sequência
    codificadora do pré-pró-GnRH1 (264 pb/88 aa), recuperada na montagem de S. brasiliensis,
    utilizada como isca para recuperar o mesmo gene dentro da montagem genômica de B. orbignyanus.
    Sequências para o pré-pró-GnRH2 e 3 da espécie Astyanax mexicanus foram utilizadas como
    consulta, no entanto, só foi possível recuperar o GnRH2 com o BLAST, e o scaffold onde ele foi
    localizado parcialmente foi anotado com AUGUSTUS. O pré-pró-GnRH2 foi anotado dentro do
    genoma de S. brasiliensis (258 pb/86 aa) e parcialmente no genoma de B. orbignyanus (144 pb/48
    aa). O pré-pró-GnRH é um neuropeptídeo tripartido e o tamanho de cada uma dessas regiões estão
    de acordo com a literatura. Entretanto, o transcrito pré-pró-GnRH1 apresentou uma variação no
    segundo aminoácido do sítio proteolítico, possivelmente, na enzima responsável pelo corte. O
    sequenciamento de Sanger de amplicons do GnRH1, possibilitou a validação da sequência predita e
    da variação no sítio proteolítico. Os transcritos preditos foram alinhados, com sequências de GnRHs
    depositadas no NCBI para peixes Characiformes. A análise filogenética agrupou as sequências de
    pré-pró-GnRs em três clados distintos e formam um grupo monofilético, o que corrobora a
    classificação dos parálogos aqui caracterizados. Também foram preditas sequências inéditas de
    receptores para GnRH dentro do genoma de ambas espécies de interesse. Os ensaios in vivo foram
    realizados administrando o decapeptídeo sintético de GnRH1: 10, 25, 35, 50 e 100 μg/kg, extrato
    hipofisário de carpa (EHC) e solução salina. Não foi observada desova em nenhuma das matrizes
    induzidas com o GnRH1 sintético e o tratamento com EHC não gerou uma resposta uniforme em
    todos os experimentos. Obteve-se caracterização molecular dos parálogos GnRH1 e GnRH2, bem
    como dos seus receptores. Esses resultados irão subsidiar novas pesquisas aplicadas à biotecnologia
    para assistência na reprodução em cativeiro de peixes de piracema, estudos estruturais de
    hormônios/receptores, liberação lenta e no desenvolvimento de um sistema de expressão heteróloga.


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  • n/a

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  • BRUNA CRISTINA ALVES
  • CULTIVO DE CANNABIS SATIVA L.  EM SISTEMA CONTROLADO VISANDO A PRODUÇÃO DE CANABINOIDES

  • Orientador : JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CAROLINE MARRONI CREMONEZ
  • ELIANA RODRIGUES
  • FARAH MARIA DRUMOND CHEQUER BALDONI
  • JOAO MAURICIO PACHECO
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MARLUCIA SOUZA PADUA VILELA
  • Data: 28/02/2024

  • Mostrar Resumo
  • Objetivou-se com esse trabalho analisar diferentes tratamento no cultivo in vitro de Cannabis sativa L., desde a germinação até a propagação das plântulas. Na etapa da germinação das sementes, realizou-se um ensaio de desinfestação com as sementes. Após esse processo, as sementes foram inoculadas em diferentes meios de cultivo, com e sem a influência da luz para a análise de germinação, além da aplicação de testes de escarificação na quebra de dormência. Concluiu-se que o uso de fungicida não influencia no processo de desinfestação, sendo eficaz apenas o uso de hipoclorito de sódio e etanol 70%. A escarificação física é eficiente na superação da dormência, reduzindo o tempo de germinação. Em 36 horas já foram observadas sementes germinadas, comparadas ao grupo controle. Além disso, constatou-se a perda da viabilidade das sementes em longos períodos de armazenagem em temperatura ambiente. Na segunda etapa do trabalho, realizou-se testes para a propagação das plântulas. Segmentos nodais de plântulas in vitro foram inoculados em meio de cultivo MS, com diferentes concentrações de auxinas, AIA, AIB e ANA (0,5, 1,0 e 2,0 mg/L) e também, em meios de cultivo MS com variações de pH, visando verificar a capacidade de multiplicação do explante. Os melhores resultados no desenvolvimento das plântulas foram obtidos utilizando-se o meio MS com AIB, especialmente na menor concentração (0,5 mg/L). Já o pH 5.8 favoreceu o crescimento das plantas in vitro e com melhor desenvolvimento das raízes.


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  • The objective of this work was to analyze different treatments in the in vitro cultivation of Cannabis sativa L., from germination to seedling propagation. In the seed germination stage, a disinfestation test was carried out with the seeds. After this process, the seeds were inoculated in different culture media, with and without the influence of light for the germination analysis, in addition to the application of scarification tests to break dormancy. It was concluded that the use of fungicide does not influence the disinfestation process, being effective only the use of sodium hypochlorite and 70% ethanol. Physical scarification is efficient in overcoming dormancy, reducing germination time. In 36 hours, germinated seeds were already observed, compared to the control group. In addition, the loss of seed viability was observed in long periods of storage at room temperature. In the second stage of the work, tests were carried out for the propagation of the seedlings. Nodal segments of seedlings in vitro were inoculated in MS culture medium, with different concentrations of auxins, AIA, AIB and ANA (0.5, 1.0 and 2.0 mg/L) and also, in MS culture medium with pH variations, in order to verify the multiplication capacity of the explant. The best results in seedling development were obtained using MS medium with IBA, especially at the lowest concentration (0.5 mg/L). The pH 5.8 favored the growth of plants in vitro and with better root development.

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  • THAIS PAULA RODRIGUES GONÇALVES
  • COMPOSIÇÃO QUÍMICA, AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ALELOPÁTICA E LARVICIDA E DOS EFEITOS CITOTÓXICO, GENOTÓXICO E ANTIGENOTÓXICO DE Tecoma stans (BIGNONIACEAE)

  • Orientador : LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JULIANA CRISTINA DOS SANTOS ALMEIDA BASTOS
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MAIRON CESAR COIMBRA
  • MARIANA GUERRA DE AGUILAR
  • PAULA AVELAR AMADO
  • Data: 22/03/2024

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  • Flores de T. stans foram coletadas no município de Divinópolis-MG e o extrato etanólico (EE) foi obtido por turbo-extração, sendo submetido à partição com hexano (HEX), diclorometano (DCM) e acetato de etila (AC) para obtenção das frações. Os compostos presentes nas frações foram caracterizados por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas (CG-EM) e Cromatografia Líquida acoplada a Detector de Arranjo de Diodos e Espectrometria de Massas (CL-DAD-EM). A atividade alelopática foi realizada com sementes de alface e cebola, e a análise dos efeitos citotóxico, genotóxico e antigenotóxico foi feita com sementes de cebola. A atividade larvicida foi avaliada utilizando larvas de Artemia salina e Culex quinquefasciatus. Na fração HEX, analisada por CG-EM, as principais classes das substâncias anotadas foram ésteres de ácidos graxos e fitoesteróis. No EE e nas outras frações foram encontrados alcaloides, flavonas, flavonóis e glicosídeos de fenilpropanoides. Na análise da germinação de sementes, a velocidade de germinação das sementes de alface diminuiu significativamente nos tratamentos com EE e frações HEX e DCM. Para as sementes de cebola, destacaram-se as amostras HEX e DCM, sendo sua ação melhor do que o controle positivo em todas as concentrações. Já nas análises do crescimento de plântulas de alface, todos os tratamentos afetaram o crescimento da radícula e hipocótilo. Nos ensaios com cebola, os melhores resultados foram nos tratamentos com as frações HEX e DCM de T. stans, apresentando valores de inibição maiores que 50% a partir da concentração de 500 μg/mL. Nos ensaios de genotoxicidade, apenas a fração AC nas concentrações de 750 e 1000 μg/L apresentou diferença significativa no índice de aberrações cromossômicas, quando comparado ao controle negativo. O extrato e demais frações de T. stans não foram considerados genotóxicos. Na análise do potencial antigenotóxico, o extrato e as frações de T. stans foram capazes de reduzir a genotoxicidade provocada pelo glifosato e pela atrazina, em todas as concentrações testadas. No ensaio de letalidade frente à A. salina, apenas a fração de AC apresentou elevada toxicidade nas concentrações testadas. Quanto à atividade larvicida das amostras de T. stans frente à C. quinquefasciatus, as frações HEX e DCM demonstraram se ativas, com letalidade de até 100% nas primeiras 24 horas. Esse é o primeiro estudo com as flores de T. stans que avaliaram essas atividades.


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2023
Dissertações
1
  • Jonas Alexsander Dias Ferreira
  • Remoção de corantes utilizados em indústria têxtil por adsorção utilizando biomassa seca de
    Eichhornia crassipes Mart. (Solms) e Pistia stratiotes L..

  • Orientador : RAFAEL CESAR RUSSO CHAGAS
  • MEMBROS DA BANCA :
  • RAFAEL CESAR RUSSO CHAGAS
  • LUDMILA SILVA BRIGHENTI
  • KELLY ROBERTA FRANCISCO MURUCI DE PAULA
  • Data: 16/02/2023

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  • A indústria têxtil está presente em todos os países por conta de uma necessidade humana de vestuário e usos utilitários variados como na decoração, na área hospitalar, militar, entre outros. Segundo dados da Associação Brasileira da Indústria Têxtil (ABIT), o varejo de vestuário fechou o ano de 2017 com 6,71 bilhões de peças vendidas, 6,5% a mais do que em 2016, com o faturamento de R$ 144 bilhões. De acordo com o balanço da entidade, os investimentos do setor em 2017 chegaram a R$ 1,9 milhão e foram gerados 3,5 mil postos de trabalho, totalizando 1,48 milhão de pessoas empregadas no setor. Dado o tamanho do mercado da indústria têxtil, uma questão importante associada à produção é o tratamento de águas residuais. O efluente têxtil é rico em sais e compostos orgânicos tais como corantes, surfactantes, entre outras substâncias usadas para tornas os tecidos resistentes a agentes físicos, químicos e biológicos. Tendo isto em vista, este trabalho visa a uitlização da biomassa seca de Eichhornia crassipes e Pistia stratiotes, duas plantas daninhas, para remoção por adsorção dos corantes Vermelho de Remazol RR e Preto Reativo 5, ambos utilizados na indústria textil.


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  • The textile industry is present in all countries because of a human need for clothing and various utilitarian uses such as decoration, hospital, military, among others. According to data from the Brazilian Textile Industry Association (ABIT), apparel retail ended 2017 with 6.71 billion pieces sold, 6.5% more than in 2016, with sales of R$ 144 billion. According to the entity's balance sheet, investments in the sector in 2017 reached R$ 1.9 million and 3,500 jobs were created, totaling 1.48 million people employed in the sector. Given the size of the textile industry market, an important issue associated with production is wastewater treatment. Textile effluent is rich in salts and organic compounds such as dyes, surfactants, among other substances used to make fabrics resistant to physical, chemical and biological agents. With this in mind, this work aims to use the dry biomass of Eichhornia crassipes and Pistia stratiotes, two weeds, to remove by adsorption the dyes Remazol Red RR and Reactive black 5, both used in the textile industry.

2
  • Lara Luiza Freitas de Oliveira
  • AVALIAÇÃO DOS CASOS DE INTOXICAÇÃO E DA RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA INDUZIDA PELA EXPOSIÇÃO A METAIS PESADOS ASSOCIADOS ÀS ATIVIDADES MINERADORAS

  • Orientador : RALPH GRUPPI THOME
  • MEMBROS DA BANCA :
  • RALPH GRUPPI THOME
  • FARAH MARIA DRUMOND CHEQUER BALDONI
  • MAYRON ALVES DE VASCONCELOS
  • KARINA MARJORIE SILVA HERRERA
  • Data: 22/09/2023

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  • A atividade mineradora se destaca como uma das principais fontes de contaminação da água por metais pesados, especialmente após eventos de rompimento de barragens, como os da barragem de Fundão e Mina Córrego do Feijão, que liberaram rejeitos de minério, contendo metais pesados, às bacias dos rios Doce e Paraopeba, respectivamente. Os metais quando presentes na água como contaminantes podem causar intoxicação humana, bem como contribuir para o desenvolvimento de resistência antimicrobiana, visto que os mecanismos de resistência a metais e antimicrobianos podem ser semelhantes. Neste estudo foi investigado os efeitos tóxicos causados por metais pesados liberados após o rompimento das barragens de Fundão e Mina Córrego do Feijão, acerca dos casos de intoxicação humana e desenvolvimento de resistência antimicrobiana. Inicialmente foi realizado um estudo documental no banco de dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação a fim de traçar o perfil epidemiológico das intoxicações por metais em Minas Gerais e no Brasil, antes e após o rompimento das barragens. Foi observado um aumento de 5,3% / 23,3% dos casos de intoxicação por metais no Brasil e 34,7% / 34,3% em Minas Gerais após o rompimento das barragens de Fundão e Mina Córrego do Feijão, respectivamente. Posteriormente, foi realizada uma revisão integrativa da literatura para analisar estudos que descrevessem a relação entre bactérias recuperadas de locais impactados pelos rejeitos de mineração decorrentes do rompimento das barragens supramencionadas e o desenvolvimento de resistência antimicrobiana. As buscas foram realizadas nas bases de dados PubMed, BVS, Science Direct e Web of Science, sendo seis artigos selecionados e de forma geral, todos sugeriram que a contaminação ambiental por metais pesados, decorrentes dos rejeitos de mineração liberados após os desastres, favoreceu o aparecimento de genes de resistência a antimicrobianos. Adicionalmente foi realizada a quantificação de metais na água do rio Itapecerica, um rio urbano poluído, e bactérias gram-negativas multirresistentes (colistina, gentamicina e ciprofloxacina) foram recuperadas destas amostras e identificadas. Foi constatada a presença dos metais ferro, cobalto, chumbo, alumínio e mercúrio na água, este último em concentrações acima do permitido pela legislação, e 13 morfotipos multirresistentes foram identificados, sendo todos Enterobacteriales (quatro Citrobacter amalonaticus; quatro Pantoea agglomerans; duas Morganella morganii e três Escherichia coli). Se tratando da bactéria E. coli, constantemente presente no ambiente aquático, esta apresentou resistência ainda a outros antimicrobianos, incluindo betalactâmicos. Por fim, foi realizado um estudo de indução de resistência ao meropenem por metais pesados em concentrações encontradas na água da bacia do rio Doce após o rompimento da barragem de Fundão, em E. coli. Um estudo de indução de resistência in vitro por múltiplas passagens (21 dias) foi conduzido utilizando a bactéria Escherichia coli ATCC 25922 multisensível, a qual foi exposta a uma mistura de metais composta por ferro (0,15 mg L-1), manganês (0,06 mg L-1) e cádmio (0,0002 mg L-1). Ao longo dos 21 dias foi observado um aumento na concentração inibitória mínima frente ao meropenem, indicando desenvolvimento e indução de resistência a este antimicrobiano. Os dados deste estudo alertam para efeitos tóxicos causados por metais pesados presentes como contaminantes ambientais após desastres de mineração aos seres humanos (intoxicação) e a microrganismos (resistência antimicrobiana), o que pode levar ao comprometimento da saúde pública.


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  • The mining activity stands out as one of the main sources of water contamination by heavy metals, especially after dam failures, such as the Fundão dam and Córrego do Feijão mine, which released ore tailings containing heavy metals into the basins. of the Doce and Paraopeba rivers, respectively. When metals are present in water as contaminants, they can cause human intoxication, as well as contribute to the development of antimicrobial resistance, since the mechanisms of resistance to metals and antimicrobials can be similar. This study investigated the toxic effects caused by heavy metals released after the rupture of the Fundão and Mina Córrego do Feijão dams, concerning cases of human intoxication and development of antimicrobial resistance. Initially, a documental study was carried out in the database of the Notifiable Diseases Information System in order to trace the epidemiological profile of metal intoxications in Minas Gerais and Brazil, before and after the dam failure. An increase of 5.3% / 23.3% of cases of metal intoxication was observed in Brazil and 34.7% / 34.3% in Minas Gerais after the rupture of the Fundão and Mina Córrego do Feijão dams, respectively. Subsequently, an integrative literature review was carried out to analyze studies that described the relationship between bacteria recovered from sites impacted by mining tailings resulting from the rupture of the aforementioned dams and the development of antimicrobial resistance. The searches were carried out in the PubMed, BVS, Science Direct and Web of Science databases, with six articles selected and, in general, all suggested that environmental contamination by heavy metals, resulting from mining waste released after disasters, favored the emergence of antimicrobial resistance genes. Additionally, metals were quantified in the water of the Itapecerica river, a polluted urban river, and multiresistant gram-negative bacteria (colistin, gentamicin and ciprofloxacin) were recovered from these samples and identified. The presence of iron, cobalt, lead, aluminum and mercury in the water was verified, the latter in concentrations above that allowed by law, and 13 multiresistant morphotypes were identified, all of them Enterobacterial (four Citrobacter amalonaticus; four Pantoea agglomerans; two Morganella morganii and three Escherichia coli). In the case of the E. coli bacteria, constantly present in the aquatic environment, it showed resistance to other antimicrobials, including beta-lactams. Finally, a study was carried out on the induction of resistance to meropenem by heavy metals at concentrations found in the water of the Doce river basin after the Fundão dam rupture, in E. coli. A multipass (21 days) in vitro resistance induction study was conducted using the multisensitive Escherichia coli ATCC 25922 bacteria, which was exposed to a metal mixture composed of iron (0.15 mg L-1), manganese ( 0.06 mg L-1) and cadmium (0.0002 mg L-1). Over the 21 days, an increase in the minimum inhibitory concentration against meropenem was observed, indicating the development and induction of resistance to this antimicrobial. Data from this study warn of toxic effects caused by heavy metals present as environmental contaminants after mining disasters to humans (intoxication) and microorganisms (antimicrobial resistance), which can lead to compromised public health.

3
  • TATIANE CASTAÑO VALADARES
  • PRODUÇÃO DE MUDAS PADRONIZADAS DE Cannabis sativa L.  A PARTIR DE TÉCNICAS BIOTECNOLÓGICAS

  • Orientador : JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MARLUCIA SOUZA PADUA VILELA
  • JOAO MAURICIO PACHECO
  • Data: 22/11/2023

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  • Esse projeto tem o objetivo de aperfeiçoar o estabelecimento das plântulas de Cannabis sativa cultivadas in vitro, considerando os diferentes tipos de tratamento com reguladores de crescimento; BAP e TDZ, e variações no espectro de luz e cores. Na presente pesquisa, o regulador BAP com tratamento de 1,0 mg/L obteve sucesso na multiplicação de brotos tendo significância de (p < 0,05) frente ao grupo controle e ao tratamento com TDZ de 1,0mg/L na avaliação com 49 dias. Os reguladores TDZ e BAP não tiveram significância para indução de raízes em nenhum tratamento (T1, T2 e T3).  O regulador TDZ na concentração de 2mg/L obteve o maior comprimento de raízes.  


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  • This project aims to improve the establishment of Cannabis sativa seedlings cultivated in vitro, considering the different types of treatment with growth regulators; BAP and TDZ, and variations in the light and color spectrum. In the present research, the BAP regulator with a treatment of 1.0 mg/L was successful in the multiplication of shoots, having a significance of (p < 0.05) compared to the control group and the treatment with TDZ of 1.0 mg/L in the evaluation with 49 days. The TDZ and BAP regulators were not significant for root induction in any treatment (T1, T2 and T3). The TDZ regulator at a concentration of 2mg/L obtained the greatest root length.

Teses
1
  • Jaqueline França Sousa
  • Síntese de Novos Análogos do Alcaloides 3-Alquilpiridínicos Contendo Diferentes Heterociclos e
    Avaliação de suas Atividades Antimalárica, Antifúngica e Antibacteriana

  • Orientador : GUSTAVO HENRIQUE RIBEIRO VIANA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • AMANDA LUISA DA FONSECA
  • FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • GUSTAVO HENRIQUE RIBEIRO VIANA
  • KARINA MARJORIE SILVA HERRERA
  • SILMARA NUNES ANDRADE
  • Data: 27/02/2023

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  • As infecções fúngicas e bacterianas tratam – se de um problema de saúde pública mundial cada vez maior,  e segundo a OMS, resultando em um enorme gasto econômicostas infecções  representam as principais causas de Infecções Relacionadas a Assistência à Saúde (IRAS). A alária é uma doença negligenciada predominante nos países em desenvolvimento, o que leva a um número agravante na taxa de mortalidade. O tratamento desta doença necessita de antiplasmodiais que são compostos chave para o controle da malária. Atualmente relatos na literatura mostram o surgimento rápido da resistência aos medicamentos já existentes, resistência cruzada e dependência de um número limitado de classes de antiplasmodiais, antifúngicos e antibacterianos. Neste projeto de pesquisa avaliamos a contribuição da síntese orgânica na preparação de compostos bioativos que são importantes no contexto da multidisciplinaridade e na potencialização dos resultados descritos para as moléculas de ocorrência natural. Propomos novos protótipos que apresentam estruturas químicas inovadoras como candidatos à novos antiplasmodiais, assim como a avaliação da atividade antifúngica e antibactericida de dois análogos do alcaloide marinho 3-alquilpiridpinico. Os novos análogos, 6a e 6b, apresentaram atividade antifúngica e foram ativos contra C. albicans, C. glabrata e C. tropicalis com valores de CIM 7,8 μg/mL e mostraram contra C. krusei (CIM 3,9 μg/mL). A atividade antibacteriana frente a Staphylocucus aureus resistente a meticilina, apresentou atividade antiestafilocócica e resultado de CIM com uma faixa de 0,98 - 3,9 μg/mL contra cepas de Staphylococcus. Esses resultados indicam que o composto 6a apresenta atividade antibacteriana e pode ser usado com um protótipo no desenvolvimento de novos antibióticos contra Gram-positivos, especialmente frente cepas de S. aureus resistentes à meticilina (MRSA).


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2
  • Michelli dos Santos
  • Desenvolvimento de um kit de diagnóstico imunológico para Schistosoma mansoni

  • Orientador : ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • DENISE DA SILVEIRA LEMOS GIUNCHETTI
  • GRASIELE DE SOUSA VIEIRA TAVARES
  • LETICIA FERNANDES DE OLIVEIRA
  • RONALDO ALVES PINTO NAGEM
  • Data: 31/05/2023

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  • A esquistossomose , doença parasitária tropical negligenciada, causada por vermes trematódeos do gênero Schistosoma, afeta aproximadamente 240 milhões de pessoas no mundo. O diagnóstico pode ser realizado por métodos parasitológicos, moleculares e imunológicos. A fim de efetivamente controlar e monitorar a esquistossomose, novos métodos de diagnóstico são essenciais. Devido ao longo tempo necessário para o preparo de antígenos brutos para imunodiagnóstico da esquistossomose, a preparação de antígenos recombinantes tem se tornado uma alternativa promissora. Nesse sentido,  mediante à necessidade de desenvolvimento de um teste com alta sensibilidade e especificidade, o objetivo deste trabalho é a otimização das condições de um teste de ELISA para o diagnóstico da esquistossomose mansônica tendo em vista a transferência de tecnologia. Nesse âmbito utilizando uma proteína recombinante desenhada racionalmente, a proteína rSH1, que foi expressa em  células de Escherichia coli BL21 (λDE3) pLysE e pLysS, purificada e empregada em um imunoensaio. A maximização dos processos expressão foi feita através da Metodologia de Superfície de Resposta e o rendimento da proteína foi de 0,034mg/mL para 1,234 mg/mL. Os resultados sugerem que a proteína rSH1 apresenta capacidade de identificar soros positivos para esquistossomose, entretanto ainda é necessário otimizar parâmetros para determinar a acurácia diagnóstica do ensaio. Assim, a proteína rSH1 avaliada neste estudo, apresenta potencialidade em ser empregada como insumo biotecnológico no desenvolvimento de novas estratégias para o diagnóstico de esquistossomose.


  • Mostrar Abstract
  • Schistosomiasis, a neglected tropical parasitic disease caused by trematode worms of the genus Schistosoma, affects approximately 240 million people worldwide. Diagnosis can be performed by parasitological, molecular, and immunological methods. In order to effectively control and monitor schistosomiasis, new diagnostic methods are essential. Due to the long time needed to prepare crude antigens for the immunodiagnosis of schistosomiasis, the preparation of recombinant antigens has become a promising alternative. In this sense, due to the need to develop a test with high sensitivity and specificity, the objective of this work is to optimize the conditions of an ELISA test for the diagnosis of schistosomiasis mansoni, with a view to technology transfer. In this context, using a rationally designed recombinant protein, the rSH1 protein, which was expressed in Escherichia coli BL21 (λDE3) pLysE and pLysS cells, was purified and used in an immunoassay. The maximization of the expression  processes was done through the Response Surface Methodology and the protein yield was from 0.034mg/mL to 1.234 mg/mL. The results suggest that the rSH1 protein is able to identify positive sera for schistosomiasis, however, it is still necessary to optimize parameters to determine the diagnostic accuracy of the assay. Thus, the rSH1 protein evaluated in this study has the potential to be used as a biotechnological input in the development of new strategies for the diagnosis of schistosomiasis.

2022
Dissertações
1
  • CHRISTIANE FATIMA OLIVEIRA
  • EFICÁCIA E SEGURANÇA DA PRÓPOLIS NO TRATAMENTO DE DOENÇAS PERIODONTAIS: REVISÃO SISTEMÁTICA E META ANÁLISE

  • Orientador : JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • MARCO AURÉLIO BENINI PASCHOAL
  • Data: 03/02/2022

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  • A própolis é uma resina coletada por abelhas da espécie Apis mellifera de diversas espécies da flora. Tem como objetivo proteger a colmeia de ataques bacteriológicos. Destaca-se por suas ações terapêuticas, antimicrobiana, anti-inflamatória, cicatrizante, anticariogênica e anticancerígena. Possui uma vasta composição que inclui ácidos fenólicos, ácido cumárico, flavonóides, terpenos, dentre outros. Muitas possuem propriedades antimicrobianas nas bactérias responsáveis pela doença periodontal, como a gengivite/periodontite, e nos micro-organismos, que constituem o biofilme dental, precursores da doença bucal. É vista como promissora pela periodontia, tanto preventiva como curativa. Portanto, o objetivo deste trabalho é realizar uma revisão bibliográfica acerca do uso da própolis na doença periodontal, além de dar suporte para discutir os resultados e as formas de uso. Por meio das bases de dados LILACS, Embase, CINAHL, Web of Science, Scopus, PubMed e SciELO, serão avaliados os efeitos clínicos da própolis na doença periodontal e discutidos os resultados dos benefícios da terapia da própolis. Pesquisadores da área odontológica reconhecem a necessidade de constantes pesquisas clínicas capazes de avaliar a existência da interação medicamentosa da própolis. Para tanto, estudos com o objetivo de desenvolver, testar e tornar conhecidas novas formulações, concentrações e combinações são interessantes não apenas aos profissionais da Odontologia, mas para saúde em geral.


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  • Propolis is a resin collected by bees of the species Apis mellifera from various species of flora. Its purpose is to protect the hive from bacteriological attacks. It stands out for its therapeutic, antimicrobial, anti-inflammatory, healing, anticariogenic, and anticancer actions. It has a vast composition that includes phenolic acids, coumaric acid, flavonoids, and terpenes, among others. Many have antimicrobial properties on the bacteria responsible for periodontal disease, such as gingivitis/periodontitis, and on the microorganisms, which constitute the dental biofilm, precursors of oral disease. It is seen as promising for periodontics, both preventive and curative. Therefore, the aim of this paper is to conduct a literature review on the use of propolis in periodontal disease, in addition to providing support to discuss the results and forms of use. By means of the LILACS, Embase, CINAHL, Web of Science, Scopus, PubMed and SciELO databases, the clinical effects of propolis in periodontal disease will be evaluated and the results of the benefits of propolis therapy will be discussed. Dental researchers recognize the need for constant clinical research to evaluate the existence of propolis drug interactions. Therefore, studies aimed at developing, testing and making known new formulations, concentrations and combinations are of interest not only to professionals, but also to students of dentistry.

2
  • FERNANDA ALICE DE OLIVEIRA
  • IDENTIFICAÇÃO DE NOVOS COMPOSTOS COM AÇÃO ANTIPLAMODIAL IN SILICO E IN VITRO

  • Orientador : FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • AMANDA LUISA DA FONSECA
  • FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • GUSTAVO HENRIQUE RIBEIRO VIANA
  • SILMARA NUNES ANDRADE
  • Data: 14/02/2022

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  • Os compostos bioativos da N-acilidrazonas estão disponíveis como
    substâncias promissoras no design de drogas e na química medicinal. No teste
    in vitro, os compostos AH1, AH2, AH4, AH5 foram ativos contra a cepa de
    Plasmodium falciparum resistente à cloroquina (W 2 ) e não demonstraram
    toxicidade contra as linhas de células humanas WI26 VA-4 (LC 50 &gt; 100 µM). O
    composto AH5 e AH4 foram os mais ativos com um valor de IC 50 de 0,7 μM e
    0,9 μM. Entre os compostos testados, AH4 e AH5 foram selecionados e
    selecionados para cálculos de docking molecular para elucidar possíveis alvos
    envolvidos em seu mecanismo de ação e o teste SwissADME para exemplificar
    seus dados farmacocinéticos. O composto AH5 possui afinidade para 12 alvos,
    baixa seletividade, enquanto o composto AH4 possui maior afinidade para
    apenas um alvo (3PHC), por isso foi selecionado para análise do mapa
    farmacofórico. Nos testes de ADME in silico, os compostos atenderam aos
    padrões de Lipinski, indicando bons resultados de biodisponibilidade. Estes
    resultados demonstram os compostos N-acilidrazonas como candidatos para
    futuros estudos pré-clínicos para malária.


  • Mostrar Abstract
  • The bioactive compounds of N-acylhydrazones are available as Promising substances in drug design and medicinal chemistry. On test in vitro, the compounds AH1, AH2, AH4, AH5 were active against the strain of Chloroquine resistant Plasmodium falciparum (W 2 ) and did not demonstrate toxicity against WI26 VA-4 human cell lines (LC 50 &gt; 100 µM). O compound AH5 and AH4 were the most active with an IC 50 value of 0.7 µM and 0.9 µM. Among the compounds tested, AH4 and AH5 were selected and selected for molecular docking calculations to elucidate possible targets involved in its mechanism of action and the SwissADME test to exemplify their pharmacokinetic data. Compound AH5 has affinity for 12 targets, low selectivity, while the compound AH4 has greater affinity for only one target (3PHC), so it was selected for map analysis pharmacophoric. In ADME in silico tests, the compounds met the Lipinski patterns, indicating good bioavailability results. These results demonstrate N-acylhydrazone compounds as candidates for future preclinical studies for malaria.

3
  • FERNANDA DE MOURA ALVES
  • Planejamento Racional de Novos Análogos de Alcaloides β-carbolínicos com Potencial Atividade Antimalárica

  • Orientador : GUSTAVO HENRIQUE RIBEIRO VIANA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • GUSTAVO HENRIQUE RIBEIRO VIANA
  • RENATA RACHIDE NUNES
  • Data: 15/02/2022

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4
  • Pablo Felipe Rodrigues Gonçalves
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    Produção de bactéria do ácido láctico em meio de cultura econômico utilizando soro de leite suplementado com extrato de soja e seu microencapsulamento para uso em sorbet de frutas

  • Orientador : PAULO AFONSO GRANJEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • PAULO AFONSO GRANJEIRO
  • FERNANDA MARIA POLICARPO TONELLI
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • Data: 22/07/2022

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  • Probióticos são microrganismos vivos utilizados como suplementos alimentares com efeitos benéficos relacionados à melhora do balanço intestinal. Dentre os microrganismos considerados probióticos, somente os classificados como bactérias ácido lácticas (LAB) são considerados importantes em relação à alimentação. O alto custo para produção inviabiliza muito processos com probióticos, por isso, a utilização de fontes renováveis como o soro de leite e suplementação com baixo custo, pode tornar possível a produção industrial dessas bactérias. Este trabalho teve como objetivo realizar a otimização da produção de biomassa e microencapsulamento da cepa Can7, para utilização como probiótico em sorbet de frutas. Através da suplementação do soro de leite com farinha de soja foi realizado o fatorial fracionado no programa Minitab18. Altas concentrações de biomassa foram alcançadas na utilização de extrato de farinha de soja como suplementação do meio, mantendo uma economia de 98,86% e 98,65% em relação a utilização de peptona e extrato de levedura. O encapsulamento da cepa Can7 pela técnica de emulsificação / gelificação interna com alginato de sódio (5%) apresentou eficiência de 87,5%. O aumento da taxa de sobrevivência em condições gastro da microcápsula foi de 65,62 % em relação a célula livre. No teste de ambiente intestinal as sobrevivências das células em microcápsulas 57,69% maior que as livres. As microcápsulas não alteram a característica sensorial do sorbet. Concluímos que o extrato de farinha de soja é uma ótima opção de fonte de nitrogênio sem perda de produção de biomassa da cepa Can7, tornando possível escalonamento do bioprocesso. A microcápsula foi efetiva na proteção da cepa e um bom recurso para economizar na quantidade de células necessárias em alimentos probióticos.


     

     


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  • Probiotics are live microorganisms used as food supplements with beneficial effects related to the improvement of intestinal balance. Among the microorganisms considered probiotics, only those classified as lactic acid bacteria (LAB) are considered important in relation to food. The high cost of production makes processes with probiotics unfeasible, so the use of renewable sources such as whey and low-cost supplementation can make the industrial production of these bacteria possible. This work aimed to optimize the production of biomass and microencapsulation of the Can7 strain, for use as a probiotic in fruit sorbet. By supplementing the whey with soy flour, the fractional factorial was performed in the Minitab18 program. High biomass concentrations were achieved using soybean flour extract as a medium supplementation, maintaining savings of 98.86% and 98.65% in relation to the use of peptone and yeast extract. The encapsulation of the Can7 strain by the emulsification/internal gelation technique with sodium alginate (5%) showed an efficiency of 87.5%. The increase in the survival rate under gastro conditions of the microcapsule was 65.62% in relation to the free cell. In the intestinal environment test, cell survivals in microcapsules were 57.69% higher than free ones. The microcapsules do not change the sensory characteristic of the sorbet. We conclude that soybean meal extract is a great option for a nitrogen source without loss of biomass production of the Can7 strain, making it possible to scale up the bioprocess. The microcapsule was effective in strain protection and a good resource to save on the amount of cells needed in probiotic foods.

5
  • EDILENE SANTOS ALVES DE MELO
  • AVALIAÇÃO, IN VITRO, DO POTENCIAL ANTITUMORAL DO CANABIDIOL EM LINHAGENS TUMORAIS DE CABEÇA E PESCOÇO

  • Orientador : ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA GABRIELA SILVA OLIVEIRA
  • DANIELA LEITE FABRINO
  • ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • Data: 08/08/2022

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  • O sexto tipo de câncer mais comum é o de cabeça e pescoço (CCP), representando 4% de todos os cânceres em todo o mundo. Cerca de 66,9% dos pacientes com esse tipo tumoral terão uma sobrevida média de 5 anos após o diagnóstico. Os tratamentos atuais, como a quimioterapia, radioterapia e cirurgia têm sido limitadas, uma vez que promovem vários efeitos adversos, resistência aos agentes citotóxicos e com isso, uma provável recidiva do tumor. O canabidiol (CBD) tem sido mostrado como um promissor antitumoral para vários tipos de cânceres, tanto in vitro quanto in vivo. Porém, existem apenas dois estudos na literatura que relatam sobre a ação do CBD em linhagens de Carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço (CCECP) negativas para papilomavírus (HPV-), além disso não foi revelado qual o mecanismo de ação pelo qual o CBD atua neste tipo tumoral.  Diante disso, torna-se necessário mais estudos com o CBD em linhagens de CCECP, a fim de desvendar qual possível mecanismo de morte ele atua e descrever sobre os possíveis mecanismo de morte já descritos na literatura em que o CBD atua no câncer. Assim o objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a ação citotóxica do CBD em linhagens de CCECP, além de fazer uma revisão bibliográfica sobre os possíveis mecanismos de morte de células tumorais causadas pelo CBD descritos na literatura. Assim, a citotoxidade celular do CBD foi avaliada através do método MTT em linhagens de CCECP (HN13 e FaDu) e linhagens normais de fibroblastos (WI38) e queratinócitos (Hacat). Em seguida, foi avaliada a seletividade tumoral do CBD. Foi observado que o CBD foi citotóxico para as células tumorais HN13 e FaDu, com valores de IC50 de 9,7 e 14,3 µM, respectivamente. Entretanto, além de citotóxico, o CBD foi seletivo para as células tumorais, os valores de IC50 para as células normais WI38 e Hacat foram, respectivamente 17,6 e 36,4 µM. Os valores do índice de seletividade (IS) foram de (1,8 e 3,72) para HN13 e (1,15 e 2,37) para FaDu. Dessa forma, os resultados mostraram que o CBD é citotóxico e seletivo para as células tumorais, representando um promissor candidato antitumoral para CCP.


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  • The sixth most common type of cancer is head and neck cancer (HNSCC), representing 4% of all cancers worldwide. About 66.9% of patients with this tumour type will have an average survival of 5 years after diagnosis. Current treatments, such as chemotherapy, radiotherapy, and surgery have been limited since they promote various adverse effects, resistance to cytotoxic agents, and with that, a probable tumor recurrence. Cannabidiol (CBD) has been shown as a promising antitumor agent for various cancers, both in vitro and in vivo. However, there are only two studies in the literature that report on the action of CBD on papillomavirus (HPV-) negative Head and Neck Squamous Cell Carcinoma (HNSCC) strains; furthermore, the mechanism of action by which CBD acts on this tumor type has not been revealed.  Therefore, further studies with CBD in HNSCC strains are necessary in order to unveil which possible mechanism of death it acts on and to describe the possible mechanisms of death already described in the literature in which CBD acts on cancer. Thus, the aim of this study was to evaluate, in vitro, the cytotoxic action of CBD on HNSCC strains, in addition to making a literature review on the possible mechanisms of tumor cell death caused by CBD described in the literature. Thus, the cellular cytotoxicity of CBD was evaluated using the MTT method in CCECP lines (HN13 and FaDu) and normal fibroblast (WI38) and keratinocyte (Hacat) lines. Next, the tumor selectivity of CBD was evaluated. It was observed that CBD was cytotoxic to HN13 and FaDu tumor cells, with IC50 values of 9.7 and 14.3 µM, respectively. However, in addition to being cytotoxic, CBD was selective for tumor cells, the IC50 values for normal WI38 and Hacat cells were 17.6 and 36.4 µM, respectively. The selectivity index (SI) values were (1.8 and 3.72) for HN13 and (1.15 and 2.37) for FaDu. Thus, the results showed that CBD is cytotoxic and selective for tumor cells, representing a promising antitumor candidate for CCP.

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  • LIVIA RAMOS SANTIAGO
  •  "Identificação, Síntese e Avaliação do potencial farmacológico do peptídeo isolado da peçonha da aranha Lycosa erythrognatha: Estudo in silico e in vitro".

  • Orientador : ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • KAMILLA MONTEIRO DOS SANTOS
  • Data: 09/08/2022

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  • O glioblastoma (GBM) é um dos tumores cerebrais mais prevalentes. As suas  opções de terapia atuais incluem ressecção cirúrgica seguida de radioterapia e quimioterapia. Para a quimioterapia, a temozolomida ainda atua como o principal quimioterápico para pacientes com GBM. No entanto, os pacientes permanecem apresentando uma baixa taxa de sobrevida. Neste contexto novas moléculas têm sido estudadas para o tratamento, como os peptídeos isolados de venenos de animais por suas propriedades farmacológicas, como atividade antitumoral e atividade antimicrobiana, sugerindo serem promissores candidatos para o desenvolvimento de novos medicamentos, principalmente para o tratamento do GBM. Neste estudo, iniciou-se a caracterização do peptídeo Ly-1, isolado do veneno da aranha Lycosa erythrognatha. Com as análises de bioinformáticas foi possível confirmar in silico que o peptídeo Ly-1 é um peptídeo anfipático e apresenta afinidade por membranas fosfolipídicas. A modelagem molecular do peptídeo Ly-1 realizada no programa Modeller produziu bons resultados estatísticos, indicando que o modelo é plausível. Os resultados obtidos demonstram que Ly-1 pode ser um promissor peptídeo com atividade antitumoral.


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  • Glioblastoma (GBM) is one of the most prevalent brain tumors. Your current therapy options include surgical resection followed by radiation and chemotherapy. For chemotherapy, temozolomide still serves as the main chemotherapy drug for GBM patients. However, patients remain with a low survival rate. In this context, new molecules have been studied for treatment, such as peptides isolated from animal venoms for their pharmacological properties, such as antitumor and antimicrobial activity, suggesting that they are promising candidates for the development of new drugs, especially for the treatment of GBM. In this study, the characterization of the Ly-1 peptide, isolated from the venom of the Lycosa erythrognatha spider, began. With the bioinformatics analysis it was possible to confirm in silico that the Ly-1 peptide is an amphipathic peptide and has an affinity for phospholipid membranes. Molecular modeling of the Ly-1 peptide performed in the Modeller program produced good statistical results, indicating that the model is plausible. The results obtained demonstrate that Ly-1 may be a promising peptide with antitumor activity.

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  • Thaís Paula de Araújo
  • Avaliação da toxicidade de compostos nitrogenados em peixes no contexto de mudanças globais

  • Orientador : RALPH GRUPPI THOME
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CAMILA MARIANGELA PACHECO
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • LUDMILA SILVA BRIGHENTI
  • RALPH GRUPPI THOME
  • Data: 10/08/2022

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  • As mudanças globais têm impactado diretamente os ecossistemas aquáticos, e impulsionadas pelas atividades antrópicas podem causar danos irreversíveis na diversidade biológica. Dentre as consequências dessas mudanças globais estão o excesso de nutrientes nos lagos, associado a atividades agropecuárias, principalmente pelo uso de fertilizantes e agrotóxicos nitrogenados, e as mudanças climáticas, como aumento de temperatura, alterações nos regimes de chuva e consequentemente redução da profundidade dos lagos. Com o objetivo de investigar os efeitos dessas mudanças nos peixes foram conduzidos dois estudos: o primeiro foi revisando a literatura para abordar os efeitos dos compostos nitrogenados (nitrito, nitrato e amônia) e como os parâmetros físico-químicos influenciam na sua toxicidade, e o segundo foi um estudo de caso utilizando fígado de Hoplias malabaricus em um lago impacto por acúmulo de compostos nitrogenados. Os efeitos dos compostos nitrogenados podem ser influenciados por parâmetros físico-químicos, podendo ter efeitos sinérgicos, antagônicos ou efeito protetor. Altas salinidades mostraram efeito protetor na toxicidade por amônia e nitrito, hipóxia e baixo pH foram capazes de intensificar os efeitos causados por amônia e nitrato, com efeitos sinérgicos. Já o aumento da temperatura causou efeitos distintos dentre os compostos nitrogenados, com efeitos sinérgicos quando os peixes foram expostos simultaneamente à amônia, e efeitos antagônicos quando expostos ao nitrito e nitrato. A dureza também influenciou na toxicidade, e seus efeitos são dependentes da espécie em estudo. No segundo estudo, as secas prolongadas tem impactado diretamente a fauna aquática. Os exemplares de Hoplias malabaricus apresentaram alterações histológicas e ocorrência de apoptose que estão associadas ao processo de detoxificação no fígado devido ao acúmulo de compostos nitrogenados na lagoa Carioca. O aumento em número e área de centros melanomacrofágicos podem estar associadas a exposição dos peixes aos poluentes, como amônia e nitrito. Os biomarcadores histológicos, histoquímicos, e imunohistoquímicos se mostraram bioindicadores de impacto ambiental. 


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  • Global changes have directly impacted aquatic ecosystems, and driven by human activities can cause irreversible damage to biological diversity. Among the consequences of these global changes are the excess of nutrients in lakes, associated with agricultural activities, mainly through the use of fertilizers and nitrogenous pesticides, and climate change, such as increased temperature, changes in rainfall and, consequently, a reduction in lake depth. In order to investigate the effects of these changes on fish, two studies were conducted: the first was reviewing the literature to address the effects of nitrogen compounds (nitrite, nitrate and ammonia) and how the physicochemical parameters influence their toxicity, and the second was a case study using Hoplias malabaricus liver in a lake impacted by the accumulation of nitrogenous compounds. The effects of nitrogen compounds can be influenced by physicochemical parameters, and may have synergistic, antagonistic or protective effects. High salinities showed a protective effect on ammonia and nitrite toxicity, hypoxia and low pH were able to intensify the effects caused by ammonia and nitrate, with synergistic effects. The increase in temperature caused distinct effects among the nitrogen compounds, with synergistic effects when fish were simultaneously exposed to ammonia, and antagonistic effects when exposed to nitrite and nitrate. Hardness also influenced toxicity, and its effects are dependent on the species under study. In the second study, prolonged droughts have directly impacted aquatic fauna. The specimens of Hoplias malabaricus showed histological alterations and the occurrence of apoptosis that are associated with the detoxification process in the liver due to the accumulation of nitrogen compounds in the Carioca lagoon. The increase in the number and area of melanomacrophagic centers may be associated with fish exposure to pollutants such as ammonia and nitrite. Histological, histochemical, and immunohistochemical biomarkers proved to be bioindicators of environmental impact.

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  • Wanderson Duarte Penido
  • Avaliação do desempenho de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) alimentadas com dietas suplementadas com Lactobacillus plantarum, Bacillus subtilis e Candida infanticola

  • Orientador : DANIEL BONOTO GONCALVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CARLOS HENRIQUE DE FIGUEIREDO VASCONCELLOS
  • DANIEL BONOTO GONCALVES
  • JULIANA TEIXEIRA DE MAGALHAES
  • KLÉDNA CONSTÂNCIA PORTES REIS
  • Data: 25/08/2022

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  • A aquicultura é a atividade agropecuária que mais cresce no Brasil e no mundo, tendo os seus produtos como os mais saudáveis e os menos impactantes para o meio ambiente. O Brasil está entre os 15 maiores produtores de peixes do mundo e ocupa a quarta posição entre os maiores produtores de tilápia do mundo, e a estimativa é que em 20 anos chegue a ser o maior produtor mundial de peixes de cultivo, tendo a liderança da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). O país conta com a maior reserva de água doce do planeta, possui um clima favorável e muitas espécies adaptáveis, o que contribui para o grande crescimento da sua produção. Mesmo o peixe e os produtos da pesca sendo os menos impactantes para o meio ambiente, impactos ambientais podem ser causados se não for realizado um manejo correto no processo de criação. Efluentes com grande quantidade de matéria orgânica, nitrogênio e fósforo são gerados no processo, o que contribui para a eutrofização dos corpos d’água, com baixa disponibilidade de oxigênio dissolvido, resultando na redução ou alteração da biodiversidade. Esses fatores podem acarretar estresses na vida dos peixes, tornando-os susceptíveis à patógenos. Nesse contexto, esse trabalho tem como objetivo estudar a ação da levedura Candida infanticola e das bactérias Bacillus subtilis e Lactobacillus plantarum, sobre o desempenho da tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). Para tal, a ração dos alevinos de tilápia foi suplementada com L. plantarum, B. subtilis e C. infanticola e o efeito desta suplementação sobre a viabilidade e o desempenho dos peixes, digestibilidade da proteína bruta e matéria seca, aumento das microvilosidades intestinal dos peixes, bem como sobre a resistência à infecção de patógeno (in vitro) e a qualidade da água dos tanques. Dentre os tratamentos utilizados, houve efeito significativo do tratamento contendo B. subtilis na conversão alimentar. O tratamento com L. plantarum e também com o consórcio microbiano (B. subtilis, L. plantarum e C. infanticola) apresentou valores de conversão alimentar próximo ao resultado obtido da suplementação com B. subtilis. Não foram observados efeitos dos tratamentos com dietas suplementadas com L. plantarum, C. infanticola e Controle sobre o peso final e ganho de peso. Em relação ao consumo de ração, o tratamento com L. plantarum apresentou o menor consumo e o tratamento com o consórcio microbiano apresentou o maior consumo de ração, não diferindo da dieta controle e dos tratamentos com B. Subtilis e C. infanticola. O índice de sobrevivência em todos os tratamentos foi superior a 90%. Nas análises de digestibilidade não houve efeito significativo para os tratamentos quanto a digestibilidade da proteína bruta e digestibilidade da matéria seca. Houve um efeito significativo no aumento das microvilosidades para o tratamento com a bactéria do ácido lático L. plantarum e da bactéria B. subtilis, o que pode indicar um aumento da área de superfície, resultando em uma maior absorção de nutrientes disponíveis. Nas análises de antagonismo (in vitro), somente o B. subtilis apresentou formação de halos de inibição contra o patógeno da Aeromonas hydrophila. Não houve efeito dos tratamentos nos parâmetros de qualidade de água, mantendo-se o ideal durante todo o período experimental, sem causar estresse e ou prejuízos no desempenho dos peixes.


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  • Aquaculture is the fastest growing agricultural activity in Brazil and in the world, with its products being the healthiest and least impacting the environment. Brazil is among the 15 largest producers of fish in the world and occupies the fourth position among the largest producers of tilapia in the world, and it is estimated that in 20 years it will become the world's largest producer of farmed fish, with the leadership of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). The country has the largest reserve of fresh water on the planet, has a favorable climate and many adaptable species, which contributes to the great growth of its production. Even though fish and fishery products are the least impacting on the environment, environmental impacts can be caused if correct management is not carried out in the breeding process. Effluents with large amounts of organic matter, nitrogen and phosphorus are generated in the process, which contributes to the eutrophication of water bodies, with low availability of dissolved oxygen, resulting in the reduction or alteration of biodiversity. These factors can cause stress in the lives of fish, making them susceptible to pathogens. In this context, this work aims to study the action of Candida infanticola and Bacillus subtilis and Lactobacillus plantarum bacteria on the performance of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). For this, the diet of tilapia fingerlings was supplemented with L. plantarum, B. subtilis and C.infanticola and the effect of this supplementation on fish viability and performance, crude protein and dry matter digestibility, increase of fish intestinal microvilli, as well as on resistance to pathogen infection (in vitro) and pond water quality. Among the treatments used, there was a significant effect of the treatment containing B. subtilis on feed conversion. The treatment with L. plantarum and also with the microbial consortium (B. subtilis, L. plantarum and C. infanticola) presented feed conversion values close to the result obtained from supplementation with B. subtilis. There were no effects of treatments with diets supplemented with L. plantarum, C. infanticola and Control on final weight and weight gain. Regarding feed intake, the treatment with L. plantarum had the lowest consumption and the treatment with the microbial consortium had the highest feed consumption, not differing from the control diet and treatments with B. Subtilis and C. infanticola. The survival rate in all treatments was greater than 90%. In the digestibility analysis, there was no significant effect for the treatments regarding crude protein digestibility and dry matter digestibility. There was a significant effect on the increase of microvilli for the treatment with the lactic acid bacterium L. plantarum and the bacterium B. subtilis, which may indicate an increase in surface area, resulting in greater absorption of available nutrients. In the antagonism analysis (in vitro), only B.subtilis showed formation of inhibition halos against the pathogen Aeromonas hydrophila. There was no effect of treatments on water quality parameters, maintaining the ideal throughout the experimental period, without causing stress or damage to fish performance.

     
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  • Luana Cristina Diniz Santos
  • Estudo fitoquímico e avaliação das atividades antioxidante e larvicida de sementes de Handroanthus impetiginosus (Mart. ex Dc.) Mattos (Bignoniaceae)

  • Orientador : ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • SIMONY CARVALHO MENDONÇA
  • PAULA AVELAR AMADO
  • Data: 26/08/2022

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  • Handroanthus impetiginosus (Mart. ex Dc.) Mattos (Bignoniaceae), conhecida popularmente como ipê roxo é uma espécie de floresta estacional que pode ser encontrada em alguns biomas brasileiros. Possui grande importância econômica, devido sua utilização em construções civis e navais, importância ecológica, na recuperação de ecossistemas florestais, e também importância medicinal, por seus compostos bioativos. Os objetivos desse trabalho foram obter ácidos graxos e ésteres metílicos de ácidos graxos a partir do extrato hexânico de sementes de H. impetiginosus e avaliar as atividades antioxidante e larvicida frente a Artemia salina e Culex quinquefasciatus do extrato hexânico (EH), dos ácidos graxos (AG) e dos ésteres metílicos de ácidos graxos (EMAG). O EH foi obtido por extração em aparelho de Sohxlet e triagem fitoquímica foi realizada. Os AG foram obtidos por hidrólise dos triglicerídeos presentes no extrato hexânico, por uma base forte, por 30 e 60 minutos e os EMAG foram produzidos por meio da reação de transesterificação dos ácidos graxos por catálise ácida. A composição dos ácidos graxos e dos ésteres metílicos de ácidos graxos foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas. A atividade antioxidante foi determinada pelo método de radicais 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e a atividade larvicida foi testada frente a Artemia salina e Culex quinquefasciatus. Os resultados demonstraram que o EH apresentou um rendimento de 20,47%, com a presença de alcaloides, de acordo com a triagem fitoquímica. Foram obtidos os ácidos graxos por meio de hidrólise por 30 (AG30) e 60 minutos (AG60) dos triglicerídeos presentes e ésteres metílicos de ácidos graxos (EMAG 30 e EMAG60), sendo que para os AG verificou-se um maior rendimento de AG30 (44,95%), enquanto que para os EMAG, maior rendimento foi verificado para EMAG60 (35,96%). No extrato hexânico foram identificados três AG (ácidos palmítico, linoleico e oleico), sendo ´ácido oleico o constituinte majoritário (10,08%) e cinco ésteres etílicos de ácidos graxos, sendo quatro deles majoritários, com predominância do oleato de etila (34,93%). A mistura de EMAG30 apresentou-se constituída por dez ésteres metílicos e EMAG60 apresentou uma mistura de oito ésteres metílicos, sendo os compostos majoritários em ambas as amostras representados pelo palmitato de metila, linoleato de metila, oleato de metila e esterato de metila, com predominância de oleato de metila (28,70% e 30,44%, respectivamente). As amostras de EH, AG30, AG60, EMAG30 e EMAG60 apresentaram atividade antioxidante inferior a 50%, em comparação com o padrão BHT, o qual apresentou inibição superior a 90% nas concentrações de 250 e 500 µg/mL e de 86% na concentração de 100 µg/mL (P < 0,0001). Nas concentrações de 1 a 10 µg/mL houve uma ligeira redução na atividade antioxidante das amostras, entretanto, estas atividades foram superiores àquela observada para o padrão BHT. As amostras AG30, AG60, EMAG30 e EMAG60 apresentaram toxicidade significativa frente a A. salina na concentração de 1000 µg/mL (P < 0,0001). AG60 foi a amostra que apresentou maior efeito tóxico frente a A. salina, promovendo 100% de mortalidade, em todas as concentrações testadas (125 a 1000 µg/mL) (P < 0,0001). Todas as amostras testadas provocaram uma elevada mortalidade de larvas C. quinquefasciatus, independente da concentração empregada (P < 0,0001).  Os dados encontrados até o momento encorajam a realização de novos testes para a confirmação dos resultados encontrados e também para a detecção de outras atividades biológicas.


  • Mostrar Abstract
  • Handroanthus impetiginosus (Mart. ex Dc.) Mattos (Bignoniaceae), popularly known as purple ipê is a seasonal forest species that can be found in some Brazilian biomes. It has great economic importance, due to its use in civil and naval constructions, ecological importance, in the recovery of forest ecosystems, and also medicinal importance, for its bioactive compounds. The objectives of this work were to obtain fatty acids and fatty acid methyl esters from the hexane extract of H. impetiginosus seeds and to evaluate the antioxidant and larvicidal activities against Artemia salina and Culex quinquefasciatus of the hexane extract (HE), of the fatty acids ( AG) and fatty acid methyl esters (FME). The HE was obtained by extraction in a Sohxlet apparatus and phytochemical screening was performed. The FA were obtained by hydrolysis of the triglycerides present in the hexane extract, by a strong base, for 30 and 60 minutes and the EMAG were produced through the transesterification reaction of fatty acids by acid catalysis. The composition of fatty acids and fatty acid methyl esters was determined by gas chromatography coupled to mass spectrometry. The antioxidant activity was determined by the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical method and the larvicidal activity was tested against Artemia salina and Culex quinquefasciatus. The results showed that the EH presented a yield of 20.47%, with the presence of alkaloids, according to the phytochemical screening. Fatty acids were obtained through hydrolysis for 30 (AG30) and 60 minutes (AG60) of the triglycerides present and methyl esters of fatty acids (EMAG 30 and EMAG60), and for the GA there was a higher yield of GA30 ( 44.95%), while for EMAG, higher yield was verified for EMAG60 (35.96%). In the hexane extract, three FAs (palmitic, linoleic and oleic acids) were identified, with oleic acid being the major constituent (10.08%) and five ethyl esters of fatty acids, four of which were the majority, with predominance of ethyl oleate (34 .93%). The EMAG30 mixture consisted of ten methyl esters and EMAG60 presented a mixture of eight methyl esters, with the major compounds in both samples represented by methyl palmitate, methyl linoleate, methyl oleate and methyl stearate, with predominance of methyl oleate (28.70% and 30.44%, respectively). The EH, AG30, AG60, EMAG30 and EMAG60 samples showed antioxidant activity below 50%, compared to the BHT standard, which showed inhibition above 90% at concentrations of 250 and 500 µg/mL and 86% at the concentration of 100 µg/ml (P < 0.0001). At concentrations from 1 to 10 µg/mL there was a slight reduction in the antioxidant activity of the samples, however, these activities were higher than that observed for the BHT standard. Samples AG30, AG60, EMAG30 and EMAG60 showed significant toxicity against A. salina at a concentration of 1000 µg/mL (P < 0.0001). AG60 was the sample that showed the greatest toxic effect against A. salina, promoting 100% mortality at all concentrations tested (125 to 1000 µg/mL) (P < 0.0001). All samples tested caused a high mortality of C. quinquefasciatus larvae, regardless of the concentration used (P < 0.0001). The data found so far encourage the performance of new tests to confirm the results found and also to detect other biological activities.

Teses
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  • DAMIANA ANTÔNIA DE FÁTIMA NUNES
  • Prospecção de atividade antiviral contra os arbovírus Zika e Mayaro em extratos e compostos isolados de Maytenus quadrangulata (Celastraceae)

  • Orientador : JOSE CARLOS DE MAGALHAES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JOSE CARLOS DE MAGALHAES
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • JAQUELINE MARIA SIQUEIRA FERREIRA
  • DANIELA LEITE FABRINO
  • GERALDO CÉLIO BRANDÃO
  • CINTIA LOPES DE BRITO MAGALHÃES
  • Data: 23/02/2022

  • Mostrar Resumo
  • Desde que foram descobertas, algumas arboviroses
    têm aumentado e, entre elas, destacam-se as causadas por Zika virus (ZIKV) e
    Mayaro virus (MAYV). Até o momento, não há fármacos antivirais ou vacinas
    contra esses vírus, estimulando a busca por antivirais, principalmente devido aos
    agravos dessas doenças que podem ser incapacitantes ao paciente. Moléculas
    oriundas de plantas se destacam nessa busca, entre elas, as originárias do
    gênero Maytenus, o qual apresenta compostos com atividades biológicas bem
    descritas, tornando as espécies do grupo candidatas à prospecção de antivirais.
    Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi prospectar antivirais contra MAYV e
    ZIKV em extratos e compostos derivados de folhas e galhos de Maytenus
    quadrangulata. Inicialmente, foi determinada a concentração citotóxica para 50%
    das células (CC50), utilizando diferentes extratos da planta. Os extratos de folhas,
    EHF e EAF, e de galhos, EAG, apresentaram baixa citotoxicidade, com CC50 de
    547, 953 e >1000 μg/mL, respectivamente. A partir dos resultados de
    citotoxicidade, foi avaliada concentração efetiva protetiva para 50% das células
    infectadas (CE50). A ação antiviral contra o ZIKV mostrou que a CE50 ocorreu nas
    concentrações de 25, 11 e 56μg/mL, respectivamente. Para o MAYV, os extratos
    EAF e EAG foram eficazes, com CE50 de 12 e 101μg/mL, respectivamente. Os
    valores dos índices de seletividade (IS) para esses extratos se mostraram acima
    de 4, conforme recomenda a literatura. Na busca pela caracterização dos
    compostos bioativos presentes na planta, ensaios foram feitos com compostos
    isolados do extrato EHF. Apesar da promissora ação no extrato, nenhum dos
    seus isolados apresentou atividade, indicando possível ação de outras classes
    de compostos ou perda de atividade no processo de isolamento. Os extratos
    EAF e EAG, que também apresentaram ação antiviral, foram caracterizados
    fitoquimicamente, e mostraram predominantemente catequinas em sua
    composição, com uma maior seletividade antiviral para o EAF. Assim, para esse
    extrato, a ação antiviral foi confirmada por diferentes ensaios, sendo mostrada,
    em ordem, i) redução do efeito citopático viral (ECP) por avaliação em
    microscopia óptica, ii) redução na carga viral relativa, analisada por reação em
    cadeia da polimerase quantitativa (RT-qPCR) e iii) drástica redução na produção
    de vírus por ensaio de redução de placas. Na caracterização de possíveis
    mecanismos de ação antiviral, demonstramos que as etapas de adsorção e
    penetração viral para ambos os vírus não são afetadas, sendo caracterizado um
    marcante efeito sobre a partícula viral (Efeito virucida). Esta ação também foi
    verificada quando o tratamento foi adicionado em diferentes momentos após a
    infecção. Os dados apresentados neste trabalho mostram que os extratos de
    Maytenus quadrangulata são eficientes na inibição de ZIKV e MAYV,
    possivelmente por ação de catequinas, as quais, quando se ligam a elementos
    virais, e não celulares, são capazes de inativar eficientemente os vírus. Este
    estudo é o primeiro a pesquisar o efeito antiviral e os mecanismos exercidos por
    extratos de Maytenus quadrangulata sobre os vírus Zika e Mayaro.


  • Mostrar Abstract
  • Recently, the rate of appearance of some arboviruses has increased. Among them, there are cases referring to the Zika virus (ZIKV) and the Mayaro virus (MAYV) that started to have an increasing number of notifications. So far, there are no antiviral drugs or vaccines against these viruses, stimulating the search for antivirals, mainly due to the aggravations of these diseases that can be disabling to the patient. Molecules from plants stand out in this search, among them, those originating from the genus Maytenus, which presents compounds with well-described biological activities, making the species of the group candidates for prospecting for antivirals. The objective of this work was to prospect antivirals against the Mayaro and Zika viruses in extracts and compounds derived from leaves and branches of Maytenus quadrangulata. Initially, the cytotoxic concentration was determined for 50% of the cells (CC50), using different extracts from the plant. Then, the effective protective concentration for 50% of the infected cells (EC50) and the selectivity index (IS) were obtained. The EHF, EAF and EAG extracts showed low cytotoxicity, with CC50 of 547, 953,> 1000 ug / mL, respectively. As for the antiviral action against ZIKV, the EC50 occurred at concentrations of 25, 11 and 56 μg / mL, respectively. For MAYV, only EAF and EAG were effective, with EC50 of 12 and 101 μg / mL, respectively. The IS values were above 4, as recommended in the literature. In search of the principles of action, tests were performed with compounds isolated from the EHF extract. Despite the promising action of the extract, none of its isolates showed activity separately, indicating a possible synergistic action, which will be confirmed. The EAF and EAG extracts, which also showed antiviral action, were characterized by phytochemistry, and showed predominantly catechins in their composition, with greater antiviral selectivity for EAF. For this extract, the antiviral action was confirmed by other assays, showing a marked reduction in the viral cytopathic effect (ECP), reduction in the formation of viral plaques and inhibition of virus production in the culture supernatant, even when high viral load was used in infection. Finally, the characterization of possible mechanisms of action was initiated, with a virucidal effect for both viruses, not affecting the adsorption and penetration stages. Our data, taken together, show that M. quadrangulata extracts are effective in inhibiting ZIKV and MAYV, possibly due to the action of catechins, which, by binding to viral and non-cellular elements, are able to inactivate viruses even in high load. This study is the first to examine the antiviral effect and the mechanisms exerted by M. quadrangulata extracts on ZIKV and MAYV.

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  • NAYARA LIZANDRA LEAL
  • DESENVOLVIMENTO DE UM PROCESSO DE BIORREMEDIAÇÃO PARA SORO DE RICOTA

  • Orientador : DANIEL BONOTO GONCALVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DANIEL BONOTO GONCALVES
  • ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • JULIANA TEIXEIRA DE MAGALHAES
  • LETICIA FERNANDES DE OLIVEIRA
  • ALINE DIAS PAIVA
  • LEANDRO DA CONCEIÇÃO LUIZ
  • Data: 24/02/2022

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  • O soro resultante da produção de ricota é um co-produto da indústria láctea que possui alto potencial poluidor, pois a carga de matéria orgânica é muito alta e há excesso de nutrientes como lactose, potássio, gorduras e proteínas, e uma alta demanda química de oxigênio (DQO). A biorremediação vem sendo amplamente indicada para o tratamento de resíduos de origem láctea e essa tecnologia faz uso de microrganismos ou de suas enzimas para converter o ambiente poluído em sua condição original (resumo limitado devido à necessidade de sigilo para proteção da propriedade intelectual).


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  • The ricotta serum is a co-product of the dairy industry has a high polluting potential, as theorganic matter load is very high and there is an excess of nutrients such as lactose, potassium, fats, and proteins, and a high chemical oxygen demand (COD) Bioremediation has been widely indicated for the treatment of dairy residues and this technology makes use of microorganisms or their enzymes to convert the polluted environment into its original condition. (Limited ABSTRACT due to the need for secrecy to protect intellectual property).

     
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  • DIEGO CARLOS ANDRADE PEREIRA
  • AVALIAÇÃO DE SINAIS CLÍNICOS E QUANTIFICAÇÃO DE CARGA PARASITÁRIA EM CÃES NATURALMENTE INFECTADOS POR Leishmania infantum ATRAVÉS DO DESENVOLVIMENTO DE PCR EM TEMPO REAL (qPCR) E PCR DIGITAL (dPCR)

  • Orientador : EDUARDO SERGIO DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • EDUARDO SERGIO DA SILVA
  • RAFAEL GONCALVES TEIXEIRA NETO
  • VINICIUS SILVA BELO
  • ANTÔNIO AUGUSTO FONSECA JÚNIOR
  • EDUARDO DE CASTRO FERREIRA
  • GRASIELE DE SOUSA VIEIRA TAVARES
  • Data: 29/08/2022

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  • As Leishmanioses são enfermidades zoonóticas, com grande distribuição mundial sendo endêmica em vários países do mundo. Estão entre as seis doenças endêmicas consideradas prioritárias segundo a Organização Mundial de Saúde. A estimativa é que a incidência anual seja de cerca de 2 milhões de casos, destes aproximadamente 1,5 milhões causados por formas tegumentares da doença e 500 mil relacionados a forma visceral (WHO 2015). Nas Américas, o agente causador da forma visceral, são os protozoários da espécie Leishmania (Leishmania) infantum e a transmissão ao hospedeiro ou reservatório vertebrado, ocorre através da picada de dípteros da espécie Lutzomyia longipalpis (OPAS 2015). Descrita inicialmente como uma doença de âmbito rural, a LV vem apresentando uma mudança no perfil epidemiológico. O aumento dos casos em grandes cidades do país, demonstram a urbanização da Leishmaniose Visceral. Em Minas Gerais esta urbanização já foi demonstrada em cidades como Belo Horizonte, Montes Claros e Governador Valadares. Neste contexto, entre outros fatores, o cão aparece como um dos responsáveis por essa urbanização, uma vez que este animal é considerado o principal reservatório doméstico da LV (Silva et al., 2001; MS 2006) sendo assim, o principal elo da transmissão de Leishmania (L.) infantum aos seres humanos. A relação epidemiológica da infecção de cães e humanos por Leishmania infantum gera uma necessidade de estudo constante da relação entre o parasita e o hospedeiro canino, inclusive com o desenvolvimento de métodos e testes que permitam detectar e também quantificar a carga parasitária. Uma das características importantes desta doença é a forma assintomática em alguns cães. Estes animais representam um grande problema para a saúde pública, uma vez que, a ausência de sinais clínicos dificulta a identificação da doença e impossibilita a adoção de medidas eficazes no controle da LV (MACHADO 2007). Devido à dificuldade do diagnóstico clínico da doença em cães assintomáticos, é importante que testes laboratoriais sejam empregados na identificação de animais infectados com LVC. Atualmente, os métodos mais conhecidos e utilizados na identificação de cães doentes são os diagnósticos clínicos, parasitológicos, sorológicos e moleculares (Dotta SCN, LOT RFE & Zappa V, 2009). Atualmente o Ministério da Saúde recomenda o uso do teste TR DPP® em inquéritos sorológicos para a triagem de cães e o material biológico dos animais reagentes ao TR DPP® é submetido ao teste ELISA para confirmar a

    infecção por LVC. Além dos testes laboratoriais utilizados para diagnóstico ou estudo na evolução da doença em cães, as técnicas moleculares passaram a fazer parte do aparato de diagnóstico da LV. Tanto a PCR convencional (cPCR) quando a PCR em tempo real (qPCR) podem ser utilizadas no diagnóstico. A qPCR tem a vantagem da sensibilidade, velocidade e diminuição da possibilidade de contaminação, no entanto com um custo ainda mais elevado. A PCR digital é outra ferramenta útil para diagnóstico e pesquisa de L. infantum. A diferença das outras metodologias é a partição da amostra de modo que a amplificação ocorra separadamente de modo que, dentro de um tubo ou chip, o material genético seja amplificado a partir de moléculas únicas. A Leishmaniose Visceral é uma doença em franca expansão, sendo considerada a forma mais grave entre os tipos desta doença especialmente em casos humanos não tratados, pois pode alcançar altas taxas de mortalidade. Portanto é cada vez mais necessário o estudo de técnicas que possam auxiliar no diagnóstico e entendimento desta doença, em especial em seus reservatórios domésticos. A compreensão da carga parasitária e sua relação com os sinais clínicos apresentados por cães naturalmente infectados por LVC pode ajudar no desenvolvimento de pesquisas e tratamentos para cães de modo a reduzir a transmissão da doença. Nesse estudo trinta e nove amostras clínicas de baço de cães foram coletadas após necropsia de animais confirmados como positivos. Todas as amostras foram analisadas através dos testes sorológicos (DPP® e ELISA), parasitológico e PCR convencional para determinar a espécie de leishmania. Duas ferramentas moleculares foram utilizadas para quantificação da carga parasitária de Leishmania infatum em cães neste experimento a qPCR e a ddPCR. As ferramentas desenvolvidas neste trabalho são importantes para a pesquisa de L. infantum em seres humanos ou em cães. Estudos sobre o curso da enfermidade continuam sendo importantes para elucidar os mecanismos de interação entre hospedeiro e parasita, assim como avaliar o funcionamento de tratamentos e vacinas. A PCR digital, por não necessitar de curva padrão e por ter fácil padronização, é uma nova ferramenta que pode gerar informações ainda mais aprofundadas no amplo debate sobre as cargas parasitárias e a patogenia da leishmaniose.


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  • GABRIELA FRANCINE MARTINS LOPES
  •   "Prospecção de atividade anti-estafilocócica e anti-Mayaro de alcalóides 3-alquilpiridínicos sintéticos e do extrato hidroetanólico e partições de folhas de Fridericia chica (Bonpl.) L. G. Lohmann"

  • Orientador : JAQUELINE MARIA SIQUEIRA FERREIRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JAQUELINE MARIA SIQUEIRA FERREIRA
  • JOSE CARLOS DE MAGALHAES
  • LUCIANA LARA DOS SANTOS
  • ADRIANA CRISTINA SOARES DE SOUZA
  • CINTIA LOPES DE BRITO MAGALHÃES
  • ARIANE COELHO FERRAZ
  • Data: 09/11/2022

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  • O Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) e o Mayaro virus (MAYV) são patógenos infecciosos responsáveis por epidemias que representam um  risco para a saúde pública mundial. Por isto, é necessário o desenvolvimento de novos medicamentos para o tratamento das doenças que causam. No presente estudo foi avaliada a atividade anti-estafilocócica e anti-MAYV in vitro de cinco derivados sintéticos de alcaloides 3-alquilpiridínicos e do extrato hidroetanólico (HEFc) e partições de folhas de Fridericia chica. O alcaloide 3-alquilpiridínico identificado como composto 6 mostrou promissora atividade antibacteriana com concentração inibitória mínima (CIM) de 1,95 μg/mL e concentração bactericida mínima (CBM) de 15,6 μg/mL para MRSA USA 300. Os resultados dos experimentos de permeabilidade de membrana com DAPI/IP e com cristal violeta pôde associar a atividade antibacteriana do composto 6 com a sua capacidade de causar danos à membrana interna e induzir lise celular. Este resultado foi reforçado pelas alterações morfológicas observadas na superfície das bactérias por microscopia eletrônica de varredura. Ainda, o composto 6 mostrou um baixo potencial de indução de resistência e efeito aditivo quando combinado com vancomicina, ofloxacina e ciprofloxacina. A atividade anti-estafilocócica do composto 6 foi estável na presença de diferentes concentrações de NaCl, tripsina e sob uma variedade de valores de pH, também foi capaz de reduzir a formação de biofilme bacteriano e reduzir a biomassa de biofilmes maduros, mas apresentou baixa seletividade para MRSA USA 300 quando comparado com células eucarióticas (epiteliais e glóbulos vermelhos). Entretanto, os extratos não apresentaram atividade anti-estafilocócica e os alcaloides não apresentaram atividade anti-MAYV. O HEFc demonstrou potente atividade antiviral nas três multiplicidades de infecção testadas (moi 0,1; 1,0 e 5,0) com CE50 e CI50 de 9,0 μg/mL para a moi de 1,0, com redução dos efeitos citopáticos. O HEFc foi capaz de inibir o MAYV nas fases iniciais e tardias do ciclo de multiplicação viral (25 μg/mL - moi 5,0) e mostrou uma atividade virucida significativa (p <0,0001) em baixas concentrações (0,78 - 25,0 μg/mL), mas não impediu a infecção quando as células foram pré-tratadas ou afetou as fases de adsorção e internalização viral (25 μg/mL - moi 1,0). Além disso, HEFc reduziu os virions do sobrenadante em todos os tempos pós-infecção investigados (25 μg/mL - moi 1,0). Assim, pode ser concluído que o composto 6 possui promissora atividade anti-estafilocócica associada a lise bacteriana assim como o HEFc é um promissor candidato a antiviral com propriedade virucida.


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  • LUISA FERREIRA DA CRUZ
  • Prospecção de bactérias láticas de diferentes origens e avaliação do potencial probiótico

  • Orientador : PAULO AFONSO GRANJEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • ANDRE LUIS MORAIS RUELA
  • DANIEL BONOTO GONCALVES
  • JULIANA TEIXEIRA DE MAGALHAES
  • MAIRA DE CASTRO LIMA
  • PAULO AFONSO GRANJEIRO
  • Data: 02/12/2022

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  • Bactérias probióticas são conhecidas pela capacidade em trazer benefícios ao hospedeiro, como a manutenção do sistema imune, inibição do crescimento de microrganismos patogênicos e manutenção do bem-estar emocional, e por isso, há um crescente interesse em novas bactérias láticas com potencial probiótico. O objetivo deste estudo foi rastrear bactérias láticas probióticas de diversas origens e avaliar o potencial probiótico. Os testes probióticos in vitro incluíram sobrevivência sob baixo pH e sais biliares, hidrofobicidade da superfície celular, autoagregação, coagregação, atividade antibacteriana, e propriedades de segurança foram avaliadas com base no perfil de resistência a antibióticos. Foram isoladas 46 bactérias com características de bactérias láticas, sendo 32 isolados discriminados como geneticamente diferentes através da técnica de RAPD, sendo estas isoladas das fontes, quefir (n=9), queijo (n=4) kombucha (n=2), silagem (n=3) e fezes de recém-nascidos (n=14). A maioria das cepas foram resistentes à acidez gástrica simulada e aos sais biliares. Alta hidrofobicidade foi observada para quatro cepas. Autoagregação variou de 9,31- 62,24% e a capacidade de coagregação demonstrou uma ampla gama de variação nos fenótipos coagregativos. Além disso, as cepas também apresentaram níveis variados de resistência aos antibióticos de importância clínica. A comparação entre as fontes demonstrou que bactérias láticas isoladas de diversas fontes podem possuir propriedades probióticas. No geral, a avaliação das propriedades probióticas de um grande conjunto de bactérias láticas isoladas foi fundamental para analisar as características fenotípicas dos isolados e verificar que independente da fonte de isolamento uma cepa pode ser considerada probiótica. Concluímos que a cepas analisadas de diferentes fontes apresentou potencial probiótico com potencial aplicação em setores industriais, sendo as mais promissoras as cepas K8, QV1, SL4, FE2 e FPc4


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  • Probiotic bacteria are known for their ability to bring benefits to the host, such as maintaining the immune system, inhibiting the growth of pathogenic microorganisms and maintaining emotional well-being, and therefore, there is a growing interest in new lactic acid bacteria with probiotic potential. The aim of this study was to screen probiotic lactic acid bacteria from different sources and evaluate the probiotic potential. In vitro probiotic tests included survival under low pH and bile salts, cell surface hydrophobicity, autoaggregation, coaggregation, antibacterial activity, and safety properties were evaluated based on the antibiotic resistance profile. Forty-six bacteria with characteristics of lactic acid bacteria were isolated, 32 of which were discriminated as genetically different through the RAPD technique, which were isolated from the sources, kefir (n=9), cheese (n=4), kombucha (n=2), silage (n=3) and newborn feces (n=14). Most strains were resistant to simulated gastric acidity and bile salts. High hydrophobicity was observed for four strains. Autoaggregation ranged from 9.31-62.24% and the ability to coaggregate demonstrated a wide range of variation in coaggregative phenotypes. In addition, the strains also showed varying levels of resistance to clinically important antibiotics. Comparison between sources demonstrated that lactic acid bacteria isolated from different sources may have probiotic properties. In general, the evaluation of the probiotic properties of a large set of isolated lactic acid bacteria was essential to analyze the phenotypic characteristics of the isolates and verify that, regardless of the source of isolation, a strain can be considered probiotic. We conclude that the strains analyzed from different sources showed probiotic potential with potential application in industrial sectors, with the most promising strains being K8, QV1, SL4, FE2 and FPc4

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  • DIEGO FERNANDES LIVIO
  • OTIMIZAÇÃO DO BIOPROCESSO DE PRODUÇÃO DE BIOSSURFACTANTES E AVALIAÇÃO DE SUA APLICABILIDADE NA INDÚSTRIA DE COSMÉTICOS

  • Orientador : PAULO AFONSO GRANJEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • ALCIDES DE OLIVEIRA WANDERLEY NETO
  • FARAH MARIA DRUMOND CHEQUER BALDONI
  • MARCEL OTAVIO CERRI
  • PAULO AFONSO GRANJEIRO
  • Data: 30/12/2022

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  • A iturina A, um biossurfactante lipopeptídico, possui propriedades físico-químicas eficientes para cosméticos naturais por ser ecologicamente correta, ter alta compatibilidade com a pele, ter baixa concentração micelar crítica (CMC), alta formação de espuma e atividade emulsificante. Entretanto, de modo geral, a produção em larga escala de biossurfactantes continua limitada devido seu baixo rendimento, elevado custo do meio de cultivo e purificação. O objetivo deste trabalho foi validar a otimização da produção do biossurfactante lipopeptídico e caracterizá-lo para fins comerciais com foco no desenvolvimento de novos produtos cosméticos. O meio de cultivo previamente otimizado pelo grupo de pesquisa apresentou como teor de nitrogênio 0,019 µg.µL-1, oriundo do teor proteico presente no extrato de farinha de soja. A curva de crescimento do Bacillus subtilis (ATCC 19659) foi relacionada com a produção do lipopeptídeo devido a diminuição da tensão superficial até o final da fase exponencial (55 horas de cultivo), acima de 1x1010 UFC.mL-1. Foram validados os constituintes do meio de cultivo e suas concentrações pelo delineamento do composto central rotacional (DCCR) em relação à tensão superficial (TS) relacionada ao lipopeptídeo gerado, sendo, em g.L-1, 20 de açúcar, 1 de L-arginina e 50 de farinha de soja (extrato). O lipopeptídeo foi purificado utilizando um modelo de utilidade por fracionamento de espuma (em processo de patente). Fontes alternativas de nitrogênio derivadas da soja como farelo, farinha e proteína foram avaliadas em relação ao rendimento do lipopeptídeo produzido, em massa seca, sendo, respectivamente, em g.L-1, 0,28; 1,43 e 0,34. O lipopeptídeo foi caracterizado molecularmente como sendo a iturina A. A iturina A foi considerada pouco solúvel em água deionizada; insolúvel em etanol, óleo de canola, óleo de milho e propilenoglicol; muito pouco solúvel em glicerol e óleo mineral. No teste de colapso da gota, a iturina A (1 mg.mL-1) apresentou atividade tensoativa, em média, 22% a mais de dilatação em relação ao controle (água deionizada). A concentração micelar crítica (CMC) da iturina A foi de 0,176 mg.mL-1, capaz de reduzir a TS da água deionizada  de 73,1 ± 0,1 mN.m-1 (controle) para 34,5 ± 0,05 mN.m-1, a 25 ºC e a 1 mg.mL-1 para 33 ± 0,3 mN.m-1. A iturina A apresentou pI em pH 3. A iturina A apresentou o terceiro melhor desempenho tensoativo (35,6 ± 0,94 mN.m-1) em relação às TS de alguns tensoativos comerciais e permaneceu relativamente estável em uma ampla faixa de pH (2 a 11); temperatura (-20 ºC a 100 ºC); concentração salina (2,5 a 20 %); após autoclavagem e secagem em estufa (50 ºC). Em comparação com alguns emulsificantes comerciais, a iturina A apresentou o melhor índice de emulsificação (IE24) em óleo de cadeia longa (85%) e foi a mais estável em emulsões com diferentes óleos cosméticos, ao longo das 72h avaliadas. A iturina A apresentou a melhor estabilidade de espuma em comparação com agentes tensoativos comerciais; foi atóxica ambientalmente em todas as concentrações avaliadas; apresentou um EHL de 6, sendo capaz de estabilizar formulações cosméticas. No aumento de escala da produção, o rendimento de iturina A proveniente do cultivo em Erlenmeys de 2 L passou de 3,8 ± 0,3 g.L-1 semi-purificada (centrifugação e precipitação ácida), tendo uma TS de 37 ± 0,2  mN.m-1, para 16 ± 0,5 g.L-1 em biorreator contendo 3 L úteis de meio de cutivo, tendo uma TS de 37 ± 0,2  mN.m-1. Após a purificação por fracionamento de espuma e liofilização, o rendimento de iturina A purificada foi de 8 ± 0,4 g.L-1 tendo uma TS de 31,8 ± 0,1  mN.m-1. Assim, concluímos a efetividade da otimização do bioprocesso de produção da iturina A, com grande potencial de sua aplicação na indústria de cosméticos.


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  • Iturin A, a lipopeptide biosurfactant, has efficient physicochemical properties for natural cosmetics because it is ecologically correct, has high compatibility with the skin, has a low critical micellar concentration (CMC), high foaming and emulsifying activity. However, in general, the large-scale production of biosurfactants remains limited due to their low yield, high cost of the culture medium and purification. The objective of this work was to validate the optimization of the production of the lipopeptide biosurfactant and characterize it for commercial purposes with a focus on the development of new cosmetic products. The culture medium previously optimized by the research group showed a nitrogen content of 0.019 µg.µL-1, derived from the protein content present in the soy flour extract. The Bacillus subtilis growth curve (ATCC 19659) was related to lipopeptide production due to the decrease in surface tension until the end of the exponential phase (55 hours of cultivation), above 1x1010 CFU.mL-1. The constituents of the culture medium and their concentrations were validated by delineating the central rotational compound (DCCR) in relation to the surface tension (TS) related to the generated lipopeptide, being, in g.L-1, 20 of sugar, 1 of L-arginine and 50 soy flour (extract). The lipopeptide was purified using a foam fractionation utility model (in patent process). Alternative sources of nitrogen derived from soybeans such as bran, flour and protein were evaluated in relation to the yield of the lipopeptide produced, in dry mass, being, respectively, in g.L-1, 0.28; 1.43 and 0.34. The lipopeptide was characterized molecularly as iturin A. Iturin A was considered poorly soluble in deionized water; insoluble in ethanol, canola oil, corn oil and propylene glycol; very little soluble in glycerol and mineral oil. In the drop collapse test, iturin A (1 mg.mL-1) showed surfactant activity, on average, 22% more dilation compared to the control (deionized water). The critical micellar concentration (CMC) of iturin A was 0.176 mg.mL-1, capable of reducing the TS of deionized water from 73.1 ± 0.1 mN.m-1 (control) to 34.5 ± 0, 05 mN.m-1, at 25 ºC and 1 mg.mL-1 for 33 ± 0.3 mN.m-1. Iturin A showed pI at pH 3. Iturin A showed the third best surfactant performance (35.6 ± 0.94 mN.m-1) in relation to the TS of some commercial surfactants and remained relatively stable over a wide pH range (2 to 11); temperature (-20°C to 100°C); saline concentration (2.5 to 20%); after autoclaving and oven drying (50 ºC). Compared to some commercial emulsifiers, iturin A had the best emulsification index (IE24) in long-chain oil (85%) and was the most stable in emulsions with different cosmetic oils, over the 72h evaluated. Iturin A showed the best foam stability compared to commercial surfactants; it was environmentally non-toxic at all concentrations evaluated; presented an EHL of 6, being able to stabilize cosmetic formulations. In the scale-up of production, the yield of iturin A from cultivation in 2 L Erlenmeys went from 3.8 ± 0.3 g.L-1 semi-purified (centrifugation and acid precipitation), having a TS of 37 ± 0. 2 mN.m-1, to 16 ± 0.5 g.L-1 in a bioreactor containing 3 useful L of culture medium, having a TS of 37 ± 0.2 mN.m-1. After purification by foam fractionation and lyophilization, the yield of purified iturin A was 8 ± 0.4 g.L-1 having a TS of 31.8 ± 0.1 mN.m-1. Thus, we concluded the effectiveness of the optimization of the iturin A production bioprocess, with great potential for its application in the cosmetics industry.

2021
Dissertações
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  • NATHALIA HIRATSUKA CAMILO
  • MICRO-ORGANISMOS EFICIENTES NO CULTIVO DE PLANTAS MEDICINAIS: AVALIAÇÃO QUALITATIVA E QUANTITATIVA DE SEUS METABÓLITOS SECUNDÁRIOS

  • Orientador : JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MELISSA GRAZIELLE MORAIS
  • NATHÁLIA LUCCA SILVA
  • Data: 19/05/2021

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  • O uso de plantas medicinais faz parte da terapia popular contribuindo para a consolidação de um conjunto de habilidades internalizadas nos usuários e praticantes. Porém, com a grande oferta de medicamentos industrializados, aquela prática diminuiu nos últimos anos. Além da obtenção das plantas medicinais estar vinculada ao extrativismo, as técnicas de cultivo são escassas, o que reduz a padronização e garantia de qualidade final.  Neste contexto, com vistas ao aumento de produtividade e obtenção de produtos mais saudáveis, os biofertilizantes surgem como alternativa aos químicos. Os Micro-organismos Eficientes (ME), utilizados como biofertilizantes, consistem de associações de culturas de micro-organismos benéficos, encontrados naturalmente nos solos e que podem incrementar a biodiversidade microbiana. Alguns estudos têm demonstrado que a inoculação de culturas de ME promove a melhoria na qualidade dos solos, especialmente na síntese de metabólitos e desenvolvimento do vegetal em geral. Assim, os objetivos deste trabalho foram de avaliar o efeito da aplicação de biofertilizante à base de ME sobre aspectos gerais do desenvolvimento de três plantas medicinais (Thymus vulgaris, Phyllanthus niruri e Mentha piperita), avaliar os metabólitos secundários produzidos, identificar as espécies bacterianas presentes no biofertilizante e determinar a concentração daqueles micro-organismos nas amostras de solo. O biofertilizante apresentou em sua composição bactérias fotossintetizantes e produtoras de ácido lático, destacadamente Lactobacillus plantarum e Rhodobacter sp. Por meio da análise química dos solos, as amostras com o biofertilizante apresentaram teores de P, Ca, Mg, Zn, Fe e Mn maiores que nos solos controle. Além disso, os solos tratados indicaram maior contagem bacteriana e as plantas neles cultivados apresentaram dimensões mais pronunciadas em suas partes gerais. No entanto, o biofertilizante contendo ME não provocou efeitos positivos nos resultados qualitativos dos metabólitos secundários indicando ainda efeitos negativos nos resultados quantitativos relacionados àqueles metabólitos.


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  • The use of medicinal plants is part of popular therapy, contributing to the consolidation of a set of internalized skills in users and practitioners. However, with the large supply of industrialized medicines, that practice has decreased in recent years. In addition to obtaining medicinal plants being linked to extractivism, cultivation techniques are scarce, which reduces standardization and guarantees final quality. In this context, with a view to increasing productivity and obtaining healthier products, biofertilizers appear as an alternative to chemicals. Efficient Micro-organisms (ME), used as biofertilizers, consist of associations of beneficial micro-organism cultures, found naturally in soils and that can increase microbial biodiversity. Some studies have shown that inoculation of ME crops promotes an improvement in soil quality, especially in the synthesis of metabolites and plant development in general. In this context, the objective of this work was to evaluate the effect of the application of biofertilizer based on ME on general aspects of the development of three medicinal plants (Thymus vulgaris, Phyllanthus niruri and Mentha piperita), to evaluate the secondary metabolites produced, to identify the bacterial species present in the biofertilizer and determine the bacterial concentration in the soil samples. The biofertilizer presented in its composition photosynthetic bacteria and lactic acid producers, especially Lactobacillus plantarum and Rhodobacter sp. Through the chemical analysis of the soils, the samples with the biofertilizer presented higher levels of P, Ca, Mg, Zn, Fe and Mn than in the control soils. In addition, the treated soils indicated a higher bacterial count and the plants cultivated in them presented more pronounced dimensions in their general parts. However, the biofertilizer containing ME did not cause positive effects on the qualitative results of the secondary metabolites, still indicating negative effects on the quantitative results related to those metabolites.

2
  • JAIRO BATISTA NETTO


  • AVALIAÇÃO DO POTENCIAL ANTINEOPLÁSICO DA COMBINAÇÃO DE MATEUCINOL E TEMOZOLAMIDA EM LINHAGENS DE GLIOBLASTOMAS

  • Orientador : ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • HELIO BATISTA DOS SANTOS
  • ANA GABRIELA SILVA OLIVEIRA
  • Data: 27/05/2021

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  • Tumores malignos do cérebro são uma ocorrência rara, representando aproximadamente 2% de todos os cânceres em adultos. Apesar da baixa frequência, estes tumores apresentam elevada taxa de mortalidade. As neoplasias primárias mais comuns do Sistema Nervoso Central (SNC) são as de origem glial, dessas, o glioblastoma (GBM) é o mais prevalente, sendo também o de maior agressividade. Suas características histopatológicas o apresentam como um processo neoplásico grau IV, derivado dos astrócitos, com altos índices de proliferação microvascular, necrose tumoral, invasão tecidual, porém com restrita capacidade de promover metástases fora do SNC. A taxa de mortalidade permanece significativa, apesar dos grandes avanços em biologia molecular, imunologia e quimioterapia. Produtos derivados de plantas têm oferecido, historicamente, compostos para o desenvolvimento de novos e efetivos agentes quimioterápicos. Diante desse imensurável desafio, este trabalho teve como objetivo avaliar o potencial terapêutico da combinação entre o composto Matteucinol (Matt), derivado da espécie Miconia chamissois Naudin, associado ao quimioterápico padrão ouro para o tratamento do GBM, o temozolamida (TMZ). Demonstrou-se que a combinação Matteucinol/temozolamida (Mat-TMZ) apresentou seletividade, com ação citotóxica para a linhagem celular de GBM U251, poupando as células de astrócitos NHA. Assim como observado por Zimograma, Mat-TMZ diminuiu a atividade da metaloproteinase 2. Associado a isso, verificamos que o tratamento não atuou sobre a adesão das células U251 à matriz. Estudo específico com laranja de acridina e iodeto de propídio sugeriu que um dos mecanismos de morte implicado no tratamento das células U251 com a combinação (Mat-TMZ) é a apoptose, uma vez que se observou a formação de microbolhas, indicando fragmentações nucleares. Além disso, a avalição antitumoral e anti-angiogênica, in vivo, pelo ensaio da membrana coriolantóide de galinha (CAM) foi realizada e indica que o composto apresenta-se como uma possível opção de tratamento para o GBM


  • Mostrar Abstract
  • Malignant brain tumors are a rare occurrence, accounting for approximately 2% of all cancers in adults. Despite the low frequency, these tumors have a high mortality rate. The most common primary neoplasms of the Central Nervous System (CNS) are those of glial origin, of these, glioblastoma (GBM) is the most prevalent, being also the most aggressive. Its histopathological characteristics present it as a grade IV neoplastic process, derived from astrocytes, with high rates of microvascular proliferation, tumor necrosis, tissue invasion, but with a limited capacity to promote metastases outside the CNS. The mortality rate remains significant, despite major advances in molecular biology, immunology and chemotherapy. Plant-derived products have historically offered compounds for the development of new and effective chemotherapeutic agents. In view of this immeasurable challenge, this study aimed to evaluate the therapeutic potential of the combination of the compound Matteucinol (Matt), derived from the species Miconia chamissois Naudin, associated with the gold standard chemotherapy for the treatment of GBM, temozolamide (TMZ). It was demonstrated that the Matteucinol / temozolamide (Mat-TMZ) combination showed selectivity, with cytotoxic action for the GBM U251 cell line, sparing NHA astrocyte cells. As observed by Zimograma, Mat-TMZ decreased the activity of metalloproteinase 2. Associated with this, we found that the treatment did not act on the adhesion of U251 cells to the matrix. A specific study with acridine orange and propidium iodide suggested that one of the mechanisms of death involved in the treatment of U251 cells with the combination (Mat-TMZ) is apoptosis, since the formation of microbubbles was observed, indicating nuclear fragmentation. In addition, the antitumor and anti-angiogenic evaluation, in vivo, by the chicken choriolantoid membrane (CAM) assay was performed and indicates that the compound presents itself as a possible treatment option for GBM

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  • VIVIANA RODRIGUES CARDOSO
  • INDUÇÃO DE CALOS E PRODUÇÃO in vitro DE COMPOSTOS FENÓLICOS EM Bauhinia variegata L. (FABACEAE) 

  • Orientador : ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MAIRON CESAR COIMBRA
  • SUZAN KELLY VILELA BERTOLUCCI
  • Data: 01/07/2021

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  • Espécies do gênero Bauhinia são utilizadas em diversas partes do mundo para tratamento de diversas doenças. A espécie Bauhinia variegata L., conhecida como “pata-de-vaca”, é uma espécie lenhosa de Cerrado, cujas folhas são utilizadas na medicina tradicional para o tratamento de infecções e diabetes. Estudos fitoquímicos indicam a presença flavona; teaflavina; catequina; antraquinona; flavona; flavanona; flavonol nos calos de B. variegata A cultura de tecidos de plantas e, mais especificamente, a cultura de calos é uma ferramenta biotecnológica que possibilita a obtenção de substâncias bioativas de interesse in vitro, por meio da otimização das culturas. Este trabalho teve como objetivos estabelecer um protocolo efetivo para indução de calos em segmentos foliares de Bauhinia variegata e avaliar as substâncias de natureza fenólica presentes nos calos dessa espécie. Para a calogênese, explantes foliares provenientes de plântulas cultivadas in vitro foram inoculados em meio MS suplementado com 30 g L-1 de sacarose, solidificados com 7 g L-1 de ágar e acrescidos de 2,4-D (0; 4,52; 9,05; 18,10 μM) e BAP (0; 4,44; 8,88;17,75 μM) e suas possíveis combinações, na presença e ausência de luz. Após 45 dias da inoculação, avaliou-se a porcentagem de indução de calos, matéria fresca e seca e os teores de fenóis e flavonoides totais, empregando-se metodologias usuais. Calos induzidos em meios acrescidos de 4,52 µM 2,4-D + 4,44 µM BAP T7 (calos compactos), na ausência de luz. A curva de crescimento foi estabelecida a partir de calos na presença de luz. Para o estudo fitoquímico, obteve-se o extrato hidroetanólico bruto (EHEB), por percolação, que foi submetido à partição líquido-líquido  de etila e butanol. O isolamento e identificação de substâncias presentes na fração acetato de etila foram realizados a partir das técnicas de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a detectores DAD e espectrômetro. Os resultados demonstraram que calos induzidos em meios suplementados com 4,52 µM 2,4-D + 4,44 µM BAP, na presença de luz apresentaram boa porcentagem de indução, consideráveis valores de matéria fresca e seca e principalmente, os maiores teores compostos fenólicos.

     


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  • Species of the genus Bauhinia are used in different parts of the world to treat various diseases. The species Bauhinia variegata L., known as “pata-de-vaca”, is a woody species of Cerrado, whose leaves are used in traditional medicine to treat infections and diabetes. Phytochemical studies indicate the presence of flavone; teaflavine; catechin; anthraquinone; flavone; flavanone; flavonol in the calluses of B. variegata The culture of plant tissues and, more specifically, the culture of calluses is a biotechnological tool that makes it possible to obtain bioactive substances of interest in vitro, through the optimization of cultures. The objective of this work was to establish an effective protocol for callus induction in leaf segments of Bauhinia variegata and to evaluate the phenolic substances present in the calluses of this species. For callogenesis, leaf explants from seedlings grown in vitro were inoculated in MS medium supplemented with 30 g L-1 of sucrose, solidified with 7 g L-1 of agar and added with 2,4-D (0; 4,52 ; 9.05; 18.10 μM) and BAP (0.4.44; 8.88; 17.75 μM) and their possible combinations, in the presence and absence of light. After 45 days of inoculation, the percentage of callus induction, fresh and dry matter and the contents of total phenols and flavonoids were evaluated, using usual methodologies. Calluses induced in media with 4.52 µM 2,4-D + 4.44 µM BAP T7 (compact calluses), in the absence of light. The growth curve was established from calluses in the presence of light. For the phytochemical study, the crude hydroethanolic extract (EHEB) was obtained by percolation, which was subjected to the liquid-liquid partition of ethyl and butanol. The isolation and identification of substances present in the ethyl acetate fraction were performed using the techniques of High Performance Liquid Chromatography coupled to DAD detectors and spectrometer. The results showed that calluses induced in medium supplemented with 4.52 µM 2.4-D + 4.44 µM BAP, in the presence of light, presented a good percentage of induction, considerable values of fresh and dry matter and, mainly, the highest compound contents phenolic.

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  • ANDRÉ VINICIUS FERNANDES FERREIRA
  • Desenho racional de alvos antigênicos para obtenção de antígenos que possam ser empregados em testes de 
    imunodiagnóstico de tripanossomíase bovina

  • Orientador : ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • FLORA SATIKO KANO
  • MARCIO SOBREIRA SILVA ARAUJO
  • SORAYA DOS SANTOS PEREIRA
  • Data: 30/07/2021

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  • A tripanossomíase bovina é uma doença causada por protozoários Trypanosoma spp., dentre eles, a espécie Trypanosoma vivax (T. vivax). Essa doença possui relevância econômica no setor pecuário devido ao seu impacto negativo na bovino cultura. Diante das dificuldades encontradas para um diagnóstico correto e precoce, o imunodiagnóstico apresenta-se como vantagem frente aos demais métodos devido à confiabilidade, facilidade de automação e implementação em campo. Dessa forma, o objetivo desse trabalho é a busca de novos alvos antigênicos do T. vivax, utilizando ferramentas de bioinformática para serem empregados em testes de imunodiagnósticos para a tripanossomíase bovina. Para isso, foi feito um levantamento das principais proteínas antigênicas do T. vivax em artigos e patentes. Em seguida, foi realizada a análise in sílico das proteínas, utilizando programas de bioinformática para selecionar epítopos com potencial antigênico. Posteriormente, foi feita a construção racional de uma proteína (rTV1) e um peptídeo sintético (TV1P). Através de uma parceria com a FIOCRUZ- MG, duas proteínas também candidatas ao diagnóstico da doença (M1 e M2) foram selecionadas para serem produzidas através de expressão heteróloga, para posteriormente serem utilizadas em ensaios biológicos. As proteínas TV1, M1 e M2 foram utilizadas na expressão heteróloga utilizando células de Escherichia coli BL21 (λDE3) pLysS e pLysE utilizando diferentes protocolos de expressão. Dentre os protocolos utilizados a expressão foi bem-sucedida apenas com a proteína rTV1, que foi purificada e utilizada em um imunoensaio preliminar do tipo ELISA para verificar sua reatividade frente a soros infectados por T. vivax. O ensaio sugere que a rTV1 possui capacidade de discriminar entre animais saudáveis e infectados. O peptídeo TV1P foi sintetizado por síntese química e foi utilizado em ensaios de ELISA para avaliar sua reatividade frente a soros infectados por T. vivax. O peptídeo sintético não apresentou capacidade de imunodeteção, mesmo sendo avaliado em diversas condições. Esses dados preliminares mostram a viabilidade de aprofundar as pesquisas sobre a proteína rTV1, visto que a mesma apresenta potencial para ser empregada em Kits de diagnóstico. Para o peptídeo TV1P são necessários maiores estudos objetivando avaliar o potencial do mesmo para diagnóstico do T. vivax.


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  • Bovine trypanosomiasis is a disease caused by protozoa Trypanosoma spp., Among them, the species Trypanosoma vivax (T. vivax). This disease has economic relevance in the livestock sector due to its negative impact on beef cattle. In view of the difficulties encountered for a correct and early diagnosis, immunodiagnosis presents itself as an advantage over other methods due to reliability, ease of automation and implementation in the field. Thus, the objective of this work is to search for new T. vivax antigenic targets, using bioinformatics tools to be used in immunodiagnostic tests for bovine trypanosomiasis. For this, a survey of the main antigenic proteins of T. vivax was carried out in articles and patents. Then, the in silico analysis of the proteins was performed, using bioinformatics programs to select epitopes with antigenic potential. Subsequently, the rational construction of a protein (rTV1) and a synthetic peptide (TV1P) was  performed. Through a partnership with FIOCRUZ-MG, two proteins also candidates for the diagnosis of the disease (M1 and M2) were selected to be produced through heterologous expression, to later be used in biological assays. Proteins TV1, M1 and M2 were used in heterologous expression using Escherichia coli BL21 (λDE3) pLysS and pLysE cells using different expression protocols. Among the protocols used, the expression was successful only with the rTV1 protein, which was purified and used in a preliminary ELISA immunoassay to verify its reactivity towards T. vivax infected sera. The trial suggests that rTV1 has the ability to discriminate between healthy and infected animals. The TV1P peptide was synthesized by chemical synthesis and was used in ELISA assays to evaluate its reactivity towards sera infected with T. vivax. The synthetic peptide was not capable of immunodetection, even though it was evaluated under several conditions. These preliminary data show the feasibility of further research on the rTV1 protein, since it has the potential to be used in diagnostic kits. For the TV1P peptide, further studies are needed in order to evaluate its potential for the diagnosis of T. vivax.

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  • SARA THAMIRES DIAS DA FONSECA
  • AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTIOXIDANTE E ANTIMICROBIANA DE EXTRATOS E FRAÇÕES DE Bauhinia holophylla (FABACEAE:CERCIDEAE)

  • Orientador : ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DIOGO TEIXEIRA CARVALHO
  • ANA GABRIELA REIS SOLANO
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • JAQUELINE MARIA SIQUEIRA FERREIRA
  • Data: 19/08/2021

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  • As plantas medicinais têm substâncias bioativas responsáveis por atividades biológicas como antifúngica, antibiofilme, antibacteriana e antioxidante. Leveduras do gênero Candida, principalmente Candida albicans, correspondem a principal causa de infecções fúngicas em humanos e a maioria das infecções são decorrentes da formação de biofilmes resistentes. A resistência bacteriana tem aumentado rapidamente e já existem bactérias resistentes a todos antibióticos. Plantas do gênero Bauhinia são ricas em compostos fenólicos e flavonoides, os quais têm sido associados a atividade antimicrobiana. Os objetivos deste estudo são avaliar as atividades antimicrobiana, antibiofilme e antioxidante de extratos e frações de folhas de Bauhinia holophylla e identificar os possíveis compostos ou grupos de compostos relacionados a essa atividade. Folhas de B. holophylla foram coletadas em 2014 e 2018 e extratos foram preparados com etanol 70º GL e etanol 95º GL, respectivamente. Os extratos foram fracionados por partição, com solventes de polaridades crescentes. Foram determinados os teores de fenóis e flavonoides totais empregando-se metodologias usuais e a atividade antioxidante dos extratos e frações pelo método de inibição do DPPH.  Para os ensaios antimicrobianos determinou-se Concentração Inibitória Mínima (CIM) dos extratos e frações contra C. albicans, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus epidermidis e Acinetobacter baumannii nas concentrações de 0,24 a 125 µg mL-1. As mesmas concentrações foram usadas para o ensaio antibiofilme de C. albicans. Os resultados demonstraram que os extratos e frações testados não apresentaram atividade antifúngica ou antibacteriana. Os extratos brutos e as frações diclorometânica e acetoetílica apresentaram maiores teores de fenóis e flavonoides totais, assim como maiores atividades antioxidante. As frações diclorometânica e acetoetílica provenientes do fracionamento do extrato hidroetanólico apresentaram as maiores atividades antibiofilme. A diferença no ano de coleta e dos solventes usados na extração influenciou o perfil fitoquímico dos extratos.


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  • Medicinal plants have bioactive substances responsible for biological activities such as antifungal, antibiofilm, antibacterial and antioxidant. Yeasts of the genus Candida, mainly Candida albicans, correspond to the main cause of fungal infections in humans and most infections are due to the formation of resistant biofilms. Bacterial resistance has increased rapidly and bacteria are already resistant to all antibiotics. Plants of the genus Bauhinia are rich in phenolic compounds and flavonoids, which have been associated with antimicrobial activity. The objectives of this study are to evaluate the antimicrobial, antibiofilm and antioxidant activities of extracts and fractions of leaves of Bauhinia holophylla and to identify possible compounds or groups of compounds related to this activity. B. holophylla leaves were collected in 2014 and 2018 and extracts were prepared with 70º GL ethanol and 95º GL ethanol, respectively. The extracts were fractionated by partition, with solvents of increasing polarity. The contents of phenols and total flavonoids were determined using usual methodologies and the antioxidant activity of extracts and fractions by the DPPH inhibition method. For the antimicrobial tests, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of the extracts and fractions against C. albicans, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus epidermidis and Acinetobacter baumannii were determined at concentrations from 0.24 to 125 µg mL-1. The same concentrations were used for the C. albicans antibiofilm assay. The results showed that the tested extracts and fractions did not show antifungal or antibacterial activity. The crude extracts and the dichloromethane and acetoethyl fractions showed higher levels of total phenols and flavonoids, as well as higher antioxidant activities. The dichloromethane and acetoethyl fractions from the fractionation of the hydroethanolic extract showed the greatest antibiofilm activities. The difference in the year of collection and the solvents used in the extraction influenced the phytochemical profile of the extracts.

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  • KEIZA PRISCILA ENES DOS SANTOS
  • ABAMECTINA PROMOVE ALTERAÇÕES COMPORTAMENTAIS E DANOS HEPÁTICOS EM PEIXE-ZEBRA

  • Orientador : RALPH GRUPPI THOME
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CAMILA FERREIRA SALES
  • HELIO BATISTA DOS SANTOS
  • RAFAEL CESAR RUSSO CHAGAS
  • RALPH GRUPPI THOME
  • Data: 30/09/2021

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  • O uso indiscriminado de agrotóxicos é uma preocupação mundial devido à contaminação do meio ambiente e a possibilidade de causar efeitos deletérios em organismos não-alvo, como os peixes. Para analisar os efeitos da abamectina, da família das avermectinas, peixes-zebra adultos (Danio rerio) foram expostos a uma fórmula comercial comumente usada no Brasil. Os animais foram submetidos a uma exposição aguda (96 h) e crônica de curta duração (15 dias) a distintas concentrações de abamectina. Determinou-se a CL50 e realizou-se estudo histológico seguido de análise imunohistoquímica para identificação da P-gp e HSP70 em fígados de animais submetidos ao tratamento agudo e crônico, respectivamente. Além disso, os padrões de comportamento foram observados diariamente em ambas as tentativas. Foi determinado um valor de LC50 de 105,68 μg/L. A análise histológica revelou alteração morfológica dos hepatócitos, acúmulo de glicogênio, degeneração e desorganização do citoplasma, além de núcleos picnóticos, irregulares e localizados lateralmente. A imunohistoquímica para HSP70 e P-gp mostrou forte coloração nos hepatócitos dos grupos controle e diminuição progressiva com o aumento da concentração de abamectina. Foram observadas alterações na postura corporal, movimentação no aquário, atividade opercular, coloração corporal e busca por alimento nos grupos tratados com abamectina. Os resultados apresentados sugerem que a abamectina pode afetar o padrão comportamental dos animais, promover alterações morfológicas e diminuir a expressão de HSP70 e P-gp no fígado do peixe-zebra.


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  • The indiscriminate use of pesticides is a worldwide concern due the environment contamination since it can cause deleterious effects to non-target organisms including the fishes. To analyze the effects of abamectin, a pesticide of the avermectin family, adult zebrafish (Danio rerio) were exposed to a commercial formula commonly used in Brazil. The animals were submitted to an acute (96 h) and to a short-term chronic exposure (15 days) of distinct concentrations of abamectin. The LC50 was determined and a histological study followed by an immunohistochemistry analysis for P-gp and HSP70 identification were performed on livers of the animals submitted to the acute and chronic treatment, respectively. Moreover, behavior patterns were observed daily in both trials. A LC50 value of 105.68 mg/L was determined. The histological analysis revealed a morphological alteration of the hepatocytes, glycogen accumulation, degeneration, and disorganization of the cytoplasm, and a pyknotic, irregular, and laterally located nuclei. The immunohistochemistry for HSP70 and P-gp showed strong staining in the hepatocytes of the control groups and progressive decrease as the concentration of abamectin increased. Changes were observed in body posture, movement around the aquarium, opercular activity, body color and search for food in the groups treated with abamectin. The results presented suggest that abamectin can affect the behavioral pattern of the animals, promote morphological changes, and decrease the expression of HSP70 and P-gp in zebrafish liver.

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  • LEILIANE CAMPOS DE CARVALHO
  • DESENVOLVIMENTO DE MARCADORES MICROSSATÉLITES MULTIESPECÍFICOS PARA PEIXES DE PIRACEMA: UMA PROVA DE CONCEITO

     

  • Orientador : GABRIEL DE MENEZES YAZBECK
  • MEMBROS DA BANCA :
  • RALPH GRUPPI THOME
  • GABRIEL DE MENEZES YAZBECK
  • DANIEL CARDOSO DE CARVALHO
  • Data: 16/12/2021

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  • Peixes de piracema possuem importância comercial e constituem elementos fundamentais dos ecossistemas aquáticos Neotropicais. As espécies Salminus brasiliensis, Prochilodus lineatus, Brycon orbignyanus e Megaleporinus obtusidens são alvo de piscicultura para repovoamento, em resposta a impactos ambientais oriundos da geração hidrelétrica. Os marcadores de DNA microssatélites são aplicados como ferramentas biotecnológicas na conservação e produção devido ao seu caráter polimórfico e por sua conspicuidade nos diferentes genomas. Marcadores microssatélites, no entanto, são de caráter fortemente espécie-específicos, sendo sua transferência heteróloga (amplificação cruzada) geralmente limitada a poucas espécies próximas, necessitando de desenvolvimento de novo para organismos de interesse. Este projeto, portanto, tem como objetivo a demonstração de um conceito biotecnológico para o desenvolvimento de marcadores moleculares de DNA microssatélite multiespecíficos, que possam ser aplicados simultaneamente em uma ampla faixa filogenética de diferentes espécies de peixe de piracema, S. brasiliensis, B. orbignyanus, P. lineatus e M. obtusidens. Estas espécies são muitas vezes utilizadas em conjunto em programas de mitigação de impactos ambientais, na bacia do rio Grande, MG. Isso se torna possível com a aplicação de dados oriundos de sequenciamento de nova geração (NGS) de múltiplos genomas das espécie-alvo, que acelera a descoberta de novos loci microssatélites e permite a comparação direta destas regiões entre espécies distintas. Foram selecionados arbitrariamente cinco loci microssatélites compartilhados entre P. lineatus e M. obtusidens para os testes empíricos, a partir de um painel mais amplo de 977 loci microssatélites caracterizados por NGS. A avaliação de variabilidade genética foi aferida sobre uma amostra populacional de 20 indivíduos de cada espécie-alvo, oriundas de pisciculturas da bacia do rio Grande (Itutinga e Volta Grande). Dois marcadores microssatélites multiespecíficos, denominados Poli1 e Poli2 obtiveram amplificação em todas as espécies-alvo. Os demais apresentaram pelo menos uma amplificação para cada espécie-alvo. O locus Poli1 está em equilíbrio de Hardy-Weinberg em S. brasiliensis e o locus Poli2 está em equilíbrio de Hardy-Weinberg em S. brasiliensis, B. orbignyanus e P. lineatus. No locus Poli1, a amostra de B. orbignyanus exibiu caráter monomórfico. Foram também conduzidas análises bioinformáticas de outros potenciais novos marcadores multiespecíficos. Os resultados aqui discutidos demonstram a viabilidade de desenvolvimento de marcadores multiespecíficos, para uma gama de espécies diferentes, úteis no gerenciamento da produção e conservação de recursos pesqueiros.


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  • na

Teses
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  • THAIS PAIVA PORTO DE SOUZA
  • Expressão da fitase de Aspergillus nidulans em células de Komagataella phaffii (Pichia pastoris) e análise de sua estabilidade em diferentes pHs por dinâmica molecular.

  • Orientador : ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • LUCIANA DE PAULA NAVES
  • MARINA QUADRIO RAPOSO BRANCO RODRIGUES
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • MICHEL RODRIGO ZAMBRANO PASSARINI
  • SABRINA DE AZEVEDO SILVEIRA
  • Data: 09/04/2021

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  • O fitato ou ácido fítico (Inositol hexafosfato: C6H18O24P6 – IP6) está presente nas plantas, especialmente em cereais como soja, milho, trigo, aveia e leguminosas. Atualmente, o fitato é considerado um fator antinutricional por se ligar a metais e minerais, como ferro, zinco, cobre e principalmente o fósforo, reduzindo sua absorção durante a digestão em animais monogástricos ou mesmo em humanos. As fitases são enzimas capazes de degradar o ácido fítico e possuem um amplo espectro de aplicação em indústrias, como na suplementação de ração animal com intuito de se melhorar a digestibilidade através da liberação de nutrientes como o fósforo, presente na forma de fitato. Este trabalho diz respeito à construção de uma linhagem da levedura Komagataella phaffii (Pichia pastoris) como sistema de expressão para produção da enzima fitase. Para tanto, um screening de fitases com características biotecnológicas relevantes visando um desenho racional da proposta foi realizado. Fitases de fungos filamentosos se mostram atualmente promissoras, por possuírem propriedades bioquímicas desejáveis para aplicação na indústria animal, como termoestabilidade e estabilidade em diferentes perfis de pH. Diante disso, a fitase de Aspergillus nidulans foi escolhida para produção e a linhagem K. phaffii GS115 foi usada como sistema para expressão. Foram realizadas análises bioinformáticas (análises in silico) da sequência gênica para otimização das sequências obtidas no GenBank. O plasmídeo pPICZα-B contendo a ORF da fitase foi sintetizado e clonado in vitro com códons otimizados para expressão em K. paffi. A partir disso o plasmídeo foi amplificado em cepas de Escherichia coli, posteriormente extraído por preparação em média escala e detectado através de PCR. O vetor foi linearizado com a enzima de restrição Sac I e clonado em K. phaffii GS115. A expressão foi realizada com 0,5% de metanol em diferentes tempos de indução, de modo que as bandas proteicas foram analisadas através de gel de poliacrilamida SDS-PAGE. Os fenótipos dos clones obtidos foram determinados quanto ao metabolismo de metanol. Além disso, foi possível selecionar o clone com maior atividade enzimática frente à hidrólise do fitato de sódio. Também foram realizados estudos de dinâmica molecular e metadinâmica para verificação da estabilidade enzimática em diferentes faixas de potencial hidrogeniônico (pH), em relação à presença e ausência de glicosilação proteica


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  • Phytate or phytic acid (Inositol hexaphosphate: C6H18O24P6 - IP6) is present in plants, especially in cereals such as soybeans, corn, wheat, oats and legumes. Currently, phytate is considered an anti-nutritional factor because it binds to metals and minerals, such as iron, zinc, copper and mainly phosphorus, reducing its absorption during digestion in monogastric animals or even in humans. Phytases are enzymes capable of degrading phytic acid and have a wide range of applications in industries, such as animal feed supplementation in order to improve digestibility through the release of nutrients such as phosphorus, present in the form of phytate. This work concerns the construction of a lineage of the yeast Komagataella phaffii (Pichia pastoris) as an expression system for the production of the phytase enzyme. Therefore, a screening of phytases with relevant biotechnological characteristics aiming at a rational design of the proposal was carried out. Filamentous fungi phytases are currently promising, as they have desirable biochemical properties for application in the animal industry, such as thermostability and stability in different pH profiles. Therefore, the phytase of Aspergillus nidulans was chosen for production and the K. phaffii GS115 strain was used as a system for expression. Bioinformatic analyzes (in silico analyzes) of the gene sequence were performed to optimize the sequences obtained from GenBank. The plasmid pPICZα-B containing the phytase ORF was synthesized and cloned in vitro with codons optimized for expression in K. paffi. From this, the plasmid was amplified in Escherichia coli strains, later extracted by medium scale preparation and detected by PCR. The vector was linearized with the restriction enzyme Sac I and cloned into K. phaffii GS115. The expression was carried out with 0.5% methanol at different induction times, so that the protein bands were analyzed using SDS-PAGE polyacrylamide gel. The phenotypes of the obtained clones were determined for methanol metabolism. In addition, it was possible to select the clone with the highest enzyme activity against the hydrolysis of sodium phytate. Molecular and metadinamic dynamics studies were also carried out to check the enzymatic stability in different ranges of hydrogen potential (pH), in relation to the presence and absence of protein glycosylation.

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  • ALESSANDRA MORAES PEDROSA
  • PRODUÇÃO DE CANABINOIDES A PARTIR DE CULTIVO IN VITRO DE Cannabis sativa L.

  • Orientador : JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • HELIO BATISTA DOS SANTOS
  • FULVIO RIELE MENDES
  • JOÃO PAULO VIANA LEITE
  • MAIRON CESAR COIMBRA
  • Data: 07/05/2021

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  • Cannabis sativa L., popularmente conhecida como maconha, tem sido usada por milhares de anos no tratamento de diversas doenças, com destaque para neurológicas. Seus efeitos são associados à presença de metabólicos secundários denominados canabinoides, sendo os principais: o canabidiol (CBD) e o tetrahidrocanabinol (THC). A demanda crescente desses compostos é evidente, principalmente, do CBD para o tratamento da ansiedade. No entanto, o cultivo de C. sativa e a produção de medicamentos contendo CBD ainda são estritamente regulamentados em muitos países. Diante disso, este trabalho tem como objetivo utilizar técnicas de cultivo in vitro de C. sativa para produção de CBD e analisar seu efeito ansiolítico em peixes-zebra. As sementes utilizadas foram obtidas de material apreendido pela Polícia Civil de Minas Gerais (Divinópolis) para o estabelecimento das plântulas. A indução de calos e sua manutenção em diferentes meios nutritivos foram utilizadas para a produção de CBD. Foram analisados os aspectos macro e micro morfológicos e histológicos dos calos, além dos extratos para detecção e quantificação de CBD. E por fim, os calos produzidos com maior teor de CBD foram utilizados como tratamento de peixes-zebra, no teste do tanque novo, para analisar seu efeito ansiolítico. Por meio do presente trabalho foi possível estabelecer in vitro plântulas da espécie C. sativa, mesmo com baixa taxa de germinação e alta de contaminação por fungos. Também foi possível observar que explantes com origem distintas responderam de forma diferente a um mesmo regulador de crescimento. A indução de calos ocorreu de forma satisfatória, com alguns tratamentos ocasionando a produção CBD, e, possivelmente, de THC e canabinol (CBN). O efeito ansiolítico dos calos foi comprovado mediante o aumento da atividade exploratória e locomotora dos peixes-zebra após o tratamento. Diante disso, foi possível concluir que o cultivo in vitro pode ser uma alternativa a ser utilizada para produzir canabinoides naturais, principalmente o CBD. Ademais, os calos ricos em CBD produzidos neste estudo podem se tornar um meio de produção de novos fármacos para o tratamento de ansiedade.


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  • Cannabis is a genus of plants with ancient uses. Known as "marijuana", it produces cannabinoids with different biological activities, the main ones being; cannabidiol (CBD) and tetrahydrocannabinol (THC). The growing demand for these compounds to treat some diseases is evident. However, the cultivation of Cannabis sativa and the production of drugs based on cannabinoids is still strictly regulated or even banned in many countries. Therefore, it was possible to conclude that in vitro cultivation can be an alternative to be used to produce natural cannabinoids, mainly CBD. In addition, the CBD-rich calluses produced in this study can become a means of producing new drugs for the treatment of anxiety.

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  • GILBERTO DE SOUZA
  • AVALIAÇÃO DOS NÍVEIS DE TOXICIDADE DE MOLÉCULAS INÉDITAS DERIVADAS DE CHALCONAS HIBRIDAS PARA A
    MELHORIA DO TRATAMENTO DAS LEISHMANIOSES

  • Orientador : EDUARDO SERGIO DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • EDUARDO SERGIO DA SILVA
  • JOSE AUGUSTO FERREIRA PEREZ VILLAR
  • MIGUEL ÁNGEL CHÁVEZ FUMAGALLI
  • PATRICIA FLAVIA QUARESMA
  • Data: 29/07/2021

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  • As leishmanioses são zoonoses que podem afetar pele, membranas mucosas ou vísceras, atingindo seres humanos e/ou cães. São causadas por protozoários flagelados da família Trypanosomatidae, do gênero Leishmania, existindo mais de 20 espécies no mundo inteiro e são transmitidas por insetos flebotomíneos, do gênero Lutzomya. As Chalconas são substâncias químicas precursoras da biossíntese de flavonoides, encontradas abundantemente em plantas. Além da ação antiparasitária, possuem atividades anti-inflamatórias, antitumorais, analgésicas, antivirais e antimicrobianas. Este estudo teve como objetivo avaliar a atividade antileishmania de Chalconas híbridas sintéticas nas formas promastigotas e amastigotas de Leishmania (Leishmania) amazonensis, além de avaliar a citotoxicidade dos compostos em modelos murinos. Para tanto foram realizadas culturas in vitro das cepas utilizando-se os meios Liver infusion Triptose (LIT) e Roswell Park Memorial Institute (RPMI), suplementados com soro fetal bovino e streptomicina, sendo posteriormente testados os candidatos a fármacos através do ensaio colorimétrico de MTT. Nos modelos animais (camundongos) foram realizados também testes de citotoxicidade utilizando-se células obtidas de encéfalo, fígado e baço. Os resultados parciais mostraram que os dois compostos testados apresentaram IC50 compatível com o fármaco controle, além de apresentarem baixa toxicidade.


  • Mostrar Abstract
  • Leishmaniasis are zoonoses that can affect skin, mucous membranes or viscera, affecting humans and / or dogs. They are caused by flagellated protozoa of the Trypanosomatidae family, of the genus Leishmania, with more than 20 species worldwide and are transmitted by sand flies, of the genus Lutzomya. Chalcones are precursor chemicals for the biosynthesis of flavonoids, found abundantly in plants. In addition to their antiparasitic action, they have anti-inflammatory, anti-tumor, analgesic, antiviral and antimicrobial activities. This study aimed to evaluate the antileishmania activity of synthetic hybrid chalcones in the promastigote and amastigote forms of Leishmania (Leishmania) amazonensis, in addition to evaluating the cytotoxicity of the compounds in murine models. For this purpose, in vitro cultures of the strains were performed using Liver Infusion Triptose (LIT) and Roswell Park Memorial Institute (RPMI), supplemented with fetal bovine serum and streptomycin, and drug candidates were subsequently tested using the MTT colorimetric assay. . In animal models (mice) cytotoxicity tests were also performed using cells obtained from the brain, liver and spleen. The partial results showed that the two compounds tested showed IC 50 compatible with the control drug, in addition to presenting low toxicity.

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  • SERGIO ARAUJO ANDRADE
  • NOVAS APLICAÇÕES DA FLUORESCÊNCIA ÓPTICA DE CAMPO AMPLO PARA DETECÇÃO E DIAGNÓSTICO DE PATOLOGIAS ORAIS COM DESENVOLVIMENTO E TRANSFERÊNCIA DE TECNOLOGIA DE UM DISPOSITIVO PARA MEDIÇÃO DE LESÕES ORAIS E DERMATOLÓGICAS SEGUNDO O SISTEMA DE CLASSIFICAÇÃO DE TUMORES MALIGNOS TUMOR NODES METASTASIS – TNM

  • Orientador : FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • AMANDA LUISA DA FONSECA
  • FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • HELIO BATISTA DOS SANTOS
  • RALPH GRUPPI THOME
  • SILMARA NUNES ANDRADE
  • Data: 02/09/2021

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  • As doenças orais acometem cerca de 90% da população mundial gerando relevante impacto socioeconômico. Neste sentido, a cárie dental e as doenças periodontais figuram entre as doenças mais prevalentes, ao passo que, o câncer oral, é relacionado como umas das patologias de maior morbimortalidade. Todavia, o exame clínico convencional, o qual, é considerado, padrão-ouro para rastreio de lesões orais, tem resultado em baixa taxa de detecção para o câncer oral devido à ausência de sinais em fases precoces ou à similaridade dos sinais com o de outras patologias orais benignas dificultando a detecção e diagnóstico diferencial. Assim, exames complementares como o uso da fluorescência óptica de campo amplo tem sido desenvolvidos para auxiliar o exame clínico na detecção e diagnóstico de patologias orais. Neste sentido, os objetivos deste estudo foram avaliar a aplicação do uso da fluorescência óptica de campo amplo além do contexto de desordens potencialmente malignas e câncer oral, incluindo a proservação periódica de pacientes com histórico de lesões orais, auxílio ao diagnóstico diferencial, visualização do biofilme oral, além de proceder o desenvolvimento e a transferência de tecnologia de um dispositivo de medição de lesões orais e dermatológicas. Para tanto, foram examinados pacientes sob livre demanda em um serviço público destinado ao diagnóstico oral, com aquisição de imagens sob luz visível e fluorescência óptica de campo amplo e, em casos suspeitos uma biópsia foi realizada. Assim, os resultados mostram o emprego da técnica como auxiliar no rastreio e diagnóstico de papiloma escamoso oral, língua pilosa, vitiligo mucoso, tatuagem por amálgama, câncer oral, mucosite peri-implantar, cárie dental e alterações referentes ao tecido duro dental e restaurações. Em adição, procedeu-se o desenvolvimento e transferência de tecnologia de um dispositivo de medição de lesões orais e dermatológicas. Portanto, conclui-se que o uso de fluorescência óptica de campo amplo possibilita uma gama de aplicações clínicas na rotina odontológica de forma rápida, segura, não-invasiva e indolor. Além disso, a prototipagem da inovação tecnológica resultante do estudo permitiu a sua transferência de tecnologia.


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  • Oral diseases affect about 90% of the world population, generating high socioeconomic impact. In this sense, dental caries and periodontal diseases are among the most prevalent diseases, whereas oral cancer is listed as one of the pathologies with the highest morbimortality. Thus, public health policies that aim to reduce the economic impact of health expenditures, through less invasive treatments that contribute to low morbimortality, need to include screening measures and early diagnosis of oral pathologies. However, the conventional clinical examination, which is considered the gold standard for screening oral lesions, has resulted in poor detection rates for oral cancer due to the absence of signs in early stages or the similarity of the signs with that of others benign oral pathologies hindering detection and differential diagnosis. Thus, literature and governmental health regulatory agencies have suggested the use of the widefield optical fluorescence examination as a complementary examination to the conventional clinical examination for screening lesions and determining surgical margins within the context of potentially malignant disorders and oral cancer. In this sense, objectives of this study were to evaluate the application of the use of widefield optical fluorescence beyond to the context of potentially malignant disorders, including the periodic follow-up of patients with a history of oral lesions in a clinical routine and in support to the differential diagnosis. To this end, patients were examined on demand in a public service for oral diagnosis, with acquisition of images under visible light and widefield optical fluorescence and, in suspected cases, a biopsy was performed. Thus, the results show the use of the technique as an aid in the screening and diagnosis of oral squamous papilloma, hairy tongue, mucosal vitiligo, amalgam tattoo, oral cancer and changes related to dental hard tissue and restorations. In this context, it is concluded that the complementary examination of widefield optical fluorescence allows a range of possibilities for clinical applications in the dental routine in a safe, fast and non-invasive way.

2020
Dissertações
1
  • FLÁVIA MEDEIROS MAIA
  • AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTITUMORAL DE COMPOSTOS SINTÉTICOS DERIVADOS DE LAPACHOL E LAUSONA SOBRE A LINHAGEM CELULAR DE CÂNCER DE MAMA MURINO (4T1)

  • Orientador : ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FABIO VIEIRA DOS SANTOS
  • RICARDO JOSÉ ALVES
  • ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • Data: 14/02/2020

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  • O câncer de mama se destaca por representar o tipo tumoral mais prevalente em todo o mundo. A metástase consiste na principal causa de morte de pacientes portadores deste tipo tumoral. Considerando os diversos efeitos colaterais causados pelos tratamentos atuais e a resistência aos agentes citotóxicos, torna-se necessário a busca por novas fontes de terapias antitumorais e antimetastáticas. Diante dos inúmeros estudos envolvendo a síntese de compostos derivados das naftoquinonas lapachol e lausona, com base em suas ações antitumorais comprovadas, este trabalho teve por objetivo a investigação do potencial antineoplásico de novos sintéticos derivados destas naftoquinonas sobre a linhagem de câncer de mama murino 4T1. Assim, a viabilidade celular foi avaliada no ensaio de MTT e, a partir desta triagem, os compostos APO-3, APO-4, APO-6 e APO-7 foram selecionados para os testes subsequentes. Também foram realizados os ensaios de migração por fechamento de ferida e zimograma utilizando sobrenadante celular onde APO-3, APO-4 inibiram a migração celular, e APO-4, APO-6 diminuíram a atividade de MMP-9 secretadas pelas células 4T1. Ademais, foi avaliada a ação destes compostos sobre esplenócitos murinos normais, onde todos se mostraram seletivos para células tumorais. Após, foi realizada a combinação do composto que se mostrou mais promissor (APO-3) com o quimioterápico paclitaxel (PTX). A combinação APO-3/PTX demonstrou maior ação citotóxica seletiva sobre as células 4T1 que PTX isoladamente; além disso, APO-3/PTX inibiu a migração celular e diminuiu a atividade das MMP-9 ativas no sobrenadante destas células, atuando de maneira semelhante a PTX quando avaliado isoladamente. Além destes testes, também foi avaliado o potencial tumorigênico de APO-3, APO3/PTX e PTX, através do ensaio clonogênico, onde APO-3/PTX apresentou uma redução do número de colônias formadas pelas células 4T1 mais efetiva que APO-3 e PTX, isoladamente. Também foi avaliada a ação dos compostos sobre a morte celular através do ensaio de morfologia por fluorescência e Western Blotting, onde o tratamento com APO-3 induziu o aumento da expressão de PARP total, Caspase-9 total e RIP1 e diminuiu a expressão de Caspase-3 clivada, além de provocar, nas células 4T1, alterações morfológicas características de apoptose e necroptose; já APO-3/PTX diminuiu a expressão de PARP total, Caspase-9 total e RIP1 e aumentou a expressão de Caspase-8 total e Caspase-3 clivada, e ainda induziu alterações morfológicas celulares características de apoptose, atuando de forma semelhante à PTX isoladamente. Dessa forma, os resultados sugerem que os compostos derivados de naftoquinonas, isoladamente ou em combinação, podem representar novos agentes terapêuticos com potencial atividade antitumoral e antimetastática.


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  • Breast cancer stands out for representing the most prevalent tumor type worldwide. Metastasis is the main cause of death in patients with this tumor type. Considering the various side effects caused by current treatments and resistance to cytotoxic agents, it is necessary to search for new sources of antitumor and antimetastatic therapies. In view of the numerous studies involving the synthesis of compounds derived from naphthoquinones lapachol and lawsone, based on their proven antitumor actions, this study aimed to investigate the antineoplastic potential of new synthetics derived from these naphthoquinones on the murine breast cancer 4T1 cells. Thus, cell viability was evaluated in the MTT assay and, from this screening, compounds APO-3, APO-4, APO-6 and APO-7 were selected for the subsequent tests. Wound closure migration and zymogram using cell supernatant assays were also performed where APO-3, APO-4 inhibited cell migration, and APO-4, APO-6 decreased the activity of MMP-9 secreted by 4T1 cells. In addition, the action of these compounds on normal murine splenocytes was evaluated, where all were selective for tumor cells. Afterwards, the combination of the most promising compound (APO-3) with the chemotherapy drug paclitaxel (PTX) was carried out. The APO-3/PTX combination demonstrated greater selective cytotoxic action on 4T1 cells than PTX alone; in addition, APO-3/PTX inhibited cell migration and decreased the activity of MMP9 active in the supernatant of these cells, acting in a similar way to PTX when evaluated alone. In addition to these tests, the tumorigenic potential of APO-3, APO-3/PTX and PTX was also assessed through the clonogenic assay, where APO-3/PTX showed a reduction in the number of colonies formed by 4T1 cells more effective than APO- 3 and PTX, in isolation. The action of compounds on cell death was also evaluated through the fluorescence morphology and western blotting assay, where treatment with APO-3 induced an increase in the expression of total PARP, total Caspase-9 and RIP1 and decreased expression of cleaved Caspase -3, in addition to causing, in 4T1 cells, morphological changes characteristic of apoptosis and necroptosis; already APO-3/PTX decreased the expression of total PARP, total Caspase-9 and RIP1 and increased the expression of total Caspase-8 and cleaved Caspase-3, and also induced cellular morphological changes characteristic of apoptosis, acting similarly to PTX in isolation. Thus, the results suggest that compounds derived from naphthoquinones, alone or in combination, may represent new therapeutic agents with potential antitumor and antimetastatic activity. 

2
  • JÚLIA ANTUNES TAVARES RIBEIRO
  • ESTUDO DE UM BIOPROCESSO PARA BIORREMEDIAÇÃO DE SORO DE RICOTA E PRODUÇÃO DE EXTRATO DE LEVEDURAS UTILIZANDO KLUYVEROMYCESL MARXIANUS

  • Orientador : DANIEL BONOTO GONCALVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DANIEL BONOTO GONCALVES
  • LETICIA FERNANDES DE OLIVEIRA
  • PILAR XIMENA LIZARAZO MEDINA
  • RAFAEL CESAR RUSSO CHAGAS
  • Data: 17/02/2020

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  • ESTUDO DE UM BIOPROCESSO PARA BIORREMEDIAÇÃO DE SORO DE RICOTA E PRODUÇÃO DE EXTRATO DE LEVEDURAS UTILIZANDO KLUYVEROMYCESL MARXIANUS


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  • ESTUDO DE UM BIOPROCESSO PARA BIORREMEDIAÇÃO DE SORO DE RICOTA E PRODUÇÃO DE EXTRATO DE LEVEDURAS UTILIZANDO KLUYVEROMYCESL MARXIANUS

3
  • FELIPE FERREIRA SILVA
  • DESENVOLVIMENTO DOS PRIMEIROS PASSOS PARA CONSTRUÇÃO DE UM NOVO SISTEMA DE EXPRESSÃO HETERÓLOGA EM PENICILLIUM RUBENS E CARACTERIZAÇÃO IN SILICO DA PROTEÍNA HIPOTÉTICA PC21G20400

  • Orientador : DANIEL BONOTO GONCALVES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • WAGNER RODRIGO DE SOUZA
  • DANIEL BONOTO GONCALVES
  • DEBORA DE OLIVEIRA LOPES
  • MARINA QUADRIO RAPOSO BRANCO RODRIGUES
  • Data: 17/02/2020

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4
  • ANDERSON KELVIN SARAIVA MACÊDO
  • EXPRESSÃO DO MECANISMO DE RESISTÊNCIA A MULTIXENOBIÓTICOS EM PEIXES COMO BIOMARCADOR DE POLUIÇÃO EM AMBIENTES AQUÁTICOS

  • Orientador : RALPH GRUPPI THOME
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DIEGO GUIMARÃES FLORENCIO PUJONI
  • LUDMILA SILVA BRIGHENTI
  • RAFAEL CESAR RUSSO CHAGAS
  • RALPH GRUPPI THOME
  • Data: 18/02/2020

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5
  • VINÍCIUS SOUZA TARABAL
  • Impacto do DMPEI na atividade anti-adesiva de biofilme em biomateriais e sua aplicação biotecnológica como biocida em preparações pigmentárias

  • Orientador : PAULO AFONSO GRANJEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • PAULO AFONSO GRANJEIRO
  • JOSE ANTONIO DA SILVA
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • Data: 16/10/2020

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  • As infecções hospitalares podem ocorrer devido a inserção de dispositivos médicos como os cateteres urinários, que permitem a migração de microrganismos do meio externo para o organismo do paciente, assim como pela presença dos microrganismos em superfícies inanimadas nos hospitais, como paredes, armários, corrimãos, maçanetas e torneiras. Essas duas vias de infecção hospitalar possuem como características em comum superfícies que favorecem a adesão e proliferação de células e formação de biofilme. Sendo assim, novas tecnologias estão sendo desenvolvidas com o objetivo de modificar superfícies para que a adesão ou sobrevivência dos microrganismos seja impedida ou dificultada. Dentre as moléculas com propriedade anti-adesiva de biofilmes, capazes de revestir superfícies, destaca-se o DMPEI. O DMPEI é um polímero sintético que reveste superfícies sem se ligar covalentemente a ela, com alta capacidade anti-adesiva de biofilme. No presente trabalho, superfícies de cateter de látex foram revestidas com DMPEI e foram avaliadas o efeito anti-adesivo de biofilme contra Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Candida albicans. O cateter revestido com DMPEI apresentou anti-adesão de biofilme de 82%, 88% e 92% para E. coli, S. aureus e C. albicans, respectivamente. A molhabilidade do cateter revestido e não revestido também foi avaliada. O ângulo de contato diminuiu de 50,48º para 46,93º nas superfícies dos cateteres de látex tratadas com o polímero DMPEI, tornando-as mais hidrofílicas. Foram desenvolvidas duas amostras de tinta (A e B) para revestimento de parede e uma de verniz (C) para revestimento de armário, maçaneta, torneira e corrimão, todas contendo DMPEI. O efeito anti-adesivo de diferentes concentrações de DMPEI nas formulações de tintas e do verniz foi avaliado frente a bactéria S. aureus. A amostra de tinta A apresentou 88%, 90% e 91% de anti-adesão de biofilme nas concentrações de 0,2; 2 e 20 mg mL-1 , respectivamente. A amostra B apresentou 89%, 90% e 91% de anti-adesão de biofilme nas concentrações de 0,2; 2 e 20 mg.mL-1 , respectivamente. A amostra C apresentou 88%, 90% e 90% de anti-adesão de biofilme nas concentrações de 0,2; 2 e 20 mg mL-1 , respectivamente. A propriedade anti-adesiva de biofilme das amostras A, B e C foi avaliada por até 32 semanas. Durante esse tempo, a amostra A não apresentou diminuição da atividade anti-adesiva de biofilme, enquanto as amostras B e C apresentaram redução de 91% para 10% e 91% para 26%, respectivamente. O polímero DMPEI apresenta potencial para revestimento de dispositivos médicos e superfícies inanimadas com expressiva anti-adesão de biofilme.


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  • Hospital infections can occur due to the insertion of medical devices such as urinary catheters, which allow the migration of microorganisms from the external environment to the patient's organism, as well as the presence of microorganisms on inanimate surfaces in the hospital, such as walls, cabinets, handrails, door handles. and taps. These two routes of hospital infection have as common characteristics surfaces that favor cell adhesion and proliferation and formation of. Therefore, new technologies are being developed in order to modify surfaces so that the adhesion and survival of microorganisms is prevented or hindered. Among the molecules with biofilm anti-adhesive property and the ability to coat surfaces, DMPEI stands out. DMPEI is a synthetic polymer capable of coating surfaces without covalently bonding to it, with a high anti-adhesive biofilm capacity. In the present work, we coated siliconized latex catheter surfaces with DMPEI and evaluated the biofilm anti-adhesion of the coated catheter against Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Candida albicans. The catheter coated with DMPEI showed anti-adhesion of biofilm of 82.74%, 88.10% and 92.69% for E. coli, S. aureus and C. albicans, respectively. The wettability of the coated and uncoated catheter was also assessed. The contact angle decreased from 50.48º to 46.93º on the surfaces of latex catheters treated with the polymer DMPEI, making them more hydrophilic. We developed two paint samples (A and B) for wall covering and one varnish (C) for covering cabinet, handle, tap and handrail, all containing DMPEI. The anti-adhesion of Staphylococcus aureus was evaluated against samples of paints and varnishes in different concentrations. Sample A showed 88.63%, 90.40% and 91.03% biofilm anti-adhesion at concentrations of 0.2; 2 and 20 mg.mL-1, respectively. Sample B presented 89.77%, 90.34% and 91.31% of biofilm anti-adhesion at concentrations of 0.2; 2 and 20 mg.mL-1, respectively. Sample C showed 88.11%, 90.06% and 90.91% biofilm anti-adhesion at concentrations of 0.2; 2 and 20 mg.mL-1, respectively. We evaluated the biofilm anti-adhesion of samples A, B and C over 3 weeks. During that time, biofilm anti-adhesion did not decrease. The DMPEI polymer has the potential to coat medical devices and inanimate surfaces with high biofilm anti-adhesion.

6
  • LUCAS SANTOS AZEVEDO
  • Avaliação das atividades antioxidante e larvicida do extrato etéreo, ácidos graxos e ésteres metílicos obtidos a partir de sementes de Tecoma stans (L.) Juss. Ex Kunth (Bignoniaceae)

  • Orientador : LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MAIRON CESAR COIMBRA
  • MELISSA GRAZIELLE MORAIS
  • Data: 27/10/2020

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  • A busca de substâncias de origem natural, que possam ser utilizadas como capturadoras de radicais livres e/ou pelo seu potencial larvicida é um assunto cientificamente interessante e intelectual. Isso porque essas moléculas apresentam potencial terapêutico para prevenção de doenças degenerativas, como o Parkinson e Alzheimer, doenças cardiovasculares, neoplasias, podendo até ser usadas no combate à proliferação de culicídeos, responsáveis pela disseminação de doenças como dengue, Zika vírus e filariose. Os produtos mais utilizados no combate aos mosquitos possuem em sua composição substâncias sintéticas não biodegradáveis e bioacumilativas. Muitas espécies do reino Plantae desenvolveram mecanismos de defesa para sua sobrevivência, como a síntese de metabólitos secundários, que podem ser utilizados com outras perspectivas. É bem descrito na literatura que, óleos vegetais apresentam atividades antioxidante e larvicida. Existem estudos de atividades biológicas das folhas e das flores de Tecoma stans, porém estudos com suas sementes são escassos. O objetivo desse trabalho foi a obtenção e avaliação as atividades antioxidante e larvicida do extrato etéreo (EE), ácidos graxos (AG) e ésteres metílicos (FAME) obtidos a partir de sementes de T. stans. EE foi obtido pela extração com éter de petróleo em Sohxlet. Em seguida, EE foi hidrolisado e esterificado para obtenção de AG e FAME, respectivamente. No extrato etéreo detectou-se esteroides, terpenos e alcaloides. Este extrato exibiu potencial antioxidante (CE50 = 0,92 µg/mL), foi atóxico para Artemia salina (DL50 > 1000 µg/mL) e teve toxicidade moderada para Culex quinquefasciatus (DL50 = 188,27 µg/mL). Os ésteres metílicos demonstraram atividade antioxidante (CE50 = 1,03 µg/mL), foram tóxicos para A. salina (DL50 = 7,52 µg/mL) e pouco tóxicos para C. quinquefasciatus (DL50 = 449,03 µg/mL). Já os ácidos graxos mostraram atividade antioxidante (CE50 = 0,91 µg/mL), foram tóxicos para A. salina (DL50 = 486,27 µg/mL) e para C. quinquefasciatus (DL50 = 20,92 µg/mL). Os ácidos graxos apresentaram concentração 23 vezes mais tóxica para C. quinquefasciatus quando comparado com A. salina, o que indica seletividade e fomenta mais estudos quanto a atividade inseticida. Os resultados desse trabalho são promissores e demonstram grande relevância, visto que este é o primeiro relato das atividades antioxidante e larvicida de amostras obtidas de sementes de T. stans.


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  • Search for substances of natural sources which can be used as captors of free radicals and/or larvicide is a scientifically stimulating and intellectual subject because it has therapeutic potential for preventing degenerative diseases, such as Parkinson's and Alzheimer's, cardiovascular diseases, neoplasms, even in combating the proliferation of culicids, responsible for the spread dengue, Zika virus and filariasis. The products most used against mosquitoes contain artificial, non-biodegradable, and bioaccumulative substances. Many species in the Plantae kingdom have developed defense mechanisms for their survival that can be used with other perspectives, such as the synthesis of secondary metabolites. It is well described in the literature that vegetable oils have antioxidant and larvicidal activities. There are studies of Tecoma stans leaf and flower biological activities, but studies with their seeds are scarce. The work objective was to obtain and evaluate the antioxidant and larvicidal activities of the ethereal extract (EE), fatty acids (AG) and fatty acid methyl esters (FAME) obtained from T. stans seeds. EE showed presence of steroids, terpenes and alkaloids, also showed antioxidant potential (EC50 = 0.92 µg/mL), was non-toxic to Artemia salina (DL50 > 1000 µg/mL) and had moderate toxicity to Culex quinquefasciatus (DL50 = 188.27 µg/mL). FAME showed antioxidant activity (EC50 = 1.03 µg/mL), was toxic to A. salina (DL50 = 7.52 µg/mL) and little toxic to C. quinquefasciatus (DL50 = 449.03 µg/mL). AG showed antioxidant activity (EC50 = 0.91 µg/mL), was little toxic to A. salina (DL50 = 486.27 µg/mL) and toxic to C. quinquefasciatus (DL50 = 20.92 µg/mL). The AG was 23 times high toxic for C. quinquefasciatus when compared to A. salina, which indicates selectivity and encourages further studies regarding the insecticidal activity. The work results are promising and have great relevance since this is the first report of the antioxidant and larvicidal activities of samples from T. stans seeds.

Teses
1
  • JULIANA MARTINS MACHADO
  • ESTUDOS DE PROVA DE CONCEITO POR ELISA DA PROTEÍNA rMELEISH2 EM CONDIÇÕES EMPRESARIAIS PARA O DIAGNÓSTICO DE LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA E MAXIMIZAÇÃO DO SEU PROCESSO DE PRODUÇÃO VISANDO LICENCIAMENTO DE TECNOLOGIA

  • Orientador : ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALEXSANDRO SOBREIRA GALDINO
  • DANIEL BONOTO GONCALVES
  • MARIA DE LOURDES BORBA MAGALHÃES
  • MARIANA CAMPOS DA PAZ LOPES GALDINO
  • WENDEL LUIZ DE OLIVEIRA
  • Data: 12/02/2020

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  • ESTUDOS DE PROVA DE CONCEITO POR ELISA DA PROTEÍNA rMELEISH2 EM CONDIÇÕES EMPRESARIAIS PARA O DIAGNÓSTICO DE LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA E MAXIMIZAÇÃO DO SEU PROCESSO DE PRODUÇÃO VISANDO LICENCIAMENTO DE TECNOLOGIA


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2
  • PAULA AVELAR AMADO
  • Estudo Fitoquímico e Avaliação de Atividades Biológicas das Folhas de Smilax brasiliensis Sprengel (Smilacaceae)

  • Orientador : LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • FARAH MARIA DRUMOND CHEQUER BALDONI
  • MELISSA GRAZIELLE MORAIS
  • DENISE BRENTAN DA SILVA
  • Data: 19/02/2020

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  • A família Smilacaceae possui 310 espécies, distribuídas em regiões temperadas, tropicais e subtropicais. Smilax brasiliensis, conhecida como "salsaparrilha" e "japecanga", é uma planta nativa do Cerrado brasileiro, usada na medicina popular como um antirreumático, anti-sífilis, anti-hipertensivo e diurético. O objetivo deste trabalho foi avaliar as atividades antioxidante, alelopática e larvicida, além dos efeitos citotóxico, genotóxico e antigenotóxico, do extrato metanólico e das frações das folhas de S. brasiliensis. As folhas foram coletadas, secadas em estufa e trituradas em moinho de facas. O extrato foi obtido por extração com éter de petróleo e, posteriormente, com metanol, em aparelho Soxhlet. A partir do extrato metanólico foram obtidas as frações diclorometânica, acetoetílica e hidrometanólica. Os principais constituintes presentes no extrato metanólico e frações, identificados por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (CLAE-DAD-EM), foram flavonoides glicosilados e não glicosilados, especialmente com a quercetina, e fenilpropanoides, como ácidos clorogênicos. Dentre os flavonoides, identificou-se rutina e quercetina nas subfrações. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante. As amostras apresentaram efeito inibitório no crescimento, especialmente de sementes de cebola. O índice mitótico foi analisado nas amostras, entretanto, não indicou efeito citotóxico sobre as células testadas. Efeito genotóxico foi observado. O extrato e as frações apresentaram efeitos antigenotóxico, em todas as concentrações testadas, onde foram capazes de reverter as anormalidades cromossômicas causadas pelo glifosato. Um protocolo de germinação in vitro para as sementes de cebola foi estabelecido. O extrato e as frações foram inócuos em Artemia salina e ao Culex quinquefasciatus.


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  • The Smilacaceae family has 310 species, distributed in temperate, tropical and subtropical regions. Smilax brasiliensis, known as "salsaparrilha" and "japecanga", is a plant native to the Brazilian Cerrado, used in folk medicine as an antirheumatic, anti-syphilis, antihypertensive and diuretic. The aims of this study were to evaluate the antioxidant, allelopathic and larvicidal activities, besides the cytotoxic, genotoxic and antigenotoxic effects of the methanolic extract and the fractions of the leaves of S. brasiliensis. Leaves were collected, dried in greenhouse and triturated in a wiley mill. The extract was exhaustively extracted in petroleum ether and after methanol by Soxhlet. From the methanol extract were obtained the dichloromethane, ethyl acetate and hydrometanol fractions. The main constituents present in the methanol extract and fractions, identified by liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC-DAD-MS), were glycosylated and non-glycosylated flavonoids, especially with quercetina and phenylpropanoids, as chlorogenic acid. Among the flavonoids, rutin and quercetin were identified in subfractions. All samples exhibited antioxidant activity. The samples had an inhibitory effect on growth, especially of onion seeds. The mitotic index was analyzed in the samples; however, it did not indicate a cytotoxic effect on the tested cells. The genotoxic effect was observed. The extract and fractions showed antigenotoxic effects at all concentrations tested, where they were able to revert to the chromosomal abnormalities caused by glyphosate. An in vitro germination protocol for onion seeds was established. The extract and fractions were innocuous in Artemia salina and Culex quinquefasciatus.

3
  • ANA GABRIELA SILVA OLIVEIRA
  • AVALIAÇÃO IN VITRO E IN VIVO DO POTENCIAL ANTITUMORAL DA TAPIRIRA GUIANENSIS, ESPÉCIE DO CERRADO BRASILEIRO E DE UM CANABINOIDE SINTÉTICO (WIN 55,212-2) EM LINHAGENS DE GLIOBLASTOMA HUMANO

  • Orientador : ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • CARLA CAROLINA MUNARI
  • CRISTIANE MEDINA FINZI QUINTAO
  • ENIO FERREIRA
  • ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • VALERIA ERNESTANIA CHAVES
  • Data: 28/02/2020

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  • Os glioblastomas (GBM) são tumores do sistema nervoso central, muito vascularizados e que apresentam etiologia desconhecida. A sobrevida média dos pacientes acometidos é de apenas 15 meses, mesmo com os tratamentos atuais, fazendo com que a busca de quimioterápicos eficazes seja de extrema importância. Entre os anos 1940-2010, cerca de 75% dos antineoplásicos descobertos foram originados do Reino Plantae. Neste
    trabalho, uma espécie endêmica do Cerrado brasileiro, Tapirira guianensis, e um canabinoide sintético (WIN 55,212-5), que possui afinidade pelos receptores do sistema endocanabinoide, foram avaliados em duas linhagens de glioblastoma humano, GAMG e U251 e em uma linhagem não tumoral, NHA. Após uma triagem inicial e cálculo do índice de seletividade tumoral (IST) do extrato bruto (EB) e das partições hidroalcóolica
    (PH), hexânica (PH), clorofórmica (PC) e acetoetílica (PC) da espécie vegetal, foram realizados os ensaios funcionais in vitro e ensaios in vivo. Todos os extratos inibiram a migração celular, contudo, com exceção do PC, todos foram capazes de inibir o crescimento de colônias das células tumorais. O EB, PH e PA causaram a formação de bolhas e alterações nucleares, além de encolhimento celular e condensação da cromatina, apenas na linhagem U251. No ensaio in vivo da membrana corioalantóide de galinha (CAM), o tratamento com as PH, PC e PA, ricas nos compostos secundários cumarinas, esteroides e flavonoides, causaram redução do tumor. Estas partições também foram avaliadas no teste de irritação da membrana corioalantóide do ovo de galinha (HET- CAM) e não provocaram alterações nos vasos sanguíneos. Estas partições foram fracionadas e avaliadas quanto a citotoxicidade e ao IST, e duas frações (01ID-F2 e 01ID-F4) da PA foram as que apresentaram menor IC50 e maior IST. Direcionadas para os ensaios in vivo, apenas a fração 01ID-F4 inibiu o crescimento tumoral e não provocou nenhuma alteração nos vasos sanguíneos, porém nenhuma delas inibiu a angiogênese. Esses extratos também atuaram induzindo a morte celular por apoptose pela via extrínseca. Tais achados nos permitem concluir que que os extratos da espécie Tapirira guianensis apresentam potencial antitumoral para os glioblastomas, sendo as PH, PC e PA ativas tanto in vitro quanto in vivo. Por sua vez, o composto WIN foi seletivamente citotóxico para as células GBM e inibiu significativamente a migração celular e a capacidade clonogênica das linhagens GAMG e U251. O tratamento causou características indicativas de morte celular por apoptose, como bolhas e alterações nucleares, além de encolhimento celular e condensação da cromatina. Além disso, ele inibiu a atividade das metaloproteínases 2 e 9 que pode estar relacionada à inibição da invasão celular encontrada após o tratamento. Além disso, os dados também mostraram que os efeitos antitumorais do WIN são exercidos pelas expressões de p53 e catepsina D aumentadas, além da expressão diminuída de HSP70. Esses dados podem indicar um mecanismo de morte celular por apoptose independente de caspases. Finalmente, o tratamento com o WIN diminuiu o perímetro tumoral (in vivo) e os vasos sanguíneos nessa área, sem causar lise, hemorragia ou coagulação sanguínea. Estes achados reforçam a utilidade dos canabinóides como candidatos a futuras avaliações no tratamento do glioblastoma.


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  • Glioblastomas (GBM) are tumors highly vascularized of the central nervous system, with an unknown etiology. The average survival of affected patients is only 15 months, even with current treatments, searching for effective chemotherapy drugs extremely important. Between the years 1940-2010, about 75% of the antineoplastics discovered were originated from the Kingdom Plantae. In this work, a species endemic to the
    Brazilian Cerrado Tapirira guianensis, and a synthetic cannabinoid (WIN 55,212-5) were evaluated in two strains of human glioblastoma, GAMG and U251, and in a non- human strain. tumor, NHA. After an initial screening and calculation of the tumor selectivity index (STI) of the crude extract (EB) and of the hydroalcoholic (PH), hexane
    (PH), chloroform (PC), and acetoethyl (PC) partitions of the plant species, the tests  were carried out in vitro functional and in vivo assays. All extracts inhibited cell migration. However, except for the PC, all were able to inhibit the growth of tumor cell  colonies. EB, PH, and PA caused the formation of bubbles and nuclear changes, in addition to cell shrinkage and chromatin condensation, only in the U251 strain. In the in vivo chicken chorioallantoic membrane (CAM) assay, treatment with PH, PC, and PA, rich in the secondary compounds coumarins, steroids, and flavonoids, caused tumor reduction. These partitions were fractionated and evaluated for cytotoxicity and IST. Two fractions (01ID-F2 and 01ID-F4) of the PA were those with the lowest IC50 and the highest IST. In vivo assays, only the fraction 01ID-F4 inhibited tumor growth and did not cause any change in blood vessels. However, none of them inhibited angiogenesis. These extracts also acted to induce cell death due to apoptosis by the extrinsic route. These findings allow us to conclude that extracts of the species Tapirira guianensis have the antitumor potential for glioblastomas, with PH, PC, and PA being active both in vitro and in vivo. In turn, the WIN compound was selectively cytotoxic to GBM cells and significantly inhibited cell migration and clonogenic capacity of the GAMG and U251 strains. The treatment caused characteristics indicative of cell death due to apoptosis, such as bubbles and nuclear alterations, in addition to cell shrinkage and chromatin condensation. In addition, it inhibited the activity of metalloproteinases 2 and 9 which may be related to the inhibition of cell invasion found after treatment. Besides, the data also showed that the anti-tumor effects of WIN are exerted by the increased p53 and cathepsin D expressions, in addition to the decreased expression of HSP70. These data may indicate a mechanism of cell death by apoptosis independent of caspases. Finally, WIN decreased the tumor perimeter (in vivo) and blood vessels in that area. Also, it didn't cause lysis, hemorrhage, or blood clotting. These findings reinforce the usefulness of cannabinoids as candidates for future evaluations in the treatment of glioblastoma. 

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  • MARINA GOULART DA SILVA
  • NANOEMULSÃO CONTENDO O COMPOSTO SINTÉTICO 10-(4,5-DIHIDROTIAZOL-2-ILTIO)DECAN-1OL: DESENVOLVIMENTO, CARACTERIZAÇÃO E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMALÁRICA IN VITRO E IN VIVO

  • Orientador : GISELE RODRIGUES DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GISELE RODRIGUES DA SILVA
  • JULIANA TEIXEIRA DE MAGALHAES
  • ANA JULIA PEREIRA SANTINHO GOMES
  • SANDRA APARECIDA DE LIMA MOURA
  • ANDRE LUIS MORAIS RUELA
  • Data: 16/07/2020

  • Mostrar Resumo
  • O desenvolvimento de resistência do Plasmodium spp. aos medicamentos antimaláricos dificulta o tratamento da doença, tornando necessária a busca por novas moléculas com atividade antimalárica bem como formulações que transportem estes fármacos. Tem-se como objetivo o desenvolvimento de uma nanoemulsão do tipo óleo em água capaz de incorporar a 10-(4,5-dixidrotiazol-2-iltio)decan-1ol (tiazolina), um protótipo sintético antimalárico, para tratar a malária por vial oral. A fase oleosa da nanoemulsão é constituída de ácido oleico, butilhidroxianisol, parabenos e tiazolina, e a fase aquosa é formada pelo polietilenoglicol (15)-hidroxi-estearato (Solutol HS15) e água purificada. Essa formulação é constituída por excipientes que favorecem a biodisponibilidade da tiazolina e a sua liberação controlada e prolongada. Um método analítico foi desenvolvido e validado para quantificação da tiazolina. Fez-se o delineamento fatorial 2 3 com réplicas no ponto central a fim de avaliar a influência dos excipientes nas características físico-químicas da nanoemulsão (tamanho de gotícula, IPD, potencial zeta e eficiência de encapsulação). A formulação, selecionada a partir do delineamento, apresentou tamanho de gotícula de 248,80 nm, índice de polidispersão de 0,236 indicando a homogeneidade de tamanho de gotículas, potencial zeta de -38,5 mV e eficiência de encapsulação de 97,17% m/m. O ensaio de liberação in vitro mostrou a liberação controlada da tiazolina em meios ácido (pH 2,0) e neutro (pH 6,86), que simulam os fluidos gástrico e intestinal, respectivamente. A nanoemulsão contendo tiazolina se manteve estável por 180 dias em condições de armanzenamento drásticas (40 oC e 25% de umidade), indicando que a formulação apresenta estabilidade nas diversas condições climáticas existentes no Brasil. A nanoemulsão apresentou atividade antimalárica superior à da tiazolina livre (p < 0,05) e teve índice de seletividade em relação ao fibroblasto pulmonar (WI-26VA4) de 12,46, sendo tóxico seletivamente aos parasitos. A atividade antimalárica in vivo da nanoemulsão contendo 25 mg/kg da tiazolina não apresentou diferença estatisticamente significativa em comparação à cloroquina (p > 0,05). Entretanto, essa formulação não alcançou taxa de cura e teve atividade modesta em relação à sobrevida dos animais. A nanoemulsão contendo tiazolina representa uma estratégia para o desenvolvimento de um novo medicamento para o tratamento da malária, combinando um novo candidato antimalárico e a nanoemulsão.


  • Mostrar Abstract
  • The development of resistance of Plasmodium spp. to antimalarial drugs make it difficult to treat the disease, making it necessary to search for new molecules with antimalarial activity as well as formulations that transport these drugs. The objective is to develop an oil-in-water nanoemulsion capable of incorporating 10-(4,5- dixidrothiazol-2-ylthio) decan-1ol (thiazoline), a synthetic antimalarial prototype, to treat malaria orally. The oily phase of the nanoemulsion is made up of oleic acid, butylhydroxyanisol, parabens and thiazoline, and the aqueous phase is formed by polyethylene glycol (15)-hydroxystearate (Solutol HS15) and purified water. This formulation consists of excipients that favor the bioavailability of thiazoline and its controlled and prolonged release. An analytical method was developed and validated for quantification of thiazoline. A factorial design 23 was carried out with replicates at the central point in order to assess the influence of excipients on the physical-chemical characteristics of the nanoemulsion (droplet size, PDI, zeta potential and encapsulation efficiency). The formulation, selected from the design, had a droplet size of 248.80 nm, a polydispersion index of 0.236 indicating homogeneity in droplet size, zeta potential of -38.5 mV and encapsulation efficiency of 97.17% m / m. The in vitro release assay showed the controlled release of thiazoline in acidic (pH 2.0) and neutral (pH 6.86) media, which simulate gastric and intestinal fluids, respectively. The nanoemulsion containing thiazoline remained stable for 180 days in drastic storage conditions (40 oC and 25% humidity), indicating that the formulation is stable in the various climatic conditions existing in Brazil. The nanoemulsion showed superior antimalarial activity when compared to that of free thiazoline (p <0.05) and had a selectivity index in relation to the pulmonary fibroblast (WI-26VA4) of 12.46, being selectively toxic to parasites. The in vivo antimalarial activity of the nanoemulsion containing 25 mg / kg of thiazoline showed no statistically significant difference when compared to chloroquine (p> 0.05). However, this formulation did not achieve a cure rate and had modest activity in relation to animal survival. The nanoemulsion containing thiazoline represents a strategy for the development of a new drug for the treatment of malaria, combining a new antimalarial candidate and the nanoemulsion.

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  • HARLEY DA SILVA TAVARES
  • DESENVOLVIMENTO DE SISTEMAS POLIMÉRICOS DE IMPLANTAÇÃO INTRAOCULAR DESTINADOS AO TRATAMENTO DA TOXOPLASMOSE

  • Orientador : GISELE RODRIGUES DA SILVA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GISELE RODRIGUES DA SILVA
  • RENE OLIVEIRA DO COUTO
  • JULIANA TEIXEIRA DE MAGALHAES
  • SANDRA APARECIDA DE LIMA MOURA
  • ANDRE LUIS MORAIS RUELA
  • Data: 27/07/2020

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  • Toxoplasmose ocular é uma apresentação clínica caracterizada pela inflamação da retina/coroide, sendo a principal causa de uveíte posterior infecciosa no mundo. O objetivo desse trabalho consistiu no desenvolvimento de micro implantes intraoculares de poli(D,Lácido láctico-co-ácido glicólico) (PLGA) e espiramicina destinados ao tratamento da toxoplasmose ocular. Foram preparadas soluções dissolvendo entre 8,33% a 25% (p/p) de espiramicina e 75% a 91,67% (p/p) de PLGA 50:50, PLGA 80:20 e PLGA 85:15, em acetonitrila. Após evaporação da acetonitrila, a mistura de pós foi moldada em temperatura entre 40 e 45 ºC. Os micro implantes obtidos foram caracterizados por meio de Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), Termogravimentria (TGA), Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Difração de RaiosX (DRX) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). O método de quantificação por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) da espiramicina presente nos micro implantes e em humor vítreo foi desenvolvido e validado. O estudo de liberação in vitro foi realizado em tampão fosfato de potássio (PBS) pH 7,4 seguindo as condições de esgotamento e avaliada a tolerância ocular por meio do teste em membrana córionalantóide de ovo embrionado de galinha (HET-CAM). O estudo de biocompatibilidade in vitro foi realizado utilizando-se as células do epitélio pigmentar da retina humana (ARPE19), avaliando-se a citotoxicidade pelo ensaio de redução de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5- difenil-2H tetrazolato de bromo (MTT), bem como por meio da interferência do ciclo celular e migração destas células. A eficácia anti-toxoplasma dos implantes também foi conduzido. Obtiveram-se micro implantes cilíndricos com massa entre 2,85 mg e 3,15 mg, comprimento entre 2,78 e 3,22 mm e diâmetro entre 0,85 mm a 0,95 mm. Os espectros FTIR demonstraram preservação das bandas de absorção típicas dos PLGA e da espiramicina após incorporação deste fármaco às matrizes poliméricas. Os termogramas TGA e DSC evidenciaram o desaparecimento do pico característico da espiramicina após o desenvolvimento da formulação, atribuido à dispersão molecular do fármaco dentro da matriz polimérica. A análise dos difratogramas mostraram picos sugestivos de compostos semicristalinos, provavelmente induzidos pelo aquecimento. A análise morfológica dos micro implantes obtidos a partir de PLGA 50:50 mostrou que a superfície era lisa e homogênea. Já as superfícies dos micro implantes obtidos de PLGA 80:20 e 85:15 mostraram-se rugosas e heterogêneas, com presença de poros ou canais. O método analítico desenvolvido foi validado mostrando-se linear, seletivo, preciso, exato e robusto. O fármaco apresentou-se uniformemente distribuído nos micro implantes, com teores que variaram entre 97% e 103% do valor rotulado. Através da análise por MEV foi possível verificar a influência de poros ou canais presentes na matriz polimérica sob a difusão da espiramicina. Os micro implantes promoveram a liberação controlada da espiramicina, sendo que aproximadamente 99% a 103% fármaco foram liberados pelos micro implantes compostos de PLGA 50:50 em 56 dias consecutivos e, PLGA 80:20 ou PLGA 85:15 em 42 dias consecutivos. Os micro implantes foram classificados como não irritantes de acordo com o HET-CAM, sugerindo que esses sistemas serão bem tolerados após inserção na cavidade vítrea do olho. Os micro implantes tiveram baixa toxicidade frente às células ARPE-19 e não promoveram distúrbios no processo de migração destas células ou modulação do ciclo celular e demonstraram serem efetivos contra o Toxoplasma gondii. Atualmente, no mercado farmacêutico não existem micro implantes intraoculares poliméricos contendo fármacos anti-toxiplasmose aprovados e disponíveis, o que destaca esses sistemas como uma alternativa para o tratamento da toxoplasmose ocular. 


  • Mostrar Abstract
  • Ocular toxoplasmosis is a clinical presentation characterized by retinal / choroid inflammation and is the main cause of infectious posterior uveitis in the world. The aim of this work was to develop intraocular micro implants of poly (D, L-lactic acid-glycolic coacid) (PLGA) and spiramycin for the treatment of ocular toxoplasmosis. Solutions were prepared by dissolving between 8.33% to 25% (w/w) spiramycin and 75% to 91.67% (w/w) PLGA 50:50, PLGA 80:20 and PLGA85:15 in acetonitrile. After evaporation of acetonitrile, the powder mixture was molded at a temperature between 40 and 45 ° C. The micro implants were characterized by Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), Thermogravimentry (TGA), Differential Scanning Calorimetry (DSC), X-ray Diffraction (XRD) and Scanning Electron Microscopy (SEM) Morphological Analysis. The method of quantifying spiramycin in micro-implants and vitreous humor by high performance liquid chromatography (HPLC) was previously developed and validated. The in vitro release study was performed in potassium phosphate buffer (PBS) pH 7.4 following sink conditions and ocular tolerance was evaluated by the chicken embryonic egg chorion-allantoid membrane test (HET-CAM). In vitro biocompatibility study was performed using human retinal pigment epithelium (ARPE-19) cells, and cytotoxicity was evaluated by Bromine 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-2H tetrazolate (MTT) reduction assay as well as cell cycle interference and migration of these cells. Cylindrical micro implants with mass between 2.85 and 3.15 mg, length between 2.78 mm and 3.22 mm and diameter between 0.85 mm and 0.95 mm were obtained. FTIR spectra demonstrated preservation of the typical absorption bands of PLGA and spiramycin after incorporation of this drug into the polymeric matrices. TGA and DSC thermograms evidenced the disappearance of the characteristic spiramycin peak after formulation development, due to the molecular dispersion of the drug within the polymeric matrix. Diffractograms analysis showed suggestive peaks of semicrystalline compounds, probably induced by heating. The morphological surface analysis of the micro implants obtained from PLGA 50:50 presented smooth and homogeneous. However, the surfaces of the micro implants obtained from PLGA 80:20 and 85:15 showed rough and heterogeneous, with the presence of pores or channels. The developed analytical method was validated to be linear, selective, precise and accurate. The drug was evenly distributed in the micro implants, with contents ranging from 97% to 103% of the labeled value. Through SEM analysis it was possible to verify the influence of pores or channels present in the polymeric matrix under the diffusion of spiramycin. Micro-implants promoted controlled release of spiramycin, with approximately 99% to 103% of the drug being releasedm by micro-implants composed of 50:50 PLGA on 56 consecutive days and PLGA 80:20 or PLGA 85:15 on 42 consecutive days. Micro implants were classified as non-irritant according to the HET-CAM, suggesting that these systems will be well tolerated after insertion into the vitreous cavity of the eye. The icro implants had low toxicity against ARPE-19 cells and did not promote disturbance in the process of migration of these cells or cell cycle modulation. Currently, in the pharmaceutical market there are no polymeric intraocular micro implants containing approved and available anti-toxoplasmosis drugs, which highlights these systems as an alternative for the treatment of ocular toxoplasmosis.

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  • JOSE ANTONIO RIBEIRO NETO
  • “Eriosema pycnonthum (Benth), avaliação do potencial biotecnológico em processos cicatriciais”

  • Orientador : ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA GABRIELA SILVA OLIVEIRA
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • GERALDO ALVES DA SILVA
  • HELIO BATISTA DOS SANTOS
  • ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • Data: 17/12/2020

  • Mostrar Resumo
  • O gênero Eriosema, composto por 150 espécies, em nove táxons têm sua ocorrência entre África e Américas. Eriosema pycnanthum é uma leguminosa da família Fabaceae, componente da tribo Phaseoleae e da subtribo Cajaninae. No Brasil os estudos envolvendo o gênero Eriosema se resumem à descrição de novos táxons ou ao registro ocasional em levantamentos da flora regional. O presente trabalho visa avaliar a ação cicatrizante do extrato hidroalcoólico de E. pycnanthum, além de avaliar a estrutura vegetal, promover a multiplicação in vitro da espécie e o seu replantio em ambiente natural. O levantamento do uso de plantas medicinais, em especial E. pycnanthum, na região de Itapecerica, Minas Gerais foi submetido e aprovado pelo CEPES-UEMG com o número 2.812.199, onde a adoção livre e espontânea dos populares ao tratamento com E. pycnanthum foi registrado através de questionário, acompanhamento e fotos da evolução do quadro. Mapas de dispersão foram construídos a partir de trabalhos e registros de depósito de exsicatas de E. pycnanthum pelos territórios das Américas, Minas Gerais e Itapecerica. A multiplicação da espécie in vitro, demonstra baixa responsividade dos explantes aos tratamentos convencionais. Em biorreator, o aumento da massa radicular, ocorre de maneira lenta requerendo para isso melhoras no sistema e meios de cultivo com elicitação. O baixo índice de germinação de suas sementes, se deve em parte à rápida queda da eficiência respiratória, comprovada pelo teste de Brometo de Tetrazólium, além de dormência tegumentar, comprovada após retirada manual do tegumento. A análise com o software DCCR-USP mostra que o tratamento com solução de 2% de KNO3 é ineficaz na melhora destes índices. A análise anatômica mostra folhas anfiestomáticas, estômatos paracíticos, mesófilo Dorsiventral com parênquima paliçádico unisseriado prevalente, feixes vasculares concentrados próximos à nervura principal sem grandes alterações entre folhas ex vitro e in vitro que no entanto, têm diferenças quanto à continuidade do parênquima paranerval. As sementes não possuem óleos más apresentam ampla reserva de amido e são dotadas de 9 camadas celulares concentradas sobre o embrião. A composição do extrato analisada por CCD da raiz de campo, in vitro e do chá, mostram fitosteróis como β-sistoterol, β-Escina e Estigmasterol além de fenóis como o Ácido Cinâmico, Catequina, Rutina e Quercetina. O teor de Fenóis totais, Flavonoides, Fitoesteróis e Alcaloides são maiores nos extratos das raízes in vitro. O RMN, mostra espectros semelhantes de composição das xi soluções más com concentrações maiores nos extratos de raízes in vitro e revela a presença de grupos flavonóis, antocianinas e açucares além de compostos anoméricos e glicosídicos. O extrato hidroalcoólico das raízes de campo apresenta ação proliferativa sobre linhagens de fibroblastos e queratinócitos in vitro sem presença de ação citotóxica em linhagens normais. A substituição da água pelo chá das raízes de campo nos testes animais, induzem à melhora do quadro em especial durante a fase inflamatória do processo cicatricial.


  • Mostrar Abstract
  • The genus Eriosema, composed of 150 species, in nine taxa has its occurrence between Africa and the Americas. Eriosema pycnanthum is a legume from the Fabaceae family, a component of the Phaseoleae tribe and the Cajaninae subtribe. In Brazil, studies involving the genus Eriosema are limited to the description of new taxa or the occasional registration in surveys of regional flora. The present work aims to evaluate the healing action of the hydroalcoholic extract of E. pycnanthum, in addition to evaluating the plant structure, promoting the in vitro multiplication of the species and its replanting in a natural environment. The survey on the use of medicinal plants, especially E. pycnanthum, in the region of Itapecerica, Minas Gerais, was submitted and approved by CEPES-UEMG under number 2,812,199, where the free and spontaneous adoption of the popular to the treatment with E. pycnanthum was recorded through a questionnaire, monitoring, and photos of the evolution of the condition. Scatter maps were constructed from works and records of E. pycnanthum exsiccatae deposits across the territories of the Americas, Minas Gerais and Itapecerica. The multiplication of the species in vitro demonstrates low responsiveness of explants to conventional treatments. In a bioreactor, the increase in root mass occurs slowly, requiring improvements in the system and means of cultivation with elicitation. The low germination rate of its seeds is partly due to the rapid drop in respiratory efficiency, as evidenced by the Tetrazolium Bromide test, in addition to tegumentary numbness, proven after manual removal of the seed coat. The analysis with the DCCR-USP software shows that treatment with a 2% KNO3 solution is ineffective in improving these rates. The anatomical analysis shows amphistomatic leaves, paracitic stomata, Dorsiventral mesophyll with prevalent single-palisade parenchyma, vascular bundles concentrated close to the main vein without major changes between ex vitro and in vitro leaves, which, however, have differences in the continuity of the paranerval parenchyma. The seeds have no bad oils, have ample starch reserves and are equipped with 9 cell layers concentrated on the embryo. The extract composition analyzed by CCD of the field root, in vitro and tea, shows phytosterols such as β-sitoterol, β-Escina and Stigmasterol in addition to phenols such as Cinnamic Acid, Catechin, Rutin and Quercetin. The content of total phenols, flavonoids, phytosterols and alkaloids are higher in root extracts in vitro. NMR shows similar spectra of the composition of xi bad solutions with higher concentrations in root extracts in vitro and reveals the presence of flavonol, anthocyanin and sugar groups in addition to anomeric and glycosidic compounds. The hydroalcoholic extract of the field roots has a proliferative action on fibroblast and keratinocyte lines in vitro without the presence of cytotoxic action on normal lines. The replacement of water by tea from the field roots in animal tests, induces an improvement of the condition, especially during the inflammatory phase of the healing process.

2019
Dissertações
1
  • IZABELA CAPUTO ASSIS SILVA
  • Avaliação das atividades antioxidante, alelopática e dos efeitos citotóxico e genotóxico dos caules de Smilax brasiliensis Sprengel (Smilacaceae)

  • Orientador : LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • Data: 30/07/2019

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  • Smilax brasiliensis Sprengel é uma espécie nativa do Cerrado, conhecida popularmente como japecanga ou salsaparrilha. Na medicina popular é utilizada como tônico, antirreumático e antissifilítico. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as atividades antioxidante e alelopática, assim como os efeitos citotóxico e genotóxico do extrato etanólico e das frações obtidos dos caules de Smilax brasiliensis. Os caules foram seccionados, secados em estufa e triturados em moinho de facas. O extrato etanólico (EE) foi obtido por percolação com etanol e secado em rotaevaporador. Parte do extrato seco foi solubilizado em etanol/água e particionado com hexano, diclorometano e acetato de etila, para a obtenção das frações hexânica (HEX), diclorometânica (DCM), acetoetílica (AC) e fração residual hidroetanólica (H). O estudo fitoquímico do extrato e das frações revelou a presença de alcaloides, cumarinas, esteroides, triterpenoides, flavonoides, saponinas e taninos condensados. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante, destacando-se as frações acetoetílica e diclorometânica, com valores de concentração efetiva para capturar 50% dos radicais livres (CE50) de 1,71 e 1,91 µg/mL, respectivamente, sendo mais ativas que o padrão 2,6-di-tert-butil-4-metilfenol (BHT, 16,36 µg/mL). Essas frações também apresentaram o maior conteúdo de compostos fenólicos, taninos e flavonoides totais. As amostras apresentaram efeito inibitório no crescimento das sementes, especialmente das sementes de cebola. Na análise citogenética foi observado que houve efeito citotóxico. As frações H (250 µg/mL), HEX (250 e 500 µg/mL) e AC, em todas as concentrações testadas (250, 500 e 1000 µg/mL), apresentaram efeito citotóxico, uma vez que interferiram no processo de divisão celular da cebola. No entanto, não foi possível correlacionar o efeito citotóxico com o efeito genotóxico, uma vez que não foi observada a presença de alterações genotóxicas, considerando então, a espécie S. brasiliensis uma planta atóxica. A análise fitoquímica e biológica do extrato e das frações dos caules de S. brasiliensis, em relação às atividades antioxidante, alelopática e os efeitos citotóxico e genotóxico, testados nesse estudo, foram pela primeira vez descritos.


  • Mostrar Abstract
  • Smilax brasiliensis Sprengel is a species native to the Cerrado, popularly known as japecanga or sarsaparilla. In folk medicine it is used as tonic, anti-rheumatic and anti-syphilitic. The present work had as objective to evaluate the antioxidant and allelopathic activities, as well as the cytotoxic and genotoxic effects of the ethanol extract and fractions obtained from the stems of Smilax brasiliensis. The stems were sectioned, dried in a greenhouse and ground in a knife mill. The ethanol extract was obtained by percolation with ethanol and drying in a rotary evaporator. Part of the dry extract was solubilized in ethanol/water and partitioned with hexane, dichloromethane and ethyl acetate, to obtain the fractions hexane, dichloromethane, ethyl acetate and residual fraction hydroethanol. The phytochemical study of the extract and fractions revealed the presence of alkaloids, coumarins, steroids, triterpenoids, flavonoids, saponins and condensed tannins. All the samples presented antioxidant activity, with the highest values of EC50, 1,71 and 1,91 μg/mL, respectively, in relation to BHT (16.36 μg/mL), and were the fractions in which the highest content of phenolic compounds, total tannins and flavonoids were also determined. The samples had an inhibitory effect on growth, especially of onion seeds. In the cytogenetic analysis it was observed that there was a cytotoxic effect. The fraction H at the concentration of 250 µg/mL and the HEX and AC fractions at all concentrations tested (250, 500 and 1000 µg/mL) showed a cytotoxic effect, since they interfered in the cell division process of the onion. However, it was not possible to correlate the cytotoxic effect with the genotoxic effect, since the presence of genotoxic alterations was not observed, considering the S. brasiliensis species as a non-toxic plant. The chemical and biological analysis of the extract and fractions of the stems of S. brasiliensis, in relation to the antioxidant, allelopathic, cytotoxic and genotoxic effects tested in this study were first described.

2
  • GILVÂNIA APARECIDA RABELO CORDEIRO
  • Avaliação da atividade antitumoral das frações de Annona coriacea Mart. sobre linhagens de cabeça e pescoço

  • Orientador : ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ROSY IARA MACIEL DE AZAMBUJA RIBEIRO
  • DANIEL MOREIRA DOS SANTOS
  • CARLA SILVA SIQUEIRA MIRANDA
  • Data: 09/08/2019

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  • Avaliação da atividade antitumoral das frações de Annona coriacea Mart. sobre linhagens de cabeça e pescoço


  • Mostrar Abstract
  • Evaluation of antitumor activity of Annona coriacea Mart. on head and neck strains

Teses
1
  • MAIRON CESAR COIMBRA
  • Cultivo in vitro e efeito do congelamento em Pyrostegia venusta: protocolos biotecnológicos para a produção de metabólitos secundários biativos

  • Orientador : ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA HORTENCIA FONSECA CASTRO
  • DIOGO PEDROSA CORRÊA DA SILVA
  • FERNANDA CARLOTA NERY
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • RENATO PAIVA
  • Data: 31/10/2019

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  • -


  • Mostrar Abstract
  • -

2
  • RENATA RACHIDE NUNES
  • Desenvolvimento de novos compostos com potencial ação antimalárica utilizando duas estratégias: síntese orientada e reposicionamento de fármaco

  • Orientador : FERNANDO DE PILLA VAROTTI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALEX GUTTERRES TARANTO
  • GUSTAVO HENRIQUE RIBEIRO VIANA
  • LUIZ GUILHERME MACHADO DE MACEDO
  • BRUNO ANTÔNIO MARINHO SANCHEZ
  • AMANDA LUISA DA FONSECA
  • Data: 18/11/2019

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  • Desenvolvimento de novos compostos com potencial ação antimalárica utilizando duas estratégias: síntese orientada e reposicionamento de fármaco


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  • Development of new compounds with potential antimalarial action using two strategies: targeted synthesis and drug repositioning

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  • FELIPE ROCHA DA SILVA SANTOS
  • Identificação de candidatos a antivirais contra o Zika virus selecionados por análise in vitro e in silico

  • Orientador : JAQUELINE MARIA SIQUEIRA FERREIRA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • JAQUELINE MARIA SIQUEIRA FERREIRA
  • ALEX GUTTERRES TARANTO
  • DEBORA DE OLIVEIRA LOPES
  • LEANDRO AUGUSTO DE OLIVEIRA BARBOSA
  • AMANDA LUISA DA FONSECA
  • TEODORICO DE CASTRO RAMALHO
  • Data: 12/12/2019

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  • MELISSA GRAZIELLE MORAIS
  • avaliação das atividades antioxidante, anti-inflamatória e antinociceptiva dos frutos maduros de Solanum lycocarpum A. St. Hil. (Solanaceae)

  • Orientador : LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • RALPH GRUPPI THOME
  • ADRIANA CRISTINA SOARES DE SOUZA
  • GLAUCIA MARIA LOPES REIS
  • ADRIANO GUIMARAES PARREIRA
  • IVANILDES VASCONCELOS RODRIGUES
  • Data: 13/12/2019

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  • A espécie Solanum lycocarpum, possui relevância científica, ambiental, na medicina popular e na alimentação. O objetivo deste trabalho consistiu em avaliar as atividades antioxidante, anti-inflamatória e antinociceptiva para os frutos maduros de S. lycocarpum. Os frutos foram coletados, secados, triturados e extraídos por percolação exaustiva; obtendo-se o extrato etanólico (EE) que foi particionado com solventes de polaridades crescentes, obtendo-se as frações hexânica (HEX), diclorometânica (DCM), acetoetílica (AC) e hidroetanólica (HE). Foi determinado o conteúdo de compostos fenólicos, flavonoides totais e taninos no EE e frações, e realizada a análise do perfil cromatográfico do EE, sendo identificados glicoalcaloides esteroidais, os alcaloides esteroidais solasodina e peimimina, bem como os ácidos fenólicos 3,5-di-O-E-cafeoilquínico, 4,5-di-O-E-cafeoilquínico, 3,5,5-tri-O-E-cafeolilquínico, O-coumaroil dicafeoilquínico e O-cafeoildicoumaroilquínico. O EE e todas as frações apresentaram atividade antioxidante. O EE e as frações HEX, DCM e HE, administrados via intraperitoneal, demonstraram atividade anti-inflamatória nas duas fases do modelo edema de pata induzido por carragenina, e as análises histológicas do coxim plantar dos animais, mostraram que o EE e a fração DCM, na dose 300 mg/Kg, reduziram consideravelmente a migração leucocitária. A fração DCM administrada via oral também exibiu atividade antiedematogênica. O EE e a fração DCM demonstraram atividade antinociceptiva, nos testes de nocicepção induzida por formalina, contorções abdominais induzidas por ácido ácetico e teste de placa quente, com ação antinociceptiva na nocicepção neurogênica e inflamatória. Na nocicepção com o envolvimento do sistema opioidérgico no teste de formalina, o antagonista naloxona não revertou a ação antinociceptiva do EE e fração da DCM. Os resultados demonstraram que os frutos maduros de S. lycocarpum possuem potencial antioxidante, anti-inflamatório e antinociceptivo e que os compostos fenólicos e flavonoides, detectados no extrato e frações, bem como peiminina, solasodina, 3,5-di-O-E-cafeoilquínico, 4,5-di-O-E-cafeoilquínico e 3,5,5-tri-O-E-cafeolilquínico detectados no EE, estão correlacionados as atividades biológicas, haja vista que estes compostos exibem estas propriedades descritas em outros estudos científicos.


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  • The species Solanum lycocarpum, has scientific and environmental relevance, in popular medicine and in food. The aim of this work was to evaluate antioxidant, anti-inflammatory and antinociceptive activities for ripe fruits of S. lycocarpum. The fruits were collected, dried, crushed and extracted by exhaustive percolation, obtaining ethanol extract, which was partitioned with solvents of increase polarity, obtaining hexane (HEX), dichloromethane (DCM), ethyl acetate (AC) and hydroethanol (HE) fractions. The total phenolic compounds, flavonoids and tannins in EE and fractions were determined, and performed analysis chromatographic profile of EE, being identified  steroidal glycoalkaloids, the steroidal alkaloids solasodine and peimimine, as well as phenolic acids 3,5-di-O-E-caffeoylquinic, 4,5-di-O-E-caffeoylquinic, 3,5,5-tri-O-E-caffeolylquinic, O-coumaroyl dicaffeoylquinic and O-caffeoyl dicoumaroylquinic. EE and fractions showed antioxidant activity. The EE and HEX, DCM and HE fractions administered intraperitoneally demonstrated anti-inflammatory activity in two phases of carrageenan-induced paw edema model; and the histological analysis of plantar cushin of animals showed that EE and DCM fraction at 300 mg/kg, considerably reduced leukocyte migration. The DCM fraction administered orally also exhibited antidematogenic activity. The EE and DCM fraction presented antinociceptive activity in formalin-induced nociception, acetic acid-induced abdominal writhing test, hot plate test with antinociceptive action on neurogenic and inflammatory nociception. The nociception with involvement of opioid system in formalin test, the naloxone antagonist did not revert antinociceptive action of EE and DCM fraction. The results showed that the ripe fruits of S. lycocarpum have antioxidant, anti-inflammatory and antinociceptive potential and that phenolic and flavonoid compounds, detected in extract and fractions, as well  peiminin, solasodine, 3,5-di-O-E-caffeoylquinic, 4,5-di-O-E-caffeoylquinic and 3,5,5-tri-O-E-caffeolylquinic found in EE, are correlated with biological activities, since these compounds exhibit these properties described in other scientific studies.

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