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Dissertações |
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LUIZA APARECIDA ANSALONI CHAGAS PEREIRA
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EFEITO DA INJÚRIA TECIDUAL DECORRENTE PUNÇÃO NA MOBILIZAÇÃO FOLICULAR E FERTIILIDADE DE CAMUNDONGOS C57B16
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Orientador : PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
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MEMBROS DA BANCA :
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PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
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REMO DE CASTRO RUSSO
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JOAO HENRIQUE MOREIRA VIANA
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Data: 07/02/2022
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A procura pelas técnicas de reprodução assistida (ARTs) têm sofrido considerável aumento ao longo dos anos. Devido a isso, é de extrema importância a criação e aprimoramento de diferentes técnicas para atender aos diferentes tipos de infertilidade. Atualmente, a maturação in vitro (MIV) e a perfuração ovariana laparoscópica (LOD) têm sido amplamente utilizadas, no entanto, a literatura não traz trabalhos claros e concisos sobre o real efeito causado por essas técnicas na dinâmica folicular ovariana e seus resultados na fertilidade das fêmeas. Nesse sentido, o objetivo do presente trabalho foi investigar os efeitos da injúria tecidual decorrente da aspiração na dinâmica ovariana e mobilização folicular e em aspectos da fertilidade de camundongos C57Bl6. De maneira geral, os resultados indicam que a punção ovariana modifica a dinâmica folicular e oocitária, assim como os aspectos inflamatórios decorrentes dos procedimentos cirúrgicos. No entanto, os animais foram capazes de solucionar tais aspectos de forma eficaz, sendo que a gestação e os filhotes não foram afetados pela punção.
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The demand for assisted reproduction techniques (ARTs) has increased over the years. Due to this, it is extremely important to create and improve different techniques that are effective to different types of infertility. Currently, in vitro maturation (IVM) and laparoscopic ovarian perforation (LOD) have been used, however, the literature does not provide clear and concise studies on the real effect of technical results on ovarian follicular dynamics and fertility. In this sense, the aim of the present study was to investigate the effects of tissue injury resulting from aspiration on ovarian dynamics and follicular mobilization as well as aspects of fertility in C57Bl6 mice. Overall, the results indicate that ovarian puncture modifies follicular and oocyte dynamics, as well as inflammatory symptoms originating from surgical procedures. However, the animals were able to solve these aspects effectively, so that the gestation and offspring were not affected by the puncture.
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RAFAELA DE MELO BARRETO
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EFEITOS DA APLICAÇÃO DE BIOGEL DE COLÁGENO HETERÓLOGO PEPTAN ® (SUÍNO E BOVINO) NO REPARO DE LESÕES CUTÂNEAS EM CAMUNDONGOS
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Orientador : RAQUEL ALVES COSTA
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MEMBROS DA BANCA :
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ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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MARCOS AUGUSTO DE SÁ
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RAQUEL ALVES COSTA
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TATIANA CARLA TOMIOSSO
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Data: 24/02/2022
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A pele é constantemente exposta a estímulos provenientes do meio externo que podem proporcionar alguma injúria e interferir na sua função de barreira. Portanto, mecanismos garantem o reparo das feridas, mas alguns casos podem originar cicatrizes patológicas que envolvem, dentre outros fatores, função e estética prejudicada. Com isso, inúmeras terapias estão sendo desenvolvidas para melhorar a cicatrização. O colágeno é um biomaterial com potencial para ser utilizado porque é abundante, biocompatível, biodegradável e capaz de auxiliar a migração e proliferação celular, além de melhorar a deposição de matriz. O colágeno também pode ser capaz de influenciar a resposta imunológica por meio de receptores inibitórios e dos efeitos indiretos da tolerância que influenciam a fase inflamatória do reparo de lesões cutâneas. Portanto, o objetivo do trabalho foi produzir um biogel de colágeno heterólogo (PEPTAN®) e verificar sua aplicação tópica sobre a ferida no dia em a lesão foi realizada e sua influência na inflamação e na deposição de matriz extracelular durante o processo de fechamento de feridas na pele de camundongos Swiss. Primeiramente foi realizada a caracterização morfológica e fisico-química dos biogéis de colágeno. Foram produzidos os biogéis: PEPTAN 1[1], PEPTAN 1[2], PEPTAN 2[1] e PEPTAN 2[2], que se diferenciam de acordo com a fonte heteróloga, suína ou bovina, e duas diferentes massas moleculares. A caracterização morfológica por MEV mostrou que os grânulos de colágeno suíno e as gelatinas, suína e bovina, possuem formatos variados, mas a maioria apresenta um formato arredondado. Os grânulos de colágeno bovino apresentam formato filamentoso. Ao comparar o tamanho dos grânulos, têm-se que os colágenos suíno 5000, suíno 2000 e bovino 5000 apresentaram tamanhos estatisticamente semelhantes. O colágeno bovino 2000 apresentou grânulos menores quando comparado com o colágeno suíno 5000, entretanto, apresentou grânulos com tamanho semelhante aos colágenos suíno 2000 e bovino 5000. O tamanho dos grânulos de gelatina não apresentou diferenças com significância estatística. Os biogéis produzidos a partir destes biomateriais eram estruturados e porosos, sendo que os poros se formavam a partir de placas que se sobrepunham. Ao comparar o tamanho dos poros, foi observado que o biogel PEPTAN 1[2] possui poros maiores quando comparado com o biogel PEPTAN 2[2]. Os demais biogéis possuem poros de tamanhos semelhantes. A análise de DRX mostrou que os peptídeos de colágeno e as gelatinas mantêm a estrutura helicoidal do colágeno. Estes dados foram confirmados com a análise de AFM, onde foi possível observar a formação das fibras de colágeno. E por fim, a análise elementar por EDS demonstrou que em todos os colágenos e gelatinas utilizados para a produção dos biogéis detectaram C, O e N, sendo C em maior quantidade, seguida do O e N, componentes típicos de proteínas. Para avaliar os efeitos da aplicação tópica dos biogéis de colágeno heterólogo PEPTAN® no reparo de feridas cutâneas, foram realizadas análises in vivo. O modelo experimental consistiu na realização de duas lesões excisionais e uma lesão incisional na pele do dorso, sob anestesia. Em seguida, foi realizado o tratamento de acordo com o grupo experimental. O micropore que mantinha o tratamento tópico nas lesões permaneceu por 5 dias. Os animais foram eutanasiados 7 e 60 dias após a lesão e a cicatrização foi analisada macro e microscópicamente após coloração com H&E, Azul de Toluidina e Tricrômico de Gomori. Nas lesões incisionais, macroscopicamente aos 7d, o grupo PEPTAN 1[1] apresentou uma lesão esteticamente melhor, redução de fibroblastos nos grupos PEPTAN 2[1] e PEPTAN 2[2] , redução de mastócitos no grupo PEPTAN 1[2] quando comparado com o grupo PEPTAN 2[1] e Aos 60d, as lesões incisionais dos grupos PEPTAN 1[1] e PEPTAN 1[2] apresentam cicatrizes mais claras e esteticamente melhores, quando comparadas com o salina. As análises histomorfométricas demonstram que o grupo PEPTAN 2[2] apresentou uma maior deposição quando comparado com o grupo Salina. Nas lesões excisionais, aos 7d, o grupo PEPTAN 1[2] apresentou uma menor área, ao passo que o grupo PEPTAN 1[1] apresentou uma maior área. Microscopicamente, a análise quantitativa não mostrou diferença estatística na contagem de leucócitos e mastócitos. Foi observado que o grupo PEPTAN 2[1] obteve um maior número de fibroblastos, quando comparado aos grupos PEPTAN 1[2] e PEPTAN 2[2]. Aos 60d, os grupos PEPTAN 1[1] e PEPTAN 1[2] apresentaram uma melhor deposição de colágeno quando comparado com o grupo Salina. O grupo Salina apresentou uma área de transição entre a lesão e a derme adjacente mais marcada e perceptível. Ao passo que os grupos PEPTAN 1[1] e PEPTAN 1[2] apresentaram essa transição mais suave. Concluímos que a aplicação de um curativo contendo o scaffold de colágeno heterólogo PEPTAN® melhora a cicatrização de lesões cutâneas, com um melhor remodelamento da matriz extracelular.
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The skin is constantly exposed to stimuli from the external environment that can cause some injury and interfere with its barrier function. Therefore, mechanisms guarantee the repair of wounds, but some cases can cause pathological scars that involve, among other factors, impaired function and aesthetics. As a result, numerous therapies are being developed to improve healing. Collagen is a biomaterial with potential to be used because it is abundant, biocompatible, biodegradable and capable of aiding cell migration and proliferation, in addition to improving matrix deposition. Collagen may also be able to influence the immune response through inhibitory receptors and the indirect effects of tolerance that influence the inflammatory phase of skin lesion repair. Therefore, the objective of this work was to produce a heterologous collagen biogel (PEPTAN®) and verify its topical application on the wound on the day the injury was performed and its influence on inflammation and extracellular matrix deposition during the wound closure process. in the skin of Swiss mice. First, the morphological and physicochemical characterization of collagen biogels was performed. Biogels were produced: PEPTAN 1[1], PEPTAN 1[2], PEPTAN 2[1] and PEPTAN 2[2], which differ according to the heterologous source, porcine or bovine, and two different molecular weights. Morphological characterization by SEM showed that porcine collagen granules and gelatins, porcine and bovine, have different shapes, but most have a rounded shape. Bovine collagen granules have a filamentous shape. When comparing the size of the granules, the porcine collagen 5000, porcine 2000 and bovine 5000 presented statistically similar sizes. Bovine collagen 2000 presented smaller granules when compared to porcine collagen 5000, however, it presented granules with a similar size to porcine collagen 2000 and bovine collagen 5000. The size of gelatin granules did not show statistically significant differences. The biogels produced from these biomaterials were structured and porous, with the pores formed from overlapping plates. When comparing the pore size, it was observed that the PEPTAN 1[2] biogel has larger pores when compared to the PEPTAN 2 biogel[2]. The other biogels have pores of similar sizes. XRD analysis showed that collagen peptides and gelatins maintain the helical structure of collagen. These data were confirmed with the analysis of AFM, where it was possible to observe the formation of collagen fibers. Finally, the elemental analysis by EDS showed that in all collagens and gelatines used for the production of biogels, C, O and N were detected, with C being the greatest amount, followed by O and N, typical components of proteins. To evaluate the effects of topical application of PEPTAN® heterologous collagen biogels on skin wound repair, in vivo analyzes were performed. The experimental model consisted of performing two excisional lesions and an incisional lesion on the skin of the back, under anesthesia. Then, the treatment was performed according to the experimental group. The micropore that maintained the topical treatment on the lesions remained for 5 days. The animals were euthanized 7 and 60 days after the injury and the healing was analyzed macro and microscopically after staining with H&E, Toluidine Blue and Gomori Trichrome. In the incisional lesions, macroscopically at 7d, the PEPTAN 1[1] group presented an aesthetically better lesion, reduction of fibroblasts in the PEPTAN 2[1] and PEPTAN 2[2] groups, reduction of mast cells in the PEPTAN 1[2] group when compared with the PEPTAN 2[1] group and At 60d, the incisional lesions of the PEPTAN 1[1] and PEPTAN 1[2] groups present clearer and esthetically better scars when compared to saline. The histomorphometric analysis shows that the PEPTAN 2[2] group showed a higher deposition when compared to the Saline group. In excisional lesions, at 7d, the PEPTAN 1[2] group presented a smaller area, while the PEPTAN 1[1] group presented a larger area. Microscopically, quantitative analysis showed no statistical difference in leukocyte and mast cell counts. It was observed that the PEPTAN 2[1] group had a higher number of fibroblasts when compared to the PEPTAN 1[2] and PEPTAN 2[2] groups. At 60d, the PEPTAN 1[1] and PEPTAN 1[2] groups showed better collagen deposition when compared to the Saline group. The saline group presented a more marked and perceptible transition area between the lesion and the adjacent dermis. While the PEPTAN 1[1] and PEPTAN 1[2] groups showed this smoother transition. We conclude that the application of a dressing containing the PEPTAN® heterologous collagen scaffold improves the healing of skin lesions, with better remodeling of the extracellular matrix.
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ALISSON KENNEDY REZENDE
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EFEITOS SISTÊMICOS DA TOLERÂNCIA ORAL NO REPARO DE DEFEITO ÓSSEO DE RATOS WISTAR NAS FASES DE OSSIFICAÇÃO E REMODELAMENTO ÓSSEO
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Orientador : ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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MEMBROS DA BANCA :
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ALVARO CESAR DE OLIVEIRA PENONI
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ANTONIO CARLOS SHIMANO
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ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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RAQUEL ALVES COSTA
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Data: 22/07/2022
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Além de vitaminas, carboidratos e fibras, o milho presente em nossa dieta, oferece variedades proteicas tais como a zeína. Essa proteína, após o contato com o sistema imunológico via trato gastrointestinal, é capaz de induzir a tolerância imunológica antigênica. Trabalhos vêm demonstrando que as reexposições de proteínas previamente ingeridas podem melhorar o reparo de feridas cutâneas, com diminuição de granulomas, entre outros efeitos sistêmicos. Contudo, ainda não há registros dos efeitos tolerogênicos sistemáticos da tolerância oral no reparo do tecido ósseo pós lesão. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos sistêmicos da proteína zeína tolerizada e reexposta por via parenteral no processo de reparo ósseo (28 e 45 dias) pós osteotomia em tíbias de ratos. Foram utilizados 72 ratos Wistar machos, com 12 semanas de idade, sendo divididos em três grupos experimentais, com aplicação via i.p. de: Salina (GS), Adjuvante (Al(OH)3) (GA) e Zeína associada ao adjuvante (GZ). Realizou-se osteotomia de 2mm nas tíbias direitas, e nos tempos experimentais de 28 e 45 dias pós defeito análises histomorfométricas, densitometria óssea (DMO) e testes biomecânicos foram executados. O monitoramento de peso tanto ponderal como das tíbias osteomizadas não demonstrou alteração entre os grupos. Já na análise da DMO observamos diferenças significativas entre os grupos GS e GA. Já entre os tempos experimentais do GZ não houve diferença, sugerindo que em 28o dia pós defeito a mineralização óssea é maior. O ensaio biomecânico de cisalhamento realizado nas tíbias direitas apontou diferença significativa, apenas na variável força máxima do GZ, indicando que em 45 dias pós defeito o tecido tornou-se mais resistente a forças mecânicas externas. Na avaliação histológica observamos aceleração no processo de reparo no GZ em relação aos demais grupos no período de 28 dias pós defeito e similaridade entre todos os grupos no período de 45 dias pós defeito. Os resultados do presente trabalho demonstram a ação benéfica e sistêmica da tolerância oral, pós imunização por proteína previamente ingerida, nas fases de ossificação e remodelamento ósseo, sendo necessário mais estudos a fim de elucidar os mecanismos envolvidos e geração de novas formas terapêuticas futuras.
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In addition to vitamins, carbohydrates, and fiber, the corn present in our diet offers protein varieties such as zein. This protein, after contact with the immune system via the gastrointestinal tract, is capable of inducing immunological antigen tolerance. Studies have shown that re-exposures of previously ingested proteins can improve the repair of skin wounds, with a decrease in granulomas, among other systemic effects. However, there are still no records of systematic tolerogenic effects of oral tolerance on post-injury bone tissue repair. Therefore,
this study aimed to evaluate the systemic effects of zein protein tolerized and re- exposed parenterally on the bone repair process (28 and 45 days) after
osteotomy in rat tibiae. Twelve-week-old male Wistar rats were used and divided into three experimental groups, with i.p. application of Saline (GS), Adjuvant (Al(OH)3) (GA), and Zeine associated with the adjuvant (GZ). A 2 mm osteotomy was performed on the right tibiae, and at 28 and 45 days post defect histomorphometric analyses, bone densitometry (BMD), and biomechanical tests were performed. The weight monitoring of both the weight and the osteomized tibiae showed no changes between the groups. In the BMD analysis, we observed significant differences between the GS and GA groups. There was no difference between the experimental time of the GS, suggesting that bone mineralization is greater on day 28 after the defect. The biomechanical shear stress test performed on the right tibiae showed a significant difference only in the maximum force variable of the GS, indicating that at 45 days after the defect the tissue became more resistant to external mechanical forces. In the histological evaluation, we observed acceleration of the repair process in the ZMG compared to the other groups at 28 days post-defense and similarity between all groups at 45 days post-defense. The results of the present study demonstrate the beneficial and systemic action of oral tolerance, after immunization by previously ingested protein, in the phases of ossification and bone remodeling. Further studies are necessary to elucidate the mechanisms involved and to generate new future therapeutic forms.
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Graziele Mayra Santos Moreira
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Análise histomorfométrica do tecido cardiorrespiratório de ratos com doença de Parkinson treinados com exercícios físicos de alta intensidade
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Orientador : LILIAM MIDORI IDE
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MEMBROS DA BANCA :
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ANTONIO JOSE NATALI
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FLAVIA CARMO HORTA PINTO
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LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
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LILIAM MIDORI IDE
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Data: 22/07/2022
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Introdução: A Doença de Parkinson (DP) afeta o sistema cardiorrespiratório causando maior massa ventricular esquerda no coração e fraqueza muscular respiratória comparado aos indivíduos saudáveis. Objetivo: Analisar as alterações histomorfométricas do tecido cardíaco e dos músculos respiratórios, além do desempenho funcional dos ratos com DP submetidos ao Treinamento Intervalado de Alta Intensidade (TIAI). Materiais e Métodos: Foram utilizados 70 ratos Wistar, machos, com 40 dias de vida, distribuídos nos grupos com Parkinson (PA) e Sham (SH); subdivididos em grupos que realizaram o TIAI Antes da cirurgia (TIAIa); TIAI Depois da cirurgia (TIAId) e TIAI Antes e Depois da cirurgia (TIAIad). O exercício físico foi realizado antes e/ou após a indução da DP. Os ratos realizaram o exercício, 5 vezes na semana, por 25 minutos/dia, durante 4 ou 8 semanas. O desempenho funcional dos animais foi avaliado por meio dos testes passo em falso e barras paralelas. Para análise morfométrica do coração foi realizado o cálculo do peso relativo do coração, o diâmetro e a espessura do ventrículo esquerdo. A histoquímica da substância negra do mesencéfalo foi realizada pela coloração utilizando o método de Nissl. Os músculos do miocárdio, diafragma, intercostais e reto abdominal foram corados com Hematoxilina e Eosina (HE). O estudo da histomorfometria foi realizado com o programa Image J-Pro Plus para análise da área de seção transversal dos músculos e número de fibras musculares. A análise dos dados foi realizada com o programa estatístico GraphPad Prism 9.3, teste ANOVA one-way, seguido do post-hoc de Tukey (p<0,05). Resultados: A análise das patas traseiras com o teste de barras paralelas demonstrou que os animais treinados apresentaram melhora do desempenho funcional em comparação aos animais do grupo sedentário. A relação entre o peso corporal, o peso cardíaco e o número de cardiomiócitos não foi significativamente diferente nos animais PA e SH treinados. Houve aumento nas áreas dos músculos diafragma, intercostais e reto abdominal, nos grupos PA e SH treinados em relação aos sedentários. Conclusão: O TIAI proporcionou hipertrofia dos músculos respiratórios e do ventrículo esquerdo do coração, além de melhorar o desempenho funcional das patas traseiras dos animais com DP.
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Introduction: Parkinson's Disease (PD) affects the cardiorespiratory system causing greater left ventricular mass in the heart and respiratory muscle weakness compared to healthy individuals. Objective: Analyze the histomorphometric alterations of cardiac tissue and respiratory muscles, in addition to the functional performance of rats with PD submitted to TIAI. Materials and Methods: We used 70 male Wistar rats, 40 days old, divided into groups with Parkinson's (PA) and Sham (SH); subdivided into groups that performed High Intensity Interval Training Before Surgery (TIAIa); TIAI After Surgery (TIAId) and TIAI Before and After Surgery (TIAIad). Physical exercise was performed before and/or after PD induction. The rats performed the exercise, 5 times a week, for 25 minutes/day, for 4 or 8 weeks. The functional performance of the animals was evaluated by of false step and parallel bars tests. For morphometric analysis of the heart, the relative weight of the heart, diameter and thickness of the left ventricle were calculated. The histochemistry of the substantia nigra of the midbrain was performed using the Nissl method. Myocardial, diaphragm, intercostal and rectus abdominis muscles were stained with Hematoxylin and Eosin (HE). The histomorphometric study was performed with the Image J program to analyze the cross-sectional area of the muscles and the number of muscle fibers. Data analysis was performed using the GraphPad Prism 9.3 statistical program, one-way ANOVA test, followed by Tukey's post-hoc test (p<0.05). Results: The analysis of the hind legs with the parallel bars test showed that the trained animals showed improvement in functional performance compared to the animals in the sedentary group. The relationship between the body weight, heart weight and number of cardiomyocytes showed no significant difference in PA and SH trained animals. There was an increase in the areas of the diaphragm, intercostal and rectus abdominis muscles in the PA and SH trained groups compared to the sedentary ones. Conclusion: The TIAI provided hypertrophy of the respiratory muscles and left ventricle of the heart, in addition to improving the functional performance of the hind legs of animals with PD.
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MARCIA REIMOL DE ANDRADE
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Efeitos do exercício físico na escada em diferentes intensidade na placa de crescimento e no músculo sóleo de ratos jovens
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Orientador : LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
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MEMBROS DA BANCA :
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ALESSANDRO DE OLIVEIRA
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FLAVIA CARMO HORTA PINTO
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IZABEL REGINA DOS SANTOS COSTA MALDONADO
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LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
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Data: 26/07/2022
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Introdução: O exercício físico ajuda na prevenção de doenças cardiovasculares, diabetes e obesidade, sendo sua prática estimulada desde a infância, inclusive em atividades competitivas. Sendo assim, entende-se a importância da investigação dos efeitos do exercício físico de alta e média intensidade com carga na escada nas fibras musculares e na placa epifisária de ratos jovens, identificando seus benefícios e prejuízos. Objetivo: Avaliar os efeitos do exercício físico de alta e média intensidade na escada com carga na placa de crescimento e nas fibras do músculo sóleo em ratos jovens. Metodologia: Foi realizada escalada com peso na cauda em ratos Wistar jovens divididos em três grupos de 8 animais cada: controle, treino de alta intensidade e treino de média intensidade. As características de interesse para a placa de crescimento foram a área de contagem de células, o número de células por zona e a espessura da placa de crescimento. No músculo sóleo, foi realizado o cálculo da área das fibras musculares e o número de fibras para avaliação de hipertrofia muscular e até hiperplasia. Foi realizada a coloração com Hematoxilina-Eosina (HE) para o músculo e a placa de crescimento e com tricrômico de Gomori para coloração da placa de crescimento. Para a análise estatística, foi aplicado o teste de normalidade de Shapiro-Wilk para as distribuições das médias de cada grupo, e foi realizada ANOVA de única via com pós-teste de Tukey, considerando um nível de significância de p<0,005. Resultados: Foi identificada uma diminuição da espessura média da placa de crescimento e o aumento da área das fibras musculares esqueléticas do músculo sóleo nos grupos treinados em comparação ao grupo controle (p<0,005). A placa de crescimento apresentou menor espessura e celularidade nos grupos de treino físico, evidenciando efeitos diferentes do exercício físico com carga na placa de crescimento e no músculo sóleo. Conclusão: Conclui-se que ocorreram efeitos diferentes do exercício físico de alta e média intensidade na hipertrofia do tecido muscular e na placa de crescimento, evidenciando a necessidade de uma investigação mais aprofundada em relação às consequências para o crescimento de ratos jovens.
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Introduction: Physical exercise assists in the prevention of cardiovascular diseases, diabetes, and obesity, and its practice is encouraged since childhood, including in competitive activities. Thus, it is important to investigate the effects of high and medium-intensity physical exercise with weights on the stairs on muscle fibers and the epiphyseal plate of young rats, identifying their benefits and disadvantages. Objective: To evaluate the effects of high and medium-intensity physical exercise with weights on the stairs on the growth plate and muscle fibers of the soleus muscle in young rats. Methods: Climbing exercises with weights attached to the tail were performed in young Wistar rats divided into three groups of 8 animals each: control, high-intensity training, and medium-intensity training. The characteristics of interest regarding the growth plate were the cell count area, the number of cells per zone, and growth plate thickness. In the soleus muscle, the muscle fiber area and the number of fibers were calculated to assess muscle hypertrophy and even hyperplasia. Staining with Hematoxylin-Eosin (HE) was carried out for the soleus muscle and the growth plate, while Gomori’s trichrome was used for growth-plate staining. For the statistical analysis, the Shapiro-Wilk normality test was applied to assess the distributions of the means of each group, and one-way ANOVA was performed using Tukey’s posttest, considering a significance level of p<0.005. Results: A decrease in mean growth plate thickness and an increase in the area of the skeletal muscle fibers of the soleus muscle were identified in the trained groups compared to the control group (p<0.005). The growth plate showed lower thickness and cellularity in the physical training groups, evidencing different effects of physical exercise with weights on the growth plate and soleus muscle. Conclusion: It can be concluded that different effects occurred with high and medium-intensity physical exercise on muscle tissue hypertrophy and on the growth plate, highlighting the need for further investigation concerning the consequences on the growth of young rats.
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Silvana Venâncio da Silva
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O EFEITO DO EXERCÍCIO FÍSICO DE ALTA INTENSIDADE NA DENSIDADE NEURONAL E EXPRESSÃO DE ASTRÓCITOS ANTES E DEPOIS DA INDUÇÃO DA DOENÇA DE PARKINSON EM RATOS
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Orientador : LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
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MEMBROS DA BANCA :
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ETEL ROCHA VIEIRA
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ITA DE OLIVEIRA SILVA
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LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
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PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
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Data: 29/07/2022
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A Doença de Parkinson (DP) acomete os neurônios dopaminérgicos localizados na parte compacta da substância negra. A prática de atividade física de resistência é uma intervenção não farmacológica que vem sendo testada no tratamento da DP. Assim, o presente projeto tem como objetivo investigar os efeitos dos exercícios de alta intensidade na escada na densidade neuronal e expressão de astrócitos no encéfalo de ratos com DP que exercitaram antes e depois da indução da doença. Foram utilizados 70 ratos, Wistar, sendo distribuídos da seguinte forma: 09 animais treinados antes da indução da DP (DP-Exa), 09 treinados depois da indução da DP (DP-Exd); 10 treinados antes e depois da indução da DP (DP-Exad) e 09 animais sedentários (DP-Sed). Os mesmos grupos foram distribuidos para o grupo sem DP (Sham). O treinamento físico de alta intensidade foi realizado na escada vertical antes e/ou após a indução da DP. Foi realizado durante 5 dias/semana, 30 a 45 minutos, por 4 semanas. A indução da DP foi realizada pelo modelo de lesão eletrolítica nas coordenadas: AP igual a -4,9, ML igual a 1,7 e DV igual a 8,1. O desempenho motor dos animais foi avaliado no início e no final do treinamento com os testes passo em falso, barras paralelas e campo aberto. No final do experimento, o encéfalo foi retirado para histoquímica, através da coloração pelo método de Nissl, e imunohistoquímica por expressão da Proteína Ácida Fibrilar Glial (GFAP) dos astrócitos da sustância negra e estriado. O estudo histomorfométrico foi realizado com o programa Image J para contagem dos neurônios e dos astrócitos (GFAP). Utilizou-se o programa GraphPad Prism 9.3, teste ANOVA one-way, seguido do post-hoc de Tukey (p<0,05). A análise demonstrou melhor desempenho dos animais que treinaram em comparação ao grupo sedentário, nos testes de barras paralelas e campo aberto. Os dados da contagem de neurônio no striatum, na substância negra e GFAP, nos animais dos grupos DP-Exa, Sham-Exa, DP-Exad e Sham-Exad apresentaram maior quantidade de neurônios e maior expressão de GFAP, quando comparados aos grupos DP-Exd, Sham-Exd, DP-Sed e Sham-Sed. Dessa forma foi possível concluir que os animais que realizaram o treinamento de alta intensidade antes, e antes e depois da indução da DP apresentaram maiores densidades de neurônios e astrócitos.
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Parkinson's disease (PD) affects dopaminergic neurons located in the pars compacta of the substantia nigra. The practice of resistance physical activity is a non-pharmacological intervention that has been tested in the treatment of PD. Thus, the present project aimed to investigate the effects of high-intensity exercise on neuronal density and astrocyte expression in the brain of rats with PD that exercised before and after disease induction. Seventy Wistar rats were used, distributed as follows: 09 animals trained before PD induction (DP-Exa), 09 trained after PD induction (DP-Exd); 10 trained before and after PD induction (DP-Exad) and 09 sedentary animals (DP-Sed). The same groups were distributed to the group without PD (Sham). High-intensity physical training was performed on the vertical ladder before and/or after PD induction. It was performed for 5 days/week, 30 to 45 minutes, for 4 weeks. PD induction was performed using the electrolytic lesion model in the coordinates: AP equal to -4.9, ML equal to 1.7 and DV equal to 8.1. The animals' motor performance was evaluated at the beginning and at the end of training with false step the test, parallel bars test and open field tests. At the end of the experiment, the brain was removed for histochemistry, staining by the Nissl method, and immunohistochemistry by expression of Glial Fibrillary Acid Protein (GFAP) from the substantia nigra and striatum. The histomorphometric study was performed with the Image J program for counting neurons and astrocytes (GFAP). The GraphPad Prism 9.3 program was used, one-way ANOVA test, followed by Tukey's post-hoc (p<0.05). The analysis showed better performance of the animals that trained compared to the sedentary group, in the parallel bars and open field tests. Data on neuron counts in the striatum, substantia nigra and GFAP in the animals of the DP-Exa, Sham-Exa, DP-Exad and Sham-Exad groups showed a greater number of neurons and greater expression of GFAP, when compared to the groups DP-Exd, Sham-Exd, DP-Sed and Sham-Sed. in conclusion, the groups of animals that performed high-intensity training before, before and after PD induction had higher densities of neurons and astrocytes.
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VICTORIA BESSA ALVARENGA LIMA
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Estudo do efeito de extratos do Ginkgo biloba e da quercetina no ducto deferente de camundongo
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Orientador : PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
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MEMBROS DA BANCA :
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ADOLFO GARCIA ERUSTES
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JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
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LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
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PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
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Data: 10/08/2022
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As plantas medicinais têm sido utilizadas por exercerem um papel importante no que tange à saúde humana. O Ginkgo biloba (GB) é uma das espécies de árvores mais antigas do mundo. O seu extrato (GBE) é utilizado na medicina tradicional chinesa há cerca de 5000 anos, para tratar diferentes enfermidades. Já foi demonstrado, o efeito relaxante do GBE em diferentes órgãos de musculatura lisa, porém, até onde foi possível pesquisar, ainda não há trabalhos que demonstrem o efeito de extrato de Ginkgo biloba no ducto deferente. O ducto deferente (DD) conduz os espermatozoides no momento da ejaculação. Esse evento ocorre pela contração das células musculares lisas do DD, que desempenham um papel importante na fase de emissão da ejaculação sendo que alterações nessa contração podem levar a distúrbios ejaculatórios, como a ejaculação precoce (EP). A EP é considerado o distúrbio sexual mais comum na população masculina, caracterizada pela ejaculação que sempre ou quase sempre ocorre antes ou cerca de 1 minuto após a penetração vaginal. Assim, nosso objetivo foi estudar o efeito dos extratos de GBE sob a contração do ducto deferente, uma vez que alterações nessa contração podem estar associadas à EP. Para isso, foram utilizados camundongos Swiss machos com 60 dias de vida. Os ductos deferentes (DD) foram isolados e imersos em líquido nutritivo em um sistema de banho de órgãos. A estimulação da contração, no DD, foi feita com cloreto de potássio (KCl 80mM). Após a estabilização da resposta contrátil, foram realizadas outras curvas de KCl, porém na presença de concentrações crescentes de um dos extratos de GBE (GB1 ou GB2) ou quercetina, um composto flavonoide presente no GB. Além disso, o efeito destas substâncias também foi testado na presença da nifedipina ou quercetina. Nossos resultados demonstram que os extratos de GB, a quercetina e a nifedipina são capazes de inibir os componentes fásico e tônico da contração induzida por KCl. O efeito de GB1, sob o componente tônico, foi potencializado na presença da nifedipina. O mesmo acontece quando analisamos o efeito do extrato GB2, porém na presença da quercetina. Quando comparamos o componente tônico entre os diferentes grupos experimentais (GB1: Nifedipina+GB1 ou GB2: Nifedipina+GB2 e Quercetina+GB2, observamos que, na presença da nifedipina ou da quercetina, a inibição da contração causada por GB1 ou GB2 foi potencializada quando comparamos com a inibição que ocorre somente na presença dos extratos. Diferente do que ocorreu na comparação dos grupos Quercetina e Nifedipina+Quercetina, onde houve um aumento no efeito inibitório da quercetina na presença da nifedipina sob ambos os componentes,fásico e tônico. Esses resultados indicam que GB1, GB2 e a quercetina são capazes de inibir algum mecanismo que pode estar envolvido com a geração da contração induzida
por KCl em ducto deferente de camundongo. Além disso, também sugerem que este efeito inibitório não é dependente exclusivamente da inibição dos canais de cálcio voltagem dependente. Assim, estes achados apontam que o GBE, bem como a quercetina, podem ser estratégias farmacológicas para o tratamento de EP.
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Medicinal plants have been used because they play an important role in human health. Ginkgo biloba (GB) is one of the oldest tree species in the world. Its extract (GBE) has been used in traditional Chinese medicine for about 5000 years to treat different ailments. It has been demonstrated, the relaxing effect of GBE in different organs of smooth muscle, however, as far as it has been possible to research, there are still no studies demonstrating the effect of Ginkgo biloba extract on the vas deferens. The vas deferens (DD) conducts the spermatozoa at the moment of ejaculation. This event occurs by the contraction of the smooth muscle cells of the DD, which play an important role in the emission phase of ejaculation, and changes in this contraction can lead to ejaculatory disorders, such as premature ejaculation (PE). PE is considered the most common sexual disorder in the male population, characterized by ejaculation that always or almost always occurs before or about 1 minute after vaginal penetration. Thus, our objective was to study the effect of GBE extracts on the contraction of the vas deferens, since alterations in this contraction may be associated with PE. For this purpose, 60-day-old male Swiss mice were used. The vas deferens (DD) were isolated and immersed in nutrient fluid in an organ bath system. Stimulation of contraction, in the DD, was done with potassium chloride (KCl 80mM). After stabilization of the contractile response, further KCl curves were performed, but in the presence of increasing concentrations of one of the EGB extracts (GB1 or GB2) or quercetin, a flavonoid compound present in GB. In addition, the effect of these substances was also tested in the presence of nifedipine or quercetin. Our results demonstrate that GB extracts, quercetin and nifedipine are able to inhibit the phasic and tonic components of KCl-induced contraction. The effect of GB1, under the tonic component, was potentiated, in the presence of nifedipine. The same happens when we analyzed the effect of GB2 extract, but in the presence of quercetin. When we compared the tonic component between the different experimental groups (GB1: Nifedipine+GB1 or GB2: Nifedipine+GB2 and Quercetin+GB2, we observed that, in the presence of nifedipine or quercetin, the inhibition of contraction caused by GB1 or GB2 was potentiated when compared with the inhibition that occurs only in the presence of the extracts. Unlike when comparing the Quercetin and Nifedipine+Quercetin groups, where there was an increase in the inhibitory effect of quercetin in the presence of nifedipine under both phasic and tonic components. These results indicate that GB1, GB2 and quercetin are able to inhibit some mechanism that may be involved with the generation
of KCl-induced contraction in mouse ductus deferens. Furthermore, they also suggest that this inhibitory effect is not solely dependent on inhibition of voltage-dependent calcium channels. Thus, these findings point out that GBE as well as quercetin may be pharmacological strategies for the treatment of PE.
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Elisangela Elduina Ferreira
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Efeitos do uso de extrato etanólico e da fração hidroetanólica do fruto maduro de Solanum lycocarpum no processo de cicatrização de feridas cutâneas em camundongos
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Orientador : FLAVIA CARMO HORTA PINTO
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MEMBROS DA BANCA :
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FLAVIA CARMO HORTA PINTO
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PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
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LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
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PAULA VIEIRA TEIXEIRA VIDIGAL
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Data: 22/08/2022
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As espécies vegetais apresentam-se como uma rica fonte para a descoberta de princípios ativos e desenvolvimento de novas terapêuticas. A espécie Solanum lycocarpum A.St.-Hil apresenta efeitos antioxidantes, antiinflamatório e antimicrobiano já confirmados em alguns modelos experimentais. Além disso, diversos fitoconstituintes presentes nos extratos utilizados foram encontrados em outras espécies do gênero, como alguns compostos fenólicos, que foram relacionados aos efeitos de melhoria do processo de cura, com efeitos individuais ou sinérgicos sobre uma ou mais etapas da cicatrização de feridas. O projeto de pesquisa teve como objetivo analisar os efeitos do uso de extrato etanólico e da fração hidroetanólica do fruto maduro de Solanum lycocarpum no processo de cicatrização de feridas cutâneas em camundongos. Setenta e dois animais foram distribuídos de forma aleatória em três grupos, sendo um Grupo Controle que recebeu aplicação tópica de solução salina fisiológica, um grupo tratado com extrato etanólico e um grupo tratado com a fração hidroetanólica do fruto maduro de Solanum lycocarpum. Cada grupo foi subdividido em quatro outros subgrupos conforme o período de tratamento: 1, 5, 7 e 21 dias, com n=6 em cada subgrupo. Para confecção das feridas excisionais foi utilizado um punch metálico dermatológico, com 7 mm de diâmetro. Foram feitas avaliações macroscópicas de cada lesão, diariamente, para verificar a presença de sinais inflamatórios (edema, hiperemia), presença de crostas e secreções, e para o cálculo da taxa de contração das feridas. Decorridos 1, 5, 7 ou 21 dias após a confecção da lesão excisional, os animais foram eutanasiados por dose letal de anestésicos. Um fragmento contendo a ferida foi retirado, clivado e fixado em solução de formol a 10% neutro tamponado. Posteriormente, o material foi processado histologicamente e corado por métodos histológicos e histoquímicos, para avaliação histopatológica e morfométrica do infiltrado inflamatório, dos fibroblastos, da reepitelização e da deposição de colágeno, após tratamento tópico diário com extrato etanólico do fruto maduro de Solanum lycocarpum e da sua fração hidroetanólica. Os resultados mostram que macroscopicamente esses tratamentos não interferiram no fechamento das feridas excisionais, ao longo dos 21 dias. A aplicação tópica de extrato etanólico do fruto maduro de Solanum lycocarpum reduziu o infiltrado inflamatório e as áreas de edema, após 1, 5 ou 7 dias de tratamento. Não foram observadas diferenças na contagem de fibroblastos, mastócitos e vasos sanguíneos. Nos grupos tratados, o processo de remodelamento mostrou-se em andamento, no entanto, nota-se uma melhor evolução no grupo que recebeu extrato etanólico, onde os epitélios estavam mais semelhantes ao das áreas sem lesão.
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Plant species are a rich source for the discovery of active principles and the development of new therapies. The species Solanum lycocarpum A.St.-Hil has antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial effects confirmed in some experimental models. In addition, several phytochemicals present in the extracts used were found in other species of the genus, such as some phenolic compounds, which were related to the effects of improving the healing process, with individual or synergistic effects on one or more stages of wound healing. The research project aimed to analyze the effects of the use of ethanolic extract and the hydroethanolic fraction of the ripe fruit of Solanum lycocarpum on the healing process of skin wounds in mice. Seventy-two animals were randomly divided into three groups, a Control Group that received topical application of physiological saline solution, a group treated with ethanol extract and a group treated with the hydroethanolic fraction of the ripe fruit of Solanum lycocarpum. Each group was subdivided into four other subgroups according to the treatment period: 1, 5, 7 and 21 days, with n=6 in each subgroup. To make the excisional wounds, a metallic dermatological punch, 7 mm in diameter, was used. Macroscopic evaluations of each lesion were performed daily to verify the presence of inflammatory signs (edema, hyperemia), the presence of crusts and secretions and to calculate the rate of contraction of the wounds. After 1, 5, 7 or 21 days after the excisional lesion, the animals were euthanized by a lethal dose of anesthetic. A fragment containing the wound was removed, cleaved and fixed in a 10% neutral buffered formalin solution. Subsequently, the material was histologically processed and stained by histological and histochemical methods, for histopathological and morphometric evaluation of the inflammatory infiltrate, fibroblasts, re-epithelialization and collagen deposition, after daily topical treatment with ethanolic extract of the ripe fruit of Solanum lycocarpum and its hydroethanolic fraction. The results show that macroscopically the treatments did not interfere with the closure of excisional wounds over the 21 days. Topical application of ethanolic extract from the ripe fruit of Solanum lycocarpum reduced the inflammatory infiltrate and areas of edema after 1, 5 or 7 days of treatment. No differences were observed in fibroblast, mast cell and blood vessel counts. In the treated groups, the remodeling process was in progress, however, a better evolution was observed in the group that received ethanol extract, where the epithelium was more similar to that of the areas without lesion.
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JUAN FILLIPE DA SILVA MONTEIRO
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Banca Fechada.
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Orientador : RAQUEL ALVES COSTA
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MEMBROS DA BANCA :
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GISELE VIANA DE OLIVEIRA
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CLAUDIA ROCHA CARVALHO
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ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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RAQUEL ALVES COSTA
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Data: 06/12/2022
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Banca fechada.
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Banca fechada.
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