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Dissertações |
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Bruna Cristina Franco
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Estudo do efeito do extrato acetato de etila de Celtis iguanaea na contração do ducto deferente de camundongo.
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Orientador : PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
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MEMBROS DA BANCA :
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ADOLFO GARCIA ERUSTES
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PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
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PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
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RENE OLIVEIRA DO COUTO
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Data: 02/02/2024
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A ejaculação precoce (EP) é uma disfunção sexual que acomete uma grande parcela da população masculina no mundo todo e os tratamentos disponíveis causam diversos efeitos adversos. As plantas medicinais têm sido utilizadas por exercerem um papel importante na saúde humana e o Celtis iguanaea (CI) apresenta efeito gastroprotetor e anti-inflamatório, porém ainda não foi demonstrado seu efeito no ducto deferente (DD). O objetivo deste trabalho foi verificar se esta espécie relaxa o DD, além de tentar elucidar o seu mecanismo de ação. O efeito de doses crescentes de CI, na presença e na ausência, de nifedipina, foi testado, sob a contração do DD de camundongos, estimulada por cloreto de potássio (KCl) ou adrenalina. Os experimentos foram realizados em um sistema de banho de órgãos, onde a contração foi registrada pelo hardware PowerLab e analisada pelo software LabChart. As respostas foram medidas considerando as amplitudes de contração de cada componente. O efeito de CI foi analisado pelo IC 50 (logaritmo negativo da concentração da droga que produz 50% do efeito inibitório máximo). Celtis iguanaea, apresentou efeito inibitório tanto no componente fásico como no tônico da contração induzida por KCl e adrenalina, sendo o componente tônico estatisticamente mais sensível à ação de CI. O efeito de CI, nos componentes fásico e tônico, na presença de nifedipina, um bloqueador clássico dos canais de cálcio, foi potencializado, quando a contração foi induzida pelo KCl. Já na contração induzida pela adrenalina, o efeito inibitório, nos componentes fásico e tônico, na presença da nifedipina, foi mantido. Esses resultados indicam que CI é capaz de inibir algum mecanismo envolvido na sinalização da contração do DD. Esses achados demonstram o efeito de Celtis iguanaea e contribuem para elucidação do seu mecanismo de ação e sua possível utilização no tratamento da ejaculação precoce.
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Premature ejaculation (PE) is a sexual dysfunction that affects a large proportion of the male population worldwide and the available treatments cause various side effects. Medicinal plants have been used because they play an important role in human health and Celtis iguanaea (CI) has a gastroprotective and anti-inflammatory effect, but its effect on the vas deferens (DD) has not yet been demonstrated. The aim of this study was to see if this species relaxes the DD, as well as trying to elucidate its mechanism of action. The effect of increasing doses of IC, in the presence and absence of nifedipine, was tested on the contraction of the DD of mice, stimulated by potassium chloride (KCl) or adrenaline. The experiments were carried out in an organ bath system, where the contraction was recorded using PowerLab hardware and analyzed using LabChart software. The responses were measured considering the contraction amplitudes of each component. The IC effect was analyzed by the IC50 (negative logarithm of the drug concentration that produces 50% of the maximum inhibitory effect). Celtis iguanaea showed an inhibitory effect on both the phasic and tonic components of the contraction induced by KCl and adrenaline, with the tonic component being statistically more sensitive to the action of IC. The effect of IC on the phasic and tonic components in the presence of nifedipine, a classic calcium channel blocker, was potentiated when the contraction was induced by KCl. In adrenaline-induced contraction, the inhibitory effect on the phasic and tonic components in the presence of nifedipine was maintained. These results indicate that CI is capable of inhibiting some mechanism involved in DD contraction signaling. These findings demonstrate the effect of Celtis iguanaea and contribute to elucidating its mechanism of action and its possible use in the treatment of premature ejaculation.
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EMANUEL VICTOR BASTOS DA FONSECA
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DESENVOLVIMENTO DE BIOMATERIAL A BASE DE POLÍMEROS NATURAIS ASSOCIADO A NANOTUBOS DE ÓXIDO DE TITÂNIO (TIO2) PARA REPARO ÓSSEO
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Orientador : ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIELA LEITE FABRINO
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ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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MICHELE MUNK PEREIRA
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REBECCA VASCONCELLOS BOTELHO DE MEDEIROS
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Data: 01/03/2024
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Enxertos ósseos que imitam as propriedades da matriz extracelular (MEC) são bem conhecidos por sua capacidade de proporcionar a regeneração óssea. Biomateriais podem ser projetados com uma estrutura porosa que imita a arquitetura natural do tecido ósseo, promovendo a migração e a diferenciação celular. O desenvolvimento de biomateriais pode ser realizado por meio da junção de polímeros e associação com nanopartículas, gerando um compósito com propriedades superiores aos dos componentes isolado. Portanto, com o objetivo de obter compósitos com propriedade melhoradas, este trabalho desenvolveu scaffolds de colágeno (2 mg) com variações de alginato (1 mg, 2 mg e 4 mg) associados à três concentrações de NPs deTiO2 (2 μg, 4 μg e 6 μg). Os scaffolds foram preparados a partir de colágeno tipo I e alginato reticulado com ClCa2 usando a técnica de solução de casting e liofilização. Os scaffolds apresentaram a forma cilíndrica com cerca de 10 mm de comprimento. As análises de FTIR informam que as moléculas de colágeno se mantiveram íntegras, entretanto foi constatado leves deslocamentos dos grupos amidas I e II devido a interação com os grupos C=O do alginato. Os ensaios de AFM – QNM destacaram aumento de Módulo de Young (ME) em proporções equivalentes de alginato e colágeno, o grupo 2:2 - 2 μg obteve o maior ME, 3,52 ± 0,095. Nessa proporção o tamanho médio dos poros foi de 24,6 ± 210 μg e a taxa de degradação foi de 96% (2:2 - 4 μg) e 97% (2:2 – 6 μg). Nos ensaios in vitro foram utilizadas células tronco mesenquimais advindas do tecido adiposo humano (hASCs). Todos os scaffolds apresentaram capacidade de viabilidade, com destaque para a proporção com maiores concentrações de alginato (4:2) que demonstrou os maiores resultados ao final do 3o dia. A avaliação dos nódulos de mineralização, porém, indicou baixa mineralização nos grupos de 4:2. E, novamente, os grupos com proporções 2:2 apresentaram maiores áreas mineralizadas. Os resultados deste estudo contribuem para o avanço no desenvolvimento de scaffolds biomiméticos para regeneração óssea. As descobertas fornecem uma base sólida para futuras pesquisas e aplicações clínicas no campo da engenharia de tecidos e medicina regenerativa.
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Bone grafts that mimic the properties of the extracellular matrix (ECM) are well- known for their ability to facilitate bone regeneration. Biomaterials can be designed
with a porous structure that mimics the natural architecture of bone tissue, promoting cellular migration and differentiation. The development of biomaterials often involves combining polymers and incorporating nanoparticles to create composites with superior properties compared to individual components. In the pursuit of enhanced composites, this study focused on developing collagen scaffolds (2 mg) with varying amounts of alginate (1 mg, 2 mg, and 4 mg), combined with three concentrations of TiO2 nanoparticles (2 μg, 4 μg, and 6 μg). The scaffolds were prepared using type I collagen and alginate cross-linked with CaCl2 through the casting and lyophilization technique, resulting in cylindrical structures approximately 10 mm in length. FTIR analyses revealed the integrity of collagen molecules, with slight shifts in the amide I and II groups due to interactions with the C=O groups of alginate. AFM-QNM tests highlighted an increase in the Young's Modulus (YM) in proportions equivalent to alginate and collagen, with the 2:2 - 2 μg group achieving the highest YM at 3.52 ± 0.095. In this proportion, the average pore size was 24.6 ± 2.10 μg, and the degradation rate
was 96% (2:2 - 4 μg) and 97% (2:2 – 6 μg). In vitro assays utilized human adipose- derived mesenchymal stem cells (hASCs), demonstrating viability across all
scaffolds. The 4:2 proportion, with higher concentrations of alginate, stood out with the best results by the end of the 3rd day. However, mineralization assessments indicated lower mineralization in the 4:2 groups, while once again, the 2:2 groups showed greater mineralized areas. The outcomes of this study contribute to advancing the development of biomimetic scaffolds for bone regeneration. These findings establish a solid foundation for future research and clinical applications in the fields of tissue engineering and regenerative medicine.
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Janaina Domingas Alves
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“AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE AGUDA E SUBCRÔNICA DE Β-CARBONÍLICOS RECÉM-SINTETIZADOS”,
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Orientador : PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
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MEMBROS DA BANCA :
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ANA BEATRIZ GRAÇA DUARTE
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FABIO VIEIRA DOS SANTOS
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PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
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Data: 04/03/2024
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Alcalóides são intrigantes moléculas, das quais as mais simples apresentam peculiaridades químicas e podem ser adicionadas à lista de moléculas com alto potencial farmacêutico. Pesquisas realizadas com a finalidade de entender melhor tais compostos têm possibilitado o desenvolvimento de fármacos direcionados a diversos alvos terapêuticos, sendo usados para o tratamento de enxaquecas, cefaleias, depressão, ansiedade, anestesia, bloqueio neurológico, doenças vasculares e cardíacas, infecções bacterianas, câncer, dentre outras. Nesse sentido, o grupo de pesquisa Núcleo de Pesquisa em Química Biológica (NQBio), sintetizou uma série de análogos de alcalóides β-carbolínicos não naturais a partir de triptamina e L-triptofano. De acordo com a citotoxicidade e seletividade contra células tumorais humanas em estudos realizados previamente in vitro, dois dos alcalóides (NQBio-006 e NQBio-021) foram escolhidos para a realização do presente estudo. O presente estudo foi realizado para avaliar a toxicidade aguda e subcrônica dos compostos NQBio-006 e NQBio-021 in vivo. Para isso, foram utilizados camundongos Swiss fêmeas (n=80), com 8 semanas de idade. Os animais foram divididos em 3 grupos (Controle n=12; NQBio-006 n=24 e NQBio-021 n=24) para estabelecer o modelo de toxicidade aguda, no qual uma dose única de 2.000, 300, 50 e 5 mg/kg de ambos os compostos foram administradas via gavagem a camundongos fêmeas. Já no estudo de toxicidade subcrônica, de acordo com a melhor resposta observada no teste de toxicidade aguda, apenas o alcalóide NQBio-006 foi administrado nas doses de 10, 100 e 1.000 mg/kg diariamente durante o período de 28 dias, sendo que os animais foram divididos em 2 grupos (Controle n=5 e NQBio-006 n=15). Foram observados sinais de toxicidade nos 5 minutos, 10 minutos, 20 minutos, 30 minutos e 60 minutos, bem como, 4 horas, 8 horas, 24 horas e 48 horas; durante 14 dias a partir da hora de administração do composto no teste de toxicidade aguda e 28 dias no teste de toxicidade subcrônica. Dados associados ao peso corporal, peso dos órgãos e os parâmetros associados à toxicidade, como eritrograma e plaquetograma, histopatologia e morfometria dos rins e fígado, peso do ovário e população folicular foram obtidos e analisados pelos testes D’Agostino-Pearson e t de student através do software Prism 8.0. Em relação ao teste de toxicidade aguda foram observadas diferenças significativas em todos os parâmetros avaliados, sendo que o composto NQBio-021 demonstrou maior toxicidade na maioria dos testes. Dessa forma, seguimos utilizando o composto NQBio-006 no teste de toxicidade subcrônica, sendo evidenciado pelas análises resultados promissores, de forma que com relação a toxicidade subcrônica os resultados não demonstraram diferenças significativas nos mesmos parâmetros avaliados. Dessa forma, foi possível concluir que o composto NQBio-006 apresenta baixa toxicidade e representa um importante fármaco para base de pesquisas relacionadas a tratamentos oncológicos.
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Alkaloids are intriguing molecules, the simplest of which have chemical peculiarities and can be added to the list of molecules with high pharmaceutical potential. Research carried out with the aim of better understanding these compounds has enabled the development of drugs associated to a wide range of therapeutic targets, being used to treat migraines, headaches, depression, anxiety, neurological block, vascular and cardiac diseases, bacterial infections, cancer, among others. In this sense, the research group “Núcleo de Pesquisa em Química Biológica (NQBio), Nesse sentido, o grupo de pesquisa Núcleo de Pesquisa em Química Biológica (Biosynthesized a series of unnatural β-carboline alkaloid analogs from tryptamine and L-tryptophan. According to the cytotoxicity and selectivity against human tumor cells in vitro, two of the alkaloids (NQBio-006 and NQBio-021) were taken to carry out the present study. The aim of this study was to evaluate the acute and subchronic toxicity of the compounds NQBio-006 e NQBio-021 in vivo. For this, female Swiss mice (n=80) with 8 weeks of age were usd. Animals were divided into 3 groups (Control n=12; NQBio-006 n=24 and NQBio-021 n=24) to the acute toxicity model establishment, in which a single dose of 2,000, 300, 50 and 5 mg/kg of both compounds were administered by gavage. For the subchronic toxicity test, according to the best response observed in the acute toxicity, only the NQBio-006 was administered at doses of 1,000, 100 and 10 mg/kg during a period of 28 days, for this test the animals were divided into 2 experimental groups (Control n=5 and NQBio-006 n= 15). Signals of toxicity were observed at 5, 10, 20, 30 and 6 minutes as well as 4, 8, 24 and 48 hours and during 14 days from the administration day for the acute study and for 28 days for the subchronic evaluation toxicity. Data related to body and organ weight and parameters associated with toxicity, such as erythrogram and platelet count, histopathology and morphometry of the kidneys and liver, ovarian weight and follicular population were obtained and analyzed using the D’Agostino-Pearson and t test through of Prism 8.0. software. In relation to the acute toxicity test, significant differences were observed in all the evaluated parameters, where the NQBio-021 demonstrated greater toxicity. Therefore, the NQBio-006 were used to perform the subchronic toxicity tests, with promising results being evidenced by the analysis, so that in the subchronic study, results did not demonstrate significant differences. In general, it was possible to conclude that the compound NQBio-006 has low toxicity and represents an important drug as a basis of research related to oncological treatments.
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FABIANA CIPRIANI GIAROLA
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Avaliação dos efeitos indiretos da tolerância oral após a aplicação tópica de biogel de colágeno associado a nanopartículas de ouro funcionalizadas com Ovalbumina no reparo de feridas de pele de camundongos
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Orientador : CLAUDIA ROCHA CARVALHO
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MEMBROS DA BANCA :
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CLAUDIA ROCHA CARVALHO
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ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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ISABELA BEATRIZ CABACINHA NÓBREGA
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RAQUEL ALVES COSTA
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Data: 05/07/2024
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A cicatrização de feridas permanece um desafio significativo tanto do ponto de vista clínico quanto social. O processo de reparo de feridas é intrincado, envolvendo múltiplos fatores que interagem ao longo do tempo, e qualquer falha em uma das etapas pode resultar em cicatrizes patológicas. A engenharia de tecidos tem avançado consideravelmente, especialmente no uso de biomateriais para terapias regenerativas. Estudos anteriores de nosso grupo de pesquisa, já demonstrou a eficácia de biomateriais como a matriz de colágeno (MC) e nanopartículas de ouro (AuNP) de tamanho 7nm no processo de cicatrização. Além disso, a tolerância oral tem se mostrado um método promissor e eficiente para o reparo de feridas. Neste estudo, investigamos um tratamento tópico que combina matriz de colágeno (MC) e nanopartículas de ouro (AuNP) funcionalizadas com ovalbumina (OVA), aliado ao efeito sistêmico de uma proteína administrada por via oral para melhorar a cicatrização de feridas cutâneas. Avaliamos diferentes grupos: controle (salina), animais não tolerados (NT) à ovalbumina (OVA), com aplicação tópica de nanopartículas de ouro (AuNP) isoladamente e conjugada a OVA, em conjunto com a matriz de colágeno (MC). Também foram incluídos animais tolerizados (Tol.) a ovalbumina, tratados apenas com nanopartículas de ouro (AuNP) e também conjugada a OVA e associado à matriz de colágeno (MC). Os resultados mostraram que o tratamento promoveu rápida reepitelização e formação de tecido de granulação vascularizado em 7 dias, e melhorou o remodelamento da cicatriz em 60 dias, apresentando uma neoderme com deposição de colágeno similar à pele intacta, com fibras de colágeno mais espessas e entrelaçadas na derme reticular. Concluímos que a combinação de tolerância oral e aplicação tópica de AuNP + OVA e aplicação tópica de AuNP + MC no dia da lesão, reduziram a inflamação. A aplicação tópica de AuNP foi capaz de estimular a angiogêse após 7 dias da lesão. O processo de remodelamento resultou em feixes de colágeno mais organizados nos tratamentos Tol. AuNP + OVA e AuNP + MC, embora a regeneração de anexos dérmicos não tenha sido observada. Em comparação às AuPs de tamanho 7nm estudadas anteriormente e a de 14nm abordada neste estudo, não foram observadas diferenças nos resultados obtidos
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Wound healing remains a significant challenge from both clinical and social perspectives. The wound repair process is intricate, involving multiple factors that interact over time, and any failure in one of the stages can result in pathological scarring. Tissue engineering has advanced considerably, especially in the use of biomaterials for regenerative therapies. Previous studies by our research group have demonstrated the efficacy of biomaterials such as collagen matrix (CM) and 7nm gold nanoparticles (AuNP) in the healing process. Additionally, oral tolerance has proven to be a promising and efficient method for wound repair. In this study, we investigated a topical treatment that combines collagen matrix (CM) and gold nanoparticles (AuNP) functionalized with ovalbumin (OVA), along with the systemic effect of a protein administered orally to enhance cutaneous wound healing. We evaluated different groups: control (saline), non-tolerized (NT) animals to ovalbumin (OVA), with topical application of gold nanoparticles (AuNP) alone and conjugated with OVA, in combination with collagen matrix (CM). We also included animals tolerized (Tol.) to ovalbumin, treated only with gold nanoparticles (AuNP) and also conjugated with OVA and associated with collagen matrix (CM). The results showed that the treatment promoted rapid reepithelialization and the formation of vascularized granulation tissue in 7 days, and improved scar remodeling in 60 days, presenting a neodermis with collagen deposition similar to intact skin, with thicker and more intertwined collagen fibers in the reticular dermis. We concluded that the combination of oral tolerance and topical application of AuNP + OVA and topical application of AuNP + CM on the day of injury reduced inflammation. The topical application of AuNP was able to stimulate angiogenesis 7 days after the injury. The remodeling process resulted in more organized collagen bundles in the Tol. AuNP + OVA and AuNP + CM treatments, although the regeneration of dermal appendages was not observed. Compared to the 7nm AuNPs previously studied and the 14nm ones addressed in this study, no differences in the results obtained were observed.
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TAYNA STEFANIA IDALINO MOREIRA
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ANÁLISE COMPARATIVA DE PARÂMETROS PULMONARES E SISTÊMICOS ENTRE DOIS COORTES DE PACIENTES DE COVID-19 SEVERO COM DESFECHOS DISTINTOS DE SOBREVIDA E ÓBITO QUANDO INTUBADOS EM UTI DURANTE A PANDEMIA ENTRE 2020 E 2021
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Orientador : REMO DE CASTRO RUSSO
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MEMBROS DA BANCA :
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ALBA OTONI COLLARES
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FRANK SILVA BEZERRA
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RAQUEL ALVES COSTA
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REMO DE CASTRO RUSSO
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Data: 22/07/2024
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Introdução: A COVID-19 causou uma emergência mundial de saúde. Com sua evolução para o estado grave, pacientes foram internados em UTI’s e alguns sobreviveram mas muitos morreram. No entanto, pouco se sabe sobre os preditores que distinguiam esses pacientes e os levaram a caminhos diferentes. Objetivo: Analisar se alterações nos exames de sangue complementares, dados espirométricos obtidos do ventilador mecânico, gasometria arterial, parâmetros ventilatórios e SCORE SOFA pode se tornar preditores para a complicação do quadro da COVID-19, e como consequência levar o paciente à óbito, entre dois cohorts de pacientes com desfecho distintos: os que convalesceram e os que evoluíram à óbito e o SCORE SOFA (SequentialOrganFailure Assessment) nos dias 1 e 7 de IOT dos pacientes sobreviventes e não sobreviventes. Métodos: Estudo observacional, realizado na unidade de terapia intensiva do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais, de maio de 2020 a abril de 2021. Foram incluídos pacientes adultos (≥ 18 anos) com COVID-19 confirmada por RT-PCR, sob ventilação mecânica invasiva. Os pacientes foram acompanhados até o desfecho (óbito ou alta hospitalar) e divididos em dois grupos (sobreviventes e não sobreviventes) para as análises comparativas. As amostras de sangue e mim-BAL , scores e dados clínicos foram coletadas em dois momentos diferentes: 1 o ou 2o dia (D1-2) e 5 o a 8o dia (D5-8) após a intubação orotraqueal. Resultados: Inicialmente os pacientes se distinguiam apenas na idade e score SOFA, sendo esses mais elevados no grupo de não sobreviventes. Não houve diferença na uréia e creatinina, sendo maior apenas a PCR. Nos parâmetros ventilatórios a resistência era maior no primeiro dia do grupo não sobrevivente.Já no sétimo dia a freqüência respiratória, PEEP e espaço morto se diferiam. Quando avaliamos a difusão e perfusão do sistema respiratório, a SaO2 era menor no D1 do grupo de pacientes NS e no D7 a FiO2, PaO2/FiO2, SpO2/FiO2 também se alteram. Já nos parâmetros gasométricos, a PaO2 e a SaO2 também continuam mais baixas nos pacientes NS enquanto a PaCO2 se eleva nos pacientes NS no D7 e o pH se torna mais ácido. O grupo NS apresenta no D7 uma plaquetopenia, enquanto leucócitos, neutrófilos e linfócitos não se diferem. Conclusão: Nossos resultados sugerem que a resistência pulmonar e a hipóxia podem ser um dos preditores que distinguiam os caminhos percurridos pelos
pacientes e subseentende que se tratadas inicialmente, poderá alterar a consequências e agravos da infecção, uma vez que, foi relatado que a Covid se inicia em órgão único, mas se espalha para todo o organismo.
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Introduction: The global health emergency caused by the novel coronavirus (COVID-19) has led to the admission of patients to intensive care units (ICUs) with varying outcomes. While some patients survived, many succumbed to the disease. However, the predictors that distinguished these patients and led them down different paths remain poorly understood. Objective: The objective of this study is to analyse whether changes in complementary blood tests, spirometry data obtained from the mechanical ventilator, arterial gasometry, ventilatory parameters and SCORE SOFA can become predictors for the complication of COIVD-19. It is hypothesised that these variables will be able to predict the outcome of the disease and, consequently, the patient's The objective was to ascertain whether there were any differences in the results of the SCORE SOFA (Sequential Organ Failure Assessment) on days 1 and 7 of OI (oxygenation index) between two cohorts of patients with different outcomes: those who recovered and those who died. Methods: The observational study was conducted in the intensive care unit of the Hospital das Clínicas of the Federal University of Minas Gerais between May 2020 and April 2021. The study included adult patients (≥18 years) with a confirmed diagnosis of COVID-19, who were undergoing invasive mechanical ventilation. Patients were followed up until the outcome (death or hospital discharge) and divided into two groups (survivors and non-survivors) for comparative analyses. Blood and me-BAL samples, scores and clinical data were collected at two different time points: day 1 or 2 (D1-2) and day 5 to 8 (D5-8) following orotracheal intubation. The objective of this study was to determine whether changes in certain laboratory tests, spirometry data obtained from the mechanical ventilator, arterial gasometry, ventilatory parameters, and the SCORE SOFA can be used as predictors for the development of complications associated with COVID-19. The study compared two cohorts of patients with different outcomes: those who recovered and those who died. The SCORE SOFA (Sequential Organ Failure Assessment) was evaluated on days 1 and 7 of OI (onset of illness) for surviving and non-surviving patients. Results: The patients were initially distinguished from one another solely by age and the Sequential Organ Failure Assessment (SOFA) score, which was higher in the non-survivor group. No differences were observed in urea and creatinine levels; however, only CRP was
higher. With regard to ventilatory parameters, it was observed that resistance was higher on the first day in the non-survivor group, while respiratory rate, PEEP and dead space differed on the seventh day. When the diffusion and perfusion of the respiratory system were assessed, it was observed that SaO2 was lower on D1 in the NS group, and that FiO2, PaO2/FiO2 and SpO2/FiO2 also exhibited changes on D7. With regard to gasometric parameters, it can be observed that PaO2 and SaO2 remain lower in NS patients, while PaCO2 rises in NS patients on D7 and pH becomes more acidic. The NS group shows thrombocytopenia on D7, while leucocytes, neutrophils and lymphocytes do not differ. Conclusion: The results indicate that pulmonary resistance and hypoxia may be among the predictors that distinguish the courses of action taken by patients. Consequently, if treated at an early stage, it is possible that the consequences and progression of the infection could be altered, given that it has been reported that the SARS-CoV-2 virus initially affects a single organ but subsequently spreads throughout the body.
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THALIA GIOVANA GUIMARÃES RIBEIRO
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Análise morfofuncional do pulmão de camundongos após exposição crônica ao Material Particulado (MP)
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Orientador : LUCIANO RIVAROLI
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MEMBROS DA BANCA :
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CLEO ALCANTARA COSTA LEITE
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ERIKA CRISTINA JORGE
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LUCIANO RIVAROLI
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RAQUEL ALVES COSTA
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Data: 22/08/2024
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A poluição atmosférica é uma preocupação crescente devido à disseminação do Material Particulado (MP), originado de diversas fontes, como queima de biomassa e poeira do solo, afetando a qualidade do ar nas áreas urbanas e contribuindo para o aumento das doenças respiratórias. Este estudo tem como objetivo investigar o efeito da exposição ao MP na morfofisiologia pulmonar de camundongos. Foram utilizados camundongos Balb/C divididos em 4 grupos (n=14 em cada grupo): Controle (C), Modelo Asmático (MA), contaminado com material particulado (MP) e modelo asmático exposto ao material particulado (MAMP). O material particulado foi investigado quanto à presença de microorganismos, além de avaliação da sua composição com DLS, Potencial Zeta, MEV-EDS e difração de Raio-X. Os grupos foram subdivididos para análises histológicas (n=6) e fisiológicas (n=8). A complacência pulmonar foi avaliada por meio de uma técnica inovadora, utilizando um ensaio com as propriedades mecânicas do órgão. A massa dos animais, bem como do pulmão,
fígado, rim esquerdo e baço foram aferidos e calculados os índices órgão- somático. Em ágar Sabouraud pela avaliação morfológica o MP apresentou
crescimento de dois tipos bacterianos e um tipo de fungo filamentoso. A difração de Raio-X indicou a presença predominante de Fe2O3 e Fe3O4, enquanto que na análise por Microscopia Eletrônica de Varredura com espectroscopia por energia dispersiva revelou a presença de outros compostos, como Al, Si, Se, Ca e C, a análise no DLS revelou que as partículas não tem estabilidade em fase aquosa (potencial Zeta -9,92±0,8 mV), com tamanhos médios de 1703,11±306,17 nm. Os resultados preliminares do ensaio sobre as propriedades mecânicas do pulmão revelaram maior aumento da tensão em resposta ao estiramento no grupo MAMP (com 7 mm de estiramento, 63,61±37,09 gf/g) em contraposição ao menor valor obtido (com 7 mm de estiramento, 10,38±7,26 gf/g. O tecido pulmonar dos animais submetidos ao modelo asmático e apenas à contaminação também apresentaram aumento da tensão em resposta ao estiramento (17,47±.9,73 gf/g e 35,23±19,89 gf/g, respectivamente com 7mm de estiramento). Já análise miogênica demonstra que A análise microbiológica comprovou a necessidade de esterilização do contaminante, as avaliações de composição e estrutura mostraram maior presença de ferro, como esperado para material oriundo de região siderúrgica e com tamanhos em escala micrométrica,
devido à agregação. A análise das propriedades mecânicas revelou a redução da complacência tanto nos animais asmáticos, quanto submetidos ao contaminante, demonstrando o comprometimento da distensibilidade e possível dano respiratório, que poderão ser corroboradas com dados histológicos.
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A poluição atmosférica é uma preocupação crescente devido à disseminação do Material Particulado (MP), originado de diversas fontes, como queima de biomassa e poeira do solo, afetando a qualidade do ar nas áreas urbanas e contribuindo para o aumento das doenças respiratórias. Este estudo tem como objetivo investigar o efeito da exposição ao MP na morfofisiologia pulmonar de camundongos. Foram utilizados camundongos Balb/C divididos em 4 grupos (n=14 em cada grupo): Controle (C), Modelo Asmático (MA), contaminado com material particulado (MP) e modelo asmático exposto ao material particulado (MAMP). O material particulado foi investigado quanto à presença de microorganismos, além de avaliação da sua composição com DLS, Potencial Zeta, MEV-EDS e difração de Raio-X. Os grupos foram subdivididos para análises histológicas (n=6) e fisiológicas (n=8). A complacência pulmonar foi avaliada por meio de uma técnica inovadora, utilizando um ensaio com as propriedades mecânicas do órgão. A massa dos animais, bem como do pulmão,
fígado, rim esquerdo e baço foram aferidos e calculados os índices órgão- somático. Em ágar Sabouraud pela avaliação morfológica o MP apresentou
crescimento de dois tipos bacterianos e um tipo de fungo filamentoso. A difração de Raio-X indicou a presença predominante de Fe2O3 e Fe3O4, enquanto que na análise por Microscopia Eletrônica de Varredura com espectroscopia por energia dispersiva revelou a presença de outros compostos, como Al, Si, Se, Ca e C, a análise no DLS revelou que as partículas não tem estabilidade em fase aquosa (potencial Zeta -9,92±0,8 mV), com tamanhos médios de 1703,11±306,17 nm. Os resultados preliminares do ensaio sobre as propriedades mecânicas do pulmão revelaram maior aumento da tensão em resposta ao estiramento no grupo MAMP (com 7 mm de estiramento, 63,61±37,09 gf/g) em contraposição ao menor valor obtido (com 7 mm de estiramento, 10,38±7,26 gf/g. O tecido pulmonar dos animais submetidos ao modelo asmático e apenas à contaminação também apresentaram aumento da tensão em resposta ao estiramento (17,47±.9,73 gf/g e 35,23±19,89 gf/g, respectivamente com 7mm de estiramento). Já análise miogênica demonstra que A análise microbiológica comprovou a necessidade de esterilização do contaminante, as avaliações de composição e estrutura mostraram maior presença de ferro, como esperado para material oriundo de região siderúrgica e com tamanhos em escala micrométrica,
devido à agregação. A análise das propriedades mecânicas revelou a redução da complacência tanto nos animais asmáticos, quanto submetidos ao contaminante, demonstrando o comprometimento da distensibilidade e possível dano respiratório, que poderão ser corroboradas com dados histológicos.
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SABRINA VIEIRA LIMA
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Trabalho em sigilo até que os direitos de propriedade intelectual relativos tenham sido devidamente protegidos pela UFSJ em âmbito nacional e internacional.
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Orientador : RAQUEL ALVES COSTA
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MEMBROS DA BANCA :
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CLAUDIA ROCHA CARVALHO
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ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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MICHELE MUNK PEREIRA
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RAQUEL ALVES COSTA
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Data: 23/08/2024
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Trabalho em sigilo até que os direitos de propriedade intelectual relativos tenham sido devidamente protegidos pela UFSJ em âmbito nacional e internacional.
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HELLEM DAYANE DE CARVALHO
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Trabalho em sigilo até que os direitos de propriedade intelectual relativos tenham sido devidamente protegidos pela UFSJ em âmbito nacional e internacional.
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Orientador : RAQUEL ALVES COSTA
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIELA LEITE FABRINO
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ISABELA BEATRIZ CABACINHA NÓBREGA
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RAQUEL ALVES COSTA
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Data: 30/08/2024
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GUSTAVO AMORIM ALVES
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EFEITOS NEUROPROTETORES DO EXERCÍCIO FÍSICO RESISTIDO PROGRESSIVO ASSOCIADO A MELATONINA NO CÉREBRO DE RATOS COM
DOENÇA DE PARKINSON
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Orientador : ERIKA CRISTINA JORGE
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MEMBROS DA BANCA :
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ERIKA CRISTINA JORGE
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ITA DE OLIVEIRA SILVA
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LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
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PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
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Data: 30/08/2024
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A Doença de Parkinson (DP) é um distúrbio neurodegenerativo progressivo caracterizado pela
deterioração dos neurônios dopaminérgicos na substância negra compacta, levando à diminui- ção da neurotransmissão dopaminérgica nigroestriatal. Esta condição é incurável e requer ma- nejo ao longo da vida. Estudos recentes têm explorado a eficácia do exercício físico de resis- tência como uma intervenção não farmacológica para a DP, juntamente com evidências emer- gentes sugerindo que a melatonina, comumente usada para distúrbios do sono, pode ter um
potencial terapêutico significativo para doenças neurodegenerativas. Este estudo teve como ob- jetivo avaliar os efeitos combinados do exercício físico resistido progressivo de alta intensidade
e da melatonina na neuroproteção e no desempenho motor em um modelo de ratos com DP. Foram utilizados 80 ratos Wistar, divididos em grupos com e sem indução de DP via 6-OHDA,
e subdivididos em grupos com e sem exercício e com e sem melatonina. O exercício foi reali- zado em uma escada vertical por 30-45 minutos, cinco dias por semana, durante quatro sema- nas. A melatonina foi administrada intraperitonealmente a 20 mg/kg, cinco vezes por semana
durante cinco semanas antes da indução da DP. O desempenho motor foi avaliado usando testes de passo em falso, barras paralelas e campo aberto, enquanto o tecido cerebral foi analisado
quanto à densidade neuronal e ativação astrocitária utilizando coloração de Nissl e imunohisto- química para GFAP. A análise histomorfométrica revelou que os animais dos grupos tratados
com exercício e melatonina apresentaram desempenho motor superior e maior sobrevivência
neuronal no estriado e na substância negra em comparação aos grupos sedentários. Foi obser- vada também uma maior expressão de GFAP, indicando redução na ativação astrocitária em
animais tratados. Os resultados sugerem que a combinação de melatonina com exercício físico resistido de alta intensidade oferece uma estratégia neuroprotetora para a DP, melhorando a
coordenação motora e preservando a integridade neuronal em um modelo de ratos. Esta abor- dagem representa uma terapia adjuvante promissora para o manejo de doenças neurodegenera- tivas.
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Parkinson's Disease (PD) is a progressive neurodegenerative disorder characterized by the deterioration of dopaminergic neurons in the substantia nigra compacta, leading to diminished nigrostriatal dopaminergic neurotransmission. This condition is incurable and requires lifelong
management. Recent studies have explored the efficacy of resistance exercise as a non- pharmacological intervention for PD, alongside emerging evidence suggesting that melatonin,
commonly used for sleep disorders, may have significant therapeutic potential for neurodegenerative diseases. This study aimed to evaluate the combined effects of high-intensity progressive resistance exercise and melatonin on neuroprotection and motor performance in a rat model of PD. Eighty Wistar rats were utilized, divided into groups with and without PD induction via 6-OHDA, and further categorized into exercise and non-exercise, and melatonin and non-melatonin subgroups. Exercise was conducted on a vertical ladder for 30-45 minutes, five days a week, over four weeks. Melatonin was administered intraperitoneally at 20 mg/kg, five times a week for five weeks prior to PD induction. Motor performance was assessed using the footprint test, parallel bars, and open field test, while brain tissue was analyzed for neuronal density and astrocytic activation using Nissl staining and GFAP immunohistochemistry. Histomorphometric analysis revealed that animals in the exercise and melatonin-treated groups exhibited superior motor performance and increased neuronal survival in the striatum and substantia nigra compared to sedentary groups. Enhanced GFAP expression was also observed, indicating reduced astrocytic activation in treated animals.The findings suggest that combining melatonin with high-intensity resistance physical exercise offers a neuroprotective strategy for PD, improving motor coordination and preserving neuronal integrity in a rat model. This approach presents a promising adjunctive therapy for managing neurodegenerative diseases.
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RAFAELA LOPES FIGUEIREDO DE ANDRADE
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Identificação de marcadores moleculares e inflamatórios associados à via TRAIL de apoptose disponíveis a partir de biópsia líquida para o desenvolvimento de ferramentas preditivas de resposta à terapia à base
de platina em pacientes com Câncer de Ovário
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Orientador : LETICIA DA CONCEIÇÃO BRAGA
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MEMBROS DA BANCA :
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ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
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JORGE GOMES GOULART FERREIRA
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LETICIA DA CONCEIÇÃO BRAGA
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NAYARA NASCIMENTO TOLEDO SILVA
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Data: 30/08/2024
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O câncer de ovário (CO) é a nona causa de morte por câncer e ocupa a sétima posição do ranking de neoplasias mais incidentes em mulheres no mundo. A alta taxa de mortalidade da doença pode estar atrelada às limitações encontradas no tratamento da doença, uma vez que, alguns pacientes apresentam resistência ao tratamento quimioterápico comum baseado em platina. O Ligante Indutor de Apoptose relacionado ao Fator de Necrose Tumoral (TRAIL) vem sendo estudado com uma proposta de driblar a resistência ao tratamento à base de platina, por ser reconhecido como um indutor seletivo de apoptose em células tumorais. Diante disso, este estudo tem como objetivo identificar e caracterizar marcadores moleculares e inflamatórios associados à via TRAIL para estabelecer um painel prognóstico acessado por biópsia líquida e que possa ser usado como ferramenta preditiva para resposta à terapia à base de platina em pacientes com CO. Para isso, foram formados dois grupos de pacientes com CO, sendo um de pacientes sensíveis e outro de pacientes resistentes à quimioterapia baseada em platina, além de um grupo controle composto por voluntários saudáveis. Após a coleta de amostras e a formação dos grupos, foi realizada a análise bioinformática de dados de sequenciamento genético de pacientes com CO, a fim de identificar mutações em genes envolvidos na via TRAIL. Nesta análise, a variante XIAP c.1411T>A (C471S). chamou atenção pela possível relação com a sensibilidade ao tratamento baseado em platina e, em uma análise de predição in silico, foi classificada como uma variante de significado incerto com potencial oncogênico. Além disso, foi demonstrado que a variante possui alta especificidade (80%) e, quando detectada, é bastante confiável em prever a sensibilidade dos pacientes à platina (valor preditivo positivo de 91%). Foram realizados ensaios por PCR digital no cfDNA extraído do plasma sanguíneo dos pacientes do estudo, a fim de validar a presença da variante identificada. Adicionalmente, foi realizada a caracterização do perfil de citocinas presentes no plasma por citometria de fluxo, onde as citocinas IL-13 e TNF-β demonstraram potencial em distinguir pacientes sensíveis e resistentes à platina. Os resultados obtidos neste estudo, permitirão uma melhor compreensão das vias mediadas por TRAIL na resposta ao tratamento quimioterápico à base de platina em pacientes com CO, bem como a identificação de biomarcadores, acessados por biópsia líquida, que possam contribuir para a terapia direcionada à doença.
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Ovarian cancer (OC) is the ninth leading cause of cancer death and ranks seventh among the most common neoplasms in women worldwide. The high mortality rate of the disease can be attributed to treatment limitations, as some patients exhibit resistance to standard platinum-based chemotherapy. The Tumor Necrosis Factor-Related Apoptosis-Inducing Ligand (TRAIL) is being studied for its potential to overcome resistance to platinum-based treatment due to its selective induction of apoptosis in tumor cells. Therefore, this study aims to identify and characterize molecular and inflammatory markers associated with the TRAIL pathway to establish a prognostic panel accessible via liquid biopsy that can serve as a predictive tool for platinum-based therapy response in OC patients. To achieve this, two groups of OC patients were formed: one group sensitive to platinum-based chemotherapy and another resistant, along with a control group of healthy volunteers. Following sample collection and group formation, bioinformatic analysis of genetic sequencing data from OC patients was conducted to identify mutations in genes involved in the TRAIL pathway. In this analysis, the XIAP c.1411T>A (C471S) variant stood out due to its potential association with platinum-based treatment sensitivity and was classified as a variant of uncertain significance with oncogenic potential in an in silico prediction analysis. Moreover, it was demonstrated that the variant has high specificity (80%) and, when detected, is quite reliable in predicting patient sensitivity to platinum (positive predictive value of 91%). Digital PCR assays were performed on cfDNA extracted from the patients' blood plasma to validate the presence of the identified variant. Additionally, the cytokine profile in the plasma was characterized by flow cytometry, where IL-13 and TNF-β showed potential in distinguishing between platinum-sensitive and platinum-resistant patients. The results obtained from this study will allow for a better understanding of the TRAIL-mediated pathways in the response to platinum-based chemotherapy in OC patients, as well as the identification of biomarkers, accessed through liquid biopsy, that may contribute to targeted therapy for the disease.
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GUILHERME RIOS SILVA
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Avaliação do processo de celularização da matriz extracelular gengival bovina descelularizada após funcionalização com diferentes
nanoestruturas para uso em periodontia
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Orientador : DANIELA LEITE FABRINO
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MEMBROS DA BANCA :
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DANIELA LEITE FABRINO
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IGOR JOSE BOGGIONE SANTOS
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ISABELA BEATRIZ CABACINHA NÓBREGA
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MARCOS AUGUSTO DE SÁ
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RAQUEL ALVES COSTA
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Data: 19/12/2024
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A engenharia de tecidos, por meio da caracterização dos biomateriais, tornou-se um caminho promissor para o tratamento em diversas áreas da saúde, principalmente odontológicas. A condição de recessão gengival pode aproveitar de âmbitos metodológicos de avanços em seus tratamentos visando a qualidade de recuperação e dos indivíduos. A matriz extracelular, e propriamente elementos constituintes de matriz estão sendo utilizados como um recurso bastante significativo para o tratamento e modificando a intervenções cirúrgicas tradicionais. Desse modo, o objetivo da pesquisa foi de avaliar o processo de celularização da matriz extracelular gengival bovina descelularizada, e a funcionalização com diferentes nanoestruturas. Assim, por meio de processo metodológicos, como processo de descelularização, amostras gengivais bovinas foram coletadas e descelularizadas em agitação com SDS 1%, EDTA, Aprotinina e antibiótico. Além disso, as amostras funcionalizadas com nanoquitosana e nanoprata foram fornecidas por meio do Laboratório de Tecnologia Celular do Campus Ouro Banco, da Universidade Federal de São João Del Rei-MG. A avaliação da caracterização do biomaterial foi realizada por meio de testes de citotoxicidade, análises do processo de descelularização e funcionalização fornecidas por extração de DNA, coloração histológica (Hematoxilina e Eosina,Tricrômico de Gomori e Alcian Blue), MEV, EDS, celularização e testes antimicrobianos. Assim, demonstraram as análises de citotoxicidade que tanto a nanoquitosana quanto a nanoprata não apresentaram efeitos citotóxicos ao longo de 48 horas. Na descelularização a coloração esbranquiçada dos tecidos após o processo apontou a perda das células no tecido, na extração de DNA foi possível notar que não houve presença de DNA na amostra descelularizada. Já na funcionalização observou-se significativa absorção do procedimento, a histologia de amostras descelularizadas apontaram ausência de células (H&E), preservação de elementos de matriz, e assim a integridade (TG e AB). No grupo funcionalizado a integridade da matriz é preservada mediante a funcionalização com as nanoestruturas (H&E). Como também, em MEV a integridade foi preservada após a funcionalização. O EDS foi demonstrado picos mais altos de prata (Ag) e cloro (Cl) (aproximadamente acima de 7cps/eV) evidentes em amostra de nanoprata. Além de, em nanquitosana (aproximadamente 10cps/eV e acima de 10cps/eV) verificou-se em picos altos de elementos como sódio (Na) e cloro (Cl). A celularização ocorreu ao longo de 72 horas, e ambas as nanopartículas mostram atividade antimicrobiana comparadas ao controle para as bactérias Escherichia coli (E. coli) e Bacillus cereus (B. cereus). Nesse sentido, é de grande importância ampliar os estudos, e compreender que a caracterização pode ser de qualidade e de eficiência se acrescentar metodologias que considerem ainda mais a caracterização de um biomaterial. Logo, é indispensável a avaliação da celularização dos biomateriais a base de matriz extracelular gengival bovina a fim de ampliar as técnicas de tratamento de recessão gengival.
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Tissue engineering, through the characterization of biomaterials, has become a promising path for treatment in several areas of health, especially dentistry. The condition of gingival recession can benefit from methodological advances in its treatments, aiming at the quality of recovery and of individuals. The extracellular matrix, and specifically constituent elements of the matrix, are being used as a very significant resource for treatment and modifying traditional surgical interventions. Thus, the objective of the research was to evaluate the cellularization process of the decellularized bovine gingival extracellular matrix, and the functionalization with different nanostructures. Thus, through methodological processes, such as decellularization process, bovine gingival samples were collected and decellularized in agitation with SDS 1%, EDTA, Aprotinin and antibiotic. In addition, the samples functionalized with nanochitosan and nanosilver were provided through the Cell Technology Laboratory of the Ouro Banco Campus, of the Federal University of São João Del Rei-MG. The evaluation of the biomaterial characterization was performed through cytotoxicity tests, analysis of the decellularization and functionalization process provided by DNA extraction, histological staining (Hematoxylin and Eosin, Gomori Trichrome and Alcian Blue), SEM, EDS, cellularization and antimicrobial tests. Thus, the cytotoxicity analyses demonstrated that both nanochitosan and nanosilver did not present cytotoxic effects over 48 hours. In decellularization, the whitish coloration of the tissues after the process indicated the loss of cells in the tissue, in DNA extraction it was possible to note that there was no presence of DNA in the decellularized sample. In functionalization, significant absorption of the procedure was observed, the histology of decellularized samples indicated absence of cells (H&E), preservation of matrix elements, and thus integrity (TG and AB). In the functionalized group, the integrity of the matrix is preserved through functionalization with nanostructures (H&E). Also, in SEM, the integrity was preserved after functionalization. EDS demonstrated higher peaks of silver (Ag) and chlorine (Cl) (approximately above 7cps/eV) evident in nanosilver sample. In addition, in nanquitosan (approximately 10cps/eV and above 10cps/eV) high peaks of elements such as sodium (Na) and chlorine (Cl) were observed. Cellularization occurred over 72 hours, and both nanoparticles showed antimicrobial activity compared to the control for the bacteria Escherichia coli (E. coli) and Bacillus cereus (B. cereus). In this sense, it is of great importance to expand the studies and understand that the characterization can be of quality and efficiency if methodologies are added that further consider the characterization of a biomaterial are added. Therefore, it is essential to evaluate the cellularization of biomaterials based on bovine gingival extracellular matrix in order to expand the techniques for treating gingival recession.
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