Dissertações/Teses
2024
Dissertações
1
  • BRUNA CRISTINA FRANCO
  • Estudo do efeito do extrato acetato de etila de Celtis iguanaea na contração do
    ducto deferente de camundongo.

  • Orientador : PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • MEMBROS DA BANCA :
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • RENE OLIVEIRA DO COUTO
  • ADOLFO GARCIA ERUSTES
  • Data: 02/02/2024

  • Mostrar Resumo
  • A ejaculação precoce (EP) é uma disfunção sexual que acomete uma grande parcela da
    população masculina no mundo todo e os tratamentos disponíveis causam diversos
    efeitos adversos. As plantas medicinais têm sido utilizadas por exercerem um papel
    importante na saúde humana e o Celtis iguanaea (CI) apresenta efeito gastroprotetor e
    anti-inflamatório, porém ainda não foi demonstrado seu efeito no ducto deferente (DD).
    O objetivo deste trabalho foi verificar se esta espécie relaxa o DD, além de tentar
    elucidar o seu mecanismo de ação. O efeito de doses crescentes de CI, na presença e na
    ausência, de nifedipina, foi testado, sob a contração do DD de camundongos, estimulada
    por cloreto de potássio (KCl) ou adrenalina. Os experimentos foram realizados em um
    sistema de banho de órgãos, onde a contração foi registrada pelo hardware PowerLab e
    analisada pelo software LabChart. As respostas foram medidas considerando as
    amplitudes de contração de cada componente. O efeito de CI foi analisado pelo IC 50
    (logaritmo negativo da concentração da droga que produz 50% do efeito inibitório
    máximo). Celtis iguanaea, apresentou efeito inibitório tanto no componente fásico
    como no tônico da contração induzida por KCl e adrenalina, sendo o componente tônico
    estatisticamente mais sensível à ação de CI. O efeito de CI, nos componentes fásico e
    tônico, na presença de nifedipina, um bloqueador clássico dos canais de cálcio, foi
    potencializado, quando a contração foi induzida pelo KCl. Já na contração induzida pela
    adrenalina, o efeito inibitório, nos componentes fásico e tônico, na presença da
    nifedipina, foi mantido. Esses resultados indicam que CI é capaz de inibir algum
    mecanismo envolvido na sinalização da contração do DD. Esses achados demonstram o
    efeito de Celtis iguanaea e contribuem para elucidação do seu mecanismo de ação e sua
    possível utilização no tratamento da ejaculação precoce.


  • Mostrar Abstract
  • Premature ejaculation (PE) is a sexual dysfunction that affects a large proportion of the
    male population worldwide and the available treatments cause various side effects.
    Medicinal plants have been used because they play an important role in human health
    and Celtis iguanaea (CI) has a gastroprotective and anti-inflammatory effect, but its
    effect on the vas deferens (DD) has not yet been demonstrated. The aim of this study
    was to see if this species relaxes the DD, as well as trying to elucidate its mechanism of
    action. The effect of increasing doses of IC, in the presence and absence of nifedipine,
    was tested on the contraction of the DD of mice, stimulated by potassium chloride
    (KCl) or adrenaline. The experiments were carried out in an organ bath system, where
    the contraction was recorded using PowerLab hardware and analyzed using LabChart
    software. The responses were measured considering the contraction amplitudes of each
    component. The IC effect was analyzed by the IC50 (negative logarithm of the drug
    concentration that produces 50% of the maximum inhibitory effect). Celtis iguanaea
    showed an inhibitory effect on both the phasic and tonic components of the contraction
    induced by KCl and adrenaline, with the tonic component being statistically more
    sensitive to the action of IC. The effect of IC on the phasic and tonic components in the
    presence of nifedipine, a classic calcium channel blocker, was potentiated when the
    contraction was induced by KCl. In adrenaline-induced contraction, the inhibitory effect
    on the phasic and tonic components in the presence of nifedipine was maintained. These
    results indicate that CI is capable of inhibiting some mechanism involved in DD
    contraction signaling. These findings demonstrate the effect of Celtis iguanaea and
    contribute to elucidating its mechanism of action and its possible use in the treatment of
    premature ejaculation.

2
  • EMANUEL VICTOR BASTOS DA FONSECA
  • DESENVOLVIMENTO DE BIOMATERIAL A BASE DE POLÍMEROS NATURAIS ASSOCIADO A NANOTUBOS DE ÓXIDO DE TITÂNIO (TIO2) PARA REPARO ÓSSEO 
  • Orientador : ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DANIELA LEITE FABRINO
  • ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • MICHELE MUNK PEREIRA
  • REBECCA VASCONCELLOS BOTELHO DE MEDEIROS
  • Data: 01/03/2024

  • Mostrar Resumo
  • Enxertos ósseos que imitam as propriedades da matriz extracelular (MEC) são
    bem conhecidos por sua capacidade de proporcionar a regeneração óssea.
    Biomateriais podem ser projetados com uma estrutura porosa que imita a
    arquitetura natural do tecido ósseo, promovendo a migração e a diferenciação
    celular. O desenvolvimento de biomateriais pode ser realizado por meio da junção
    de polímeros e associação com nanopartículas, gerando um compósito com
    propriedades superiores aos dos componentes isolado. Portanto, com o objetivo
    de obter compósitos com propriedade melhoradas, este trabalho desenvolveu
    scaffolds de colágeno (2 mg) com variações de alginato (1 mg, 2 mg e 4 mg)
    associados à três concentrações de NPs deTiO2 (2 μg, 4 μg e 6 μg). Os scaffolds
    foram preparados a partir de colágeno tipo I e alginato reticulado com ClCa2
    usando a técnica de solução de casting e liofilização. Os scaffolds apresentaram a
    forma cilíndrica com cerca de 10 mm de comprimento. As análises de FTIR
    informam que as moléculas de colágeno se mantiveram íntegras, entretanto foi
    constatado leves deslocamentos dos grupos amidas I e II devido a interação com
    os grupos C=O do alginato. Os ensaios de AFM – QNM destacaram aumento de
    Módulo de Young (ME) em proporções equivalentes de alginato e colágeno, o
    grupo 2:2 - 2 μg obteve o maior ME, 3,52 ± 0,095. Nessa proporção o tamanho
    médio dos poros foi de 24,6 ± 210 μg e a taxa de degradação foi de 96% (2:2 - 4
    μg) e 97% (2:2 – 6 μg). Nos ensaios in vitro foram utilizadas células tronco
    mesenquimais advindas do tecido adiposo humano (hASCs). Todos os scaffolds
    apresentaram capacidade de viabilidade, com destaque para a proporção com
    maiores concentrações de alginato (4:2) que demonstrou os maiores resultados ao
    final do 3o dia. A avaliação dos nódulos de mineralização, porém, indicou baixa
    mineralização nos grupos de 4:2. E, novamente, os grupos com proporções 2:2
    apresentaram maiores áreas mineralizadas. Os resultados deste estudo
    contribuem para o avanço no desenvolvimento de scaffolds biomiméticos para
    regeneração óssea. As descobertas fornecem uma base sólida para futuras
    pesquisas e aplicações clínicas no campo da engenharia de tecidos e medicina
    regenerativa.


  • Mostrar Abstract
  • Bone grafts that mimic the properties of the extracellular matrix (ECM) are well-
    known for their ability to facilitate bone regeneration. Biomaterials can be designed

    with a porous structure that mimics the natural architecture of bone tissue,
    promoting cellular migration and differentiation. The development of biomaterials
    often involves combining polymers and incorporating nanoparticles to create
    composites with superior properties compared to individual components. In the
    pursuit of enhanced composites, this study focused on developing collagen
    scaffolds (2 mg) with varying amounts of alginate (1 mg, 2 mg, and 4 mg),
    combined with three concentrations of TiO2 nanoparticles (2 μg, 4 μg, and 6 μg).
    The scaffolds were prepared using type I collagen and alginate cross-linked with
    CaCl2 through the casting and lyophilization technique, resulting in cylindrical
    structures approximately 10 mm in length. FTIR analyses revealed the integrity of
    collagen molecules, with slight shifts in the amide I and II groups due to
    interactions with the C=O groups of alginate. AFM-QNM tests highlighted an
    increase in the Young's Modulus (YM) in proportions equivalent to alginate and
    collagen, with the 2:2 - 2 μg group achieving the highest YM at 3.52 ± 0.095. In this
    proportion, the average pore size was 24.6 ± 2.10 μg, and the degradation rate

    was 96% (2:2 - 4 μg) and 97% (2:2 – 6 μg). In vitro assays utilized human adipose-
    derived mesenchymal stem cells (hASCs), demonstrating viability across all

    scaffolds. The 4:2 proportion, with higher concentrations of alginate, stood out with
    the best results by the end of the 3rd day. However, mineralization assessments
    indicated lower mineralization in the 4:2 groups, while once again, the 2:2 groups
    showed greater mineralized areas. The outcomes of this study contribute to
    advancing the development of biomimetic scaffolds for bone regeneration. These
    findings establish a solid foundation for future research and clinical applications in
    the fields of tissue engineering and regenerative medicine.

3
  • JANAINA DOMINGAS ALVES
  • Avaliação da toxicidade aguda e subcrônica de β-carbonílicos recém-sintetizados

  • Orientador : PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANA BEATRIZ GRAÇA DUARTE
  • FABIO VIEIRA DOS SANTOS
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • Data: 04/03/2024

  • Mostrar Resumo
  • Alcalóides são intrigantes moléculas, das quais as mais simples apresentam peculiaridades
    químicas e podem ser adicionadas à lista de moléculas com alto potencial farmacêutico.
    Pesquisas realizadas com a finalidade de entender melhor tais compostos têm possibilitado
    o desenvolvimento de fármacos direcionados a diversos alvos terapêuticos, sendo usados
    para o tratamento de enxaquecas, cefaleias, depressão, ansiedade, anestesia, bloqueio
    neurológico, doenças vasculares e cardíacas, infecções bacterianas, câncer, dentre outras.
    Nesse sentido, o grupo de pesquisa Núcleo de Pesquisa em Química Biológica (NQBio),
    sintetizou uma série de análogos de alcalóides β-carbolínicos não naturais a partir de
    triptamina e L-triptofano. De acordo com a citotoxicidade e seletividade contra células
    tumorais humanas em estudos realizados previamente in vitro, dois dos alcalóides
    (NQBio-006 e NQBio-021) foram escolhidos para a realização do presente estudo. O
    presente estudo foi realizado para avaliar a toxicidade aguda e subcrônica dos compostos
    NQBio-006 e NQBio-021 in vivo. Para isso, foram utilizados camundongos Swiss fêmeas
    (n=80), com 8 semanas de idade. Os animais foram divididos em 3 grupos (Controle n=12;
    NQBio-006 n=24 e NQBio-021 n=24) para estabelecer o modelo de toxicidade aguda, no
    qual uma dose única de 2.000, 300, 50 e 5 mg/kg de ambos os compostos foram
    administradas via gavagem a camundongos fêmeas. Já no estudo de toxicidade subcrônica,
    de acordo com a melhor resposta observada no teste de toxicidade aguda, apenas o
    alcalóide NQBio-006 foi administrado nas doses de 10, 100 e 1.000 mg/kg diariamente
    durante o período de 28 dias, sendo que os animais foram divididos em 2 grupos (Controle
    n=5 e NQBio-006 n=15). Foram observados sinais de toxicidade nos 5 minutos, 10 minutos,
    20 minutos, 30 minutos e 60 minutos, bem como, 4 horas, 8 horas, 24 horas e 48 horas;
    durante 14 dias a partir da hora de administração do composto no teste de toxicidade aguda
    e 28 dias no teste de toxicidade subcrônica.
    Dados associados ao peso corporal, peso dos órgãos e os parâmetros associados à
    toxicidade, como eritrograma e plaquetograma, histopatologia e morfometria dos rins e
    fígado, peso do ovário e população folicular foram obtidos e analisados pelos testes
    D’Agostino-Pearson e t de student através do software Prism 8.0. Em relação ao teste de
    toxicidade aguda foram observadas diferenças significativas em todos os parâmetros
    avaliados, sendo que o composto NQBio-021 demonstrou maior toxicidade na maioria dos
    testes. Dessa forma, seguimos utilizando o composto NQBio-006 no teste de toxicidade
    subcrônica, sendo evidenciado pelas análises resultados promissores, de forma que com
    relação a toxicidade subcrônica os resultados não demonstraram diferenças significativas
    nos mesmos parâmetros avaliados. Dessa forma, foi possível concluir que o composto
    NQBio-006 apresenta baixa toxicidade e representa um importante fármaco para base de
    pesquisas relacionadas a tratamentos oncológicos.


  • Mostrar Abstract
  • Alkaloids are intriguing molecules, the simplest of which have chemical peculiarities and can
    be added to the list of molecules with high pharmaceutical potential. Research carried out
    with the aim of better understanding these compounds has enabled the development of
    drugs associated to a wide range of therapeutic targets, being used to treat migraines,
    headaches, depression, anxiety, neurological block, vascular and cardiac diseases, bacterial
    infections, cancer, among others. In this sense, the research group “Núcleo de Pesquisa em
    Química Biológica (NQBio), Nesse sentido, o grupo de pesquisa Núcleo de Pesquisa em
    Química Biológica (Biosynthesized a series of unnatural β-carboline alkaloid analogs from
    tryptamine and L-tryptophan. According to the cytotoxicity and selectivity against human
    tumor cells in vitro, two of the alkaloids (NQBio-006 and NQBio-021) were taken to carry out
    the present study. The aim of this study was to evaluate the acute and subchronic toxicity of
    the compounds NQBio-006 e NQBio-021 in vivo. For this, female Swiss mice (n=80) with 8
    weeks of age were usd. Animals were divided into 3 groups (Control n=12; NQBio-006 n=24
    and NQBio-021 n=24) to the acute toxicity model establishment, in which a single dose of
    2,000, 300, 50 and 5 mg/kg of both compounds were administered by gavage. For the
    subchronic toxicity test, according to the best response observed in the acute toxicity, only
    the NQBio-006 was administered at doses of 1,000, 100 and 10 mg/kg during a period of 28
    days, for this test the animals were divided into 2 experimental groups (Control n=5 and
    NQBio-006 n= 15). Signals of toxicity were observed at 5, 10, 20, 30 and 6 minutes as well
    as 4, 8, 24 and 48 hours and during 14 days from the administration day for the acute study
    and for 28 days for the subchronic evaluation toxicity. Data related to body and organ weight
    and parameters associated with toxicity, such as erythrogram and platelet count,
    histopathology and morphometry of the kidneys and liver, ovarian weight and follicular
    population were obtained and analyzed using the D’Agostino-Pearson and t test through of
    Prism 8.0. software. In relation to the acute toxicity test, significant differences were
    observed in all the evaluated parameters, where the NQBio-021 demonstrated greater
    toxicity. Therefore, the NQBio-006 were used to perform the subchronic toxicity tests, with
    promising results being evidenced by the analysis, so that in the subchronic study, results
    did not demonstrate significant differences. In general, it was possible to conclude that the
    compound NQBio-006 has low toxicity and represents an important drug as a basis of
    research related to oncological treatments.

2023
Dissertações
1
  • ISABELA LOUISE PEREIRA LOPES
  • NOVO BIOMATERIAL À BASE DE MATRIZ EXTRACELULAR DESCELULARIZADA FUNCIONALIZADA COM NANOQUITOSANA PARA ELABORAÇÃO DE BIOCURATIVOS

  • Orientador : DANIELA LEITE FABRINO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • DANIELA LEITE FABRINO
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • MICHELE MUNK PEREIRA
  • Data: 29/08/2023

  • Mostrar Resumo
  • A pele é um órgão que possui grande capacidade reparativa, porém algumas lesões agudas e
    crônicas podem desencadear perda significativa de sua arquitetura. Nestes casos, a engenharia
    de tecidos pode ser aplicada por meio da utilização de scaffolds. Biomateriais compostos de
    matriz extracelular descelularizada (dECM) apresentam baixa resposta imunogênica e
    fornecem ambiente propício para adesão e proliferação celular. Polímeros naturais como a
    nanoquitosana, vêm obtendo destaque nas aplicações biomédicas por apresentarem
    propriedades cicatrizantes e antimicrobianas. Este trabalho propõe o desenvolvimento de um
    biomaterial de dECM funcionalizado com nanoquitosana para uso como biocurativo. Para
    obtenção da dECM, fragmentos de pele bovina foram descelularizados por agitação em meio
    SDS a 1%, EDTA, Aprotinina e ATB. As amostras foram submetidas a análises histológicas
    com colorações de H&E, Tricrômico de Gomori e Alcian Blue, além de extração de DNA e
    imunofluorescência. A nanoquitosana foi obtida a partir do método de gelificação iônica, e
    caracterizada por MET, DLS, MEV e atividade antibacteriana. Os fragmentos
    descelularizados foram funcionalizados com as nanopartículas por adsorção. A caracterização
    do scaffold foi feita por análises histológicas, AFM, FTIR, MEV e EDS. O tamanho das
    estruturas de nanoquitosana variou entre 75,48 ± 13,73nm, e as imagens mostraram uma
    morfologia disforme. O índice de polidispersão ficou entre 0,393 ± 0,015, estando dentro dos
    parâmetros recomendados para polímeros naturais. A atividade antimicrobiana da
    nanoquitosana foi observada em todas as concentrações testadas (0,26 μg/ml-1 a 19,7 μg/ml-1)para as bactérias Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Salmonella sp. e Staphylococus

    aureus. A eficácia do processo de descelularização da matriz foi comprovada por meio da
    extração de DNA, não havendo bandas características na amostra descelularizada em
    comparação com o controle. A imunofluorescência evidenciou a ausência de núcleos celulares
    no tecido descelularizado, restando somente alguns debris. A ausência de núcleos também foi
    visualizada por análises histológicas, nas quais foi possível observar a manutenção de grande
    parte da estrutura da matriz por meio da avaliação qualitativa das fibras de colágeno e
    preservação das glicosaminoglicanas, com arquitetura topográfica preservada. Os ensaios de
    EDS e FTIR demostraram boa funcionalização da matriz com a nanoquitosana. A análise de
    MEV demonstrou que o scaffold de dECM apresenta estrutura e porosidade adequadas para
    favorecer a adesão e crescimento celular. Sendo assim, este trabalho gera perspectivas de
    biocurativos nanotecnológicos a partir de fontes xenogênicas para reparo tecidual.


  • Mostrar Abstract
  • The skin is an organ that has great reparative capacity, but some acute and chronic injuries
    can trigger significant loss of its architecture. In these cases, tissue engineering can be applied
    through the use of scaffolds. Biomaterials composed of decellularized extracellular matrix
    (dECM) present low immunogenic response and provide a favorable environment for cell
    adhesion and proliferation. Natural polymers, such as nano-chitosan, have been gaining
    prominence in biomedical applications because they present healing and antimicrobial
    properties. This work proposes the development of a dECM biomaterial functionalized with
    nanochitosan for use as a biodressing. To obtain the dECM, fragments of bovine skin were
    decellularized by agitation in 1% SDS medium, EDTA, Aprotinin and ATB. The samples
    were submitted to histological analysis with H&E, Gomori's Trichrome and Alcian Blue
    stains, besides DNA extraction and immunofluorescence. The nano-chitosan was obtained
    from the ionic gelation method, and characterized by MET, DLS, SEM and antibacterial
    activity. The decellularized fragments were functionalized with the nanoparticles by
    adsorption. Characterization of the scaffold was done by histological analysis, AFM, FTIR,
    SEM and EDS. The size of the nanochitosan structures ranged between 75.48 ± 13.73nm, and
    the images showed a shapeless morphology. The polydispersity index was between 0.393 ±
    0.015, being within the recommended parameters for natural polymers. The antimicrobial
    activity of nano-chitosan was observed at all concentrations tested (0.26 μg/ml-1
    to 19.7

    μg/ml-1
    ) for the bacteria Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Salmonella sp. and
    Staphylococus aureus. The effectiveness of the matrix decellularization process was proven
    by DNA extraction, with no characteristic bands in the decellularized sample compared to the
    control. The immunofluorescence showed the absence of cell nuclei in the decellularized
    tissue, leaving only some debris. The absence of nuclei was also visualized by histological
    analysis, in which it was possible to observe the maintenance of much of the matrix structure
    through qualitative evaluation of collagen fibers and preservation of glycosaminoglycans,
    with preserved topographical architecture. The EDS and FTIR tests demonstrated good
    functionalization of the matrix with the nano-chitosan. The SEM analysis demonstrated that
    the dECM scaffold presents adequate structure and porosity to favor cell adhesion and
    growth. Thus, this work generates perspectives of nanotechnological biodressing from
    xenogenic sources for tissue repair.

2
  • RENAN DINIZ FERREIRA
  • Efeitos do uso tópico do óleo essencial de Ageratum conyzoides no processo de cicatrização de feridas cutâneas em camundongos

  • Orientador : FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • WANDERSON GERALDO DE LIMA
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • Data: 30/08/2023

  • Mostrar Resumo
  • Em seres humanos, o reparo dos tecidos pode ocorrer de duas formas: pela
    regeneração ou pela cicatrização, onde há perda da funcionalidade tecidual. Na
    tentativa de tornar mais eficiente esse processo, os produtos de origem natural têm
    se tornado uma alternativa para melhorar a cicatrização das feridas. O Ageratum
    conyzoides (AC) é popularmente conhecido como "Erva de São João” e
    tradicionalmente utilizado como anti-inflamatório, analgésico e no alívio de cólicas
    menstruais e intestinais. Estudos relatam que o uso do extrato etanólico dessa erva
    aumenta a proliferação celular de queratinócitos e a síntese de colágeno. Outros
    estudos também apontam que o extrato metanólico induz a contração da ferida.
    Com isso, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito tópico do óleo essencial
    de Ageratum conyzoides no processo de cicatrização de feridas cutâneas
    excisionais em camundongos. Para isso, foram utilizados 72 camundongos machos,
    distribuídos de forma aleatória em quatro grupos, sendo (i) grupo salina, que
    recebeu aplicação tópica de salina fisiológica; (ii) grupo DMSO, que recebeu
    aplicação tópica de DMSO; (iii) grupo TOX, que recebeu aplicação tópica do óleo
    essencial de AC diluído em DMSO, na concentração de 0,01mg/10000μl; e (iv)
    grupo TOY, que recebeu aplicação tópica do óleo essencial de AC diluído em
    DMSO, na concentração de 0,001mg/10000μl. Cada grupo foi subdividido em outros
    três subgrupos, nos tempos de 1, 5 e 7 dias de tratamento, sendo n = 6. Além disso,
    mais 18 camundongos machos foram distribuídos de forma aleatória em três
    grupos: DMSO, TOX e TOY, seguindo os mesmos tratamentos anteriormente
    descritos, no tempo de 28 dias. As feridas excisionais foram induzidas, os animais
    tratados, e após cada tempo de tratamento, as lesões foram coletadas, processadas
    e analisadas macroscopicamente e microscopicamente, através de técnicas
    histológicas, histoquímicas e imuno-histoquímicas, para avaliação histopatológica e
    morfométrica do: infiltrado inflamatório, reepitelização e crostas, mastócitos, novos
    vasos sanguíneos, deposição de fibras colágenas e macrófagos. Os resultados
    mostram que macroscopicamente, ao final de sete dias, a área da lesão do grupo
    TOX foi significativamente menor que o grupo tratado com salina e o grupo TOY. A
    aplicação tópica do óleo essencial de AC reduziu o infiltrado inflamatório, após 1, 5
    e 7 dias de tratamento e após um dia, células fibroblásticas e macrófagos já foram
    observados na área das lesões. Já aos 28 dias de tratamento, houve um aumento
    no número de mastócitos e melhor deposição de fibras colágenas. Dessa forma,
    conclui-se que a aplicação tópica do óleo essencial de Ageratum conyzoides
    interfere positivamente no processo de cicatrização de feridas.


  • Mostrar Abstract
  • In humans, tissue repair can occur in two ways: by regeneration or by healing, where
    there is loss of tissue functionality. In an attempt to make this process more efficient,
    products of natural origin have become an alternative to improve wound healing.
    Ageratum conyzoides (AC) is popularly known as "Erva de São João" and
    traditionally used as an anti-inflammatory, analgesic and to relieve menstrual and
    intestinal cramps. Studies report that the use of the ethanolic extract of this herb
    increases the cell proliferation of keratinocytes and collagen synthesis. Other studies
    also indicate that methanolic extract induces wound contraction. Therefore, the aim
    of the present study was to evaluate the topical effect of Ageratum conyzoides
    essential oil on the healing process of excisional cutaneous wounds in mice. For
    this, 72 male mice were randomly distributed into four groups: (i) saline group, which
    received topical application of physiological saline; (ii) DMSO group, which received
    topical application of DMSO; (iii) TOX group, which received topical application of AC
    essential oil diluted in DMSO, at a concentration of 0.01mg/10000μl; and (iv) TOY
    group, which received topical application of AC essential oil diluted in DMSO, at a
    concentration of 0.001mg/10000μl. Each group was subdivided into three other
    subgroups, at times of 1, 5 and 7 days of treatment, with n = 6. In addition, 18 more
    male mice were randomly distributed into three groups: DMSO, TOX and TOY,
    following the same treatments previously described, in the time of 28 days. The
    excisional wounds were induced, the animals treated, and after each treatment
    period, the lesions were collected, processed and analyzed macroscopically and
    microscopically, through histological, histochemical and immunohistochemical
    techniques, for histopathological and morphometric evaluation of: inflammatory
    infiltrate, re-epithelialization and crusts, mast cells, new blood vessels, deposition of
    collagen fibers and macrophages. The results show that macroscopically, at the end
    of seven days, the area of the lesion in the TOX group was significantly smaller than
    in the saline-treated group and the TOY group. Topical application of AC essential oil
    reduced the inflammatory infiltrate, after 1, 5 and 7 days of treatment and after one
    day, fibroblastic cells and macrophages were already observed in the area of
    lesions. At 28 days of treatment, there was an increase in the number of mast cells
    and better deposition of collagen fibers. Thus, it is concluded that the topical
    application of the essential oil of Ageratum conyzoides interferes positively in the
    wound healing process.

3
  • ANA PAULA ÁLVARES DA SILVA RAMOS
  • CARACTERIZAÇÃO DO PERFIL DE MICROVESÍCULAS CIRCULANTES NO SANGUE DE PACIENTES COM CÂNCER EPITELIAL DE OVÁRIO: UMA ESTRATÉGIA DE BIÓPSIA LÍQUIDA.

  • Orientador : LETICIA DA CONCEIÇÃO BRAGA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • JORGE GOMES GOULART FERREIRA
  • LETICIA DA CONCEIÇÃO BRAGA
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • Data: 15/12/2023

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  • O câncer de ovário (CO) é a segunda neoplasia mais comum relacionada ao sistema
    reprodutor feminino. Atualmente, a medicina de precisão em oncologia tem buscado por
    metodologias diagnósticas mais precoces e precisas, uma vez que a melhor
    compreensão dos aspectos da dinâmica de crescimento tumoral aumenta
    consideravelmente as chances de se obter resultados mais satisfatórios na abordagem
    terapêutica. O tratamento personalizado, no entanto, requer técnicas de diagnóstico cada
    vez mais específicas, precocidade na detecção da doença e acompanhamento, em tempo
    real, do desenvolvimento do tumor, tudo isso, aliado a procedimentos menos invasivos,
    sem a exposição do paciente aos riscos clínicos habituais de uma biópsia cirúrgica.
    Nesse contexto, as vesículas extracelulares (VEs) têm demonstrado um potencial
    interessante para uma abordagem de biópsia líquida, uma vez que, a caracterização das
    microvesículas (MVs) circulantes em sangue periférico vem se apresentando como uma
    alternativa promissora para entendimento da dinâmica do desenvolvimento de tumores
    em vários tipos de câncer. Este estudo realizou a caracterização fenotípica de
    subpopulações de microvesículas (MVs) circulantes oriundas das células do sistema
    imune e de células tumorais (CTCs) por citometria de fluxo, avaliando seu potencial
    terapêutico como biomarcadores para diagnóstico do câncer epitelial de ovário (CEO).
    Foi coletado sangue periférico de 09 voluntárias sem doença ovariana detectável (Grupo
    controle) e de 21 pacientes com CEO. Os dados demonstraram que pacientes com CO
    apresentam maior quantidade de MVs circulantes que mulheres sem evidência de
    doença ovariana. Além disso, os resultados obtidos demonstram que as MVs derivadas
    de eosinófilos, de plaquetas e CTCs-EpCAM são biomarcadores capazes de identificar
    pacientes com CEO por meio do sangue periférico com potencial para serem utilizadas
    em campanhas de rastreio e diagnóstico, em associação com as dosagens dos valores
    séricos de CA125. Os dados indicam que o uso combinado das dosagens de valores
    séricos de CA125 associados as dosagens de MVs de CTCs-EpCAM podem classificar
    as pacientes em estágio inicial, avançado ou livre de câncer epitelial de ovário.


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  • Ovarian cancer (OC) is the second most common neoplasm related to the female
    reproductive system. Currently, precision medicine in oncology has sought earlier and
    more precise diagnostic methodologies, since a better understanding of aspects of tumor
    growth dynamics considerably increases the chances of obtaining more satisfactory
    results in the therapeutic approach. Personalized treatment, however, requires
    increasingly specific diagnostic techniques, early detection of the disease and real-time
    monitoring of tumor development, all of this, combined with less invasive procedures,
    without exposing the patient to clinical risks. of a surgical biopsy. In this context,
    extracellular vesicles (EVs) have demonstrated an interesting potential for a liquid
    biopsy approach, since the characterization of microvesicles (MVs) circulating in
    peripheral blood has been presented as a promising alternative for understanding the
    dynamics of the development of tumors in various types of cancer. This study carried
    out the phenotypic characterization of subpopulations of circulating microvesicles
    (MVs) originating from cells of the immune system and tumor cells (CTCs) by flow
    cytometry, evaluating their therapeutic potential as biomarkers for the diagnosis of
    epithelial ovarian cancer (EOC). Peripheral blood was collected from 9 volunteers
    without detectable ovarian disease (Control group) and from 21 patients with DSC. The
    data demonstrated that patients with OC have a greater number of circulating MVs than
    women without evidence of ovarian disease. Furthermore, the results obtained
    demonstrate that MVs derived from eosinophils, platelets and CTCs-EpCAM are
    biomarkers capable of identifying patients with EOC through peripheral blood with the
    potential to be used in screening and diagnostic campaigns, in association with dosages.
    of serum CA125 values. The data indicate that the combined use of measurements of
    serum CA125 values associated with measurements of CTCs-EpCAM MVs can classify
    patients as early, advanced, or free stage of epithelial ovarian cancer.

2022
Dissertações
1
  • LUIZA APARECIDA ANSALONI CHAGAS PEREIRA
  • EFEITO DA INJÚRIA TECIDUAL DECORRENTE PUNÇÃO NA MOBILIZAÇÃO FOLICULAR E FERTIILIDADE DE CAMUNDONGOS C57B16 


  • Orientador : PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • REMO DE CASTRO RUSSO
  • JOAO HENRIQUE MOREIRA VIANA
  • Data: 07/02/2022

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  • A procura pelas técnicas de reprodução assistida (ARTs) têm sofrido considerável aumento ao longo dos anos. Devido a isso, é de extrema importância a criação e aprimoramento de diferentes técnicas para atender aos diferentes tipos de infertilidade. Atualmente, a maturação in vitro (MIV) e a perfuração ovariana laparoscópica (LOD) têm sido amplamente utilizadas, no entanto, a literatura não traz trabalhos claros e concisos sobre o real efeito causado por essas técnicas na dinâmica folicular ovariana e seus resultados na fertilidade das fêmeas. Nesse sentido, o objetivo do presente trabalho foi investigar os efeitos da injúria tecidual decorrente da aspiração na dinâmica ovariana e mobilização folicular e em aspectos da fertilidade de camundongos C57Bl6. De maneira geral, os resultados indicam que a punção ovariana modifica a dinâmica folicular e oocitária, assim como os aspectos inflamatórios decorrentes dos procedimentos cirúrgicos. No entanto, os animais foram capazes de solucionar tais aspectos de forma eficaz, sendo que a gestação e os filhotes não foram afetados pela punção.


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  • The demand for assisted reproduction techniques (ARTs) has increased over the years. Due to this, it is extremely important to create and improve different techniques that are effective to different types of infertility. Currently, in vitro maturation (IVM) and laparoscopic ovarian perforation (LOD) have been used, however, the literature does not provide clear and concise studies on the real effect of technical results on ovarian follicular dynamics and fertility. In this sense, the aim of the present study was to investigate the effects of tissue injury resulting from aspiration on ovarian dynamics and follicular mobilization as well as aspects of fertility in C57Bl6 mice. Overall, the results indicate that ovarian puncture modifies follicular and oocyte dynamics, as well as inflammatory symptoms originating from surgical procedures. However, the animals were able to solve these aspects effectively, so that the gestation and offspring were not affected by the puncture.


2
  • RAFAELA DE MELO BARRETO
  • EFEITOS DA APLICAÇÃO DE BIOGEL DE COLÁGENO HETERÓLOGO PEPTAN ® (SUÍNO E BOVINO) NO REPARO DE LESÕES CUTÂNEAS EM CAMUNDONGOS

  • Orientador : RAQUEL ALVES COSTA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • MARCOS AUGUSTO DE SÁ
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • TATIANA CARLA TOMIOSSO
  • Data: 24/02/2022

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  • A pele é constantemente exposta a estímulos provenientes do meio externo que podem proporcionar alguma injúria e interferir na sua função de barreira. Portanto, mecanismos garantem o reparo das feridas, mas alguns casos podem originar cicatrizes patológicas que envolvem, dentre outros fatores, função e estética prejudicada. Com isso, inúmeras terapias estão sendo desenvolvidas para melhorar a cicatrização. O colágeno é um biomaterial com potencial para ser utilizado porque é abundante, biocompatível, biodegradável e capaz de auxiliar a migração e  proliferação celular, além de melhorar a deposição de matriz.  O colágeno também pode ser capaz de influenciar a resposta imunológica por meio de receptores inibitórios e dos efeitos indiretos da tolerância que influenciam a fase inflamatória do reparo de lesões cutâneas. Portanto, o objetivo do trabalho foi produzir um biogel de colágeno heterólogo (PEPTAN®) e verificar sua aplicação tópica sobre a ferida no dia em a lesão foi realizada e sua influência na inflamação e na deposição de matriz extracelular durante o processo de fechamento de feridas na pele de camundongos Swiss. Primeiramente foi realizada a caracterização morfológica e fisico-química dos biogéis de colágeno. Foram produzidos os biogéis: PEPTAN 1[1], PEPTAN 1[2], PEPTAN 2[1] e PEPTAN 2[2], que se diferenciam de acordo com a fonte heteróloga, suína ou bovina, e duas diferentes massas moleculares. A caracterização morfológica por MEV mostrou que os grânulos de colágeno suíno e as gelatinas, suína e bovina, possuem formatos variados, mas a maioria apresenta um formato arredondado. Os grânulos de colágeno bovino apresentam formato filamentoso.  Ao comparar o tamanho dos grânulos, têm-se que os colágenos suíno 5000, suíno 2000 e bovino 5000 apresentaram tamanhos estatisticamente semelhantes. O colágeno bovino 2000 apresentou grânulos menores quando comparado com o colágeno suíno 5000, entretanto, apresentou grânulos com tamanho semelhante aos colágenos suíno 2000 e bovino 5000. O tamanho dos grânulos de gelatina não apresentou diferenças com significância estatística. Os biogéis produzidos a partir destes biomateriais eram estruturados e porosos, sendo que os poros se formavam a partir de placas que se sobrepunham. Ao comparar o tamanho dos poros, foi observado que o biogel PEPTAN 1[2] possui poros maiores quando comparado com o biogel PEPTAN 2[2]. Os demais biogéis possuem poros de tamanhos semelhantes. A análise de DRX mostrou que os peptídeos de colágeno e as gelatinas mantêm a estrutura helicoidal do colágeno. Estes dados foram confirmados com a análise de AFM, onde foi possível observar a formação das fibras de colágeno. E por fim, a análise elementar por EDS demonstrou que em todos os colágenos e gelatinas utilizados para a produção dos biogéis detectaram C, O e N, sendo C em maior quantidade, seguida do O e N, componentes típicos de proteínas. Para avaliar os efeitos da aplicação tópica dos biogéis de colágeno heterólogo PEPTAN® no reparo de feridas cutâneas, foram realizadas análises in vivo. O modelo experimental consistiu na realização de duas lesões excisionais e uma lesão incisional na pele do dorso, sob anestesia. Em seguida, foi realizado o tratamento de acordo com o grupo experimental. O micropore que mantinha o tratamento tópico nas lesões permaneceu por 5 dias. Os animais foram eutanasiados 7 e 60 dias após a lesão e a cicatrização foi analisada macro e microscópicamente após coloração com H&E, Azul de Toluidina e Tricrômico de Gomori. Nas lesões incisionais, macroscopicamente aos 7d, o grupo PEPTAN 1[1] apresentou uma lesão esteticamente melhor, redução de fibroblastos nos grupos PEPTAN 2[1] e PEPTAN 2[2] , redução de mastócitos no grupo PEPTAN 1[2] quando comparado com o grupo PEPTAN 2[1] e Aos 60d, as lesões incisionais dos grupos PEPTAN 1[1] e PEPTAN 1[2] apresentam cicatrizes mais claras e esteticamente melhores, quando comparadas com o salina. As análises histomorfométricas demonstram que o grupo PEPTAN 2[2] apresentou uma maior deposição quando comparado com o grupo Salina. Nas lesões excisionais, aos 7d,  o grupo PEPTAN 1[2] apresentou uma menor área, ao passo que o grupo PEPTAN 1[1] apresentou uma maior área. Microscopicamente, a análise quantitativa não mostrou diferença estatística na contagem de leucócitos e mastócitos. Foi observado que o grupo PEPTAN 2[1] obteve um maior número de fibroblastos, quando comparado aos grupos PEPTAN 1[2] e PEPTAN 2[2]. Aos 60d, os grupos PEPTAN 1[1] e PEPTAN 1[2] apresentaram uma melhor deposição de colágeno quando comparado com o grupo Salina. O grupo Salina apresentou uma área de transição entre a lesão e a derme adjacente mais marcada e perceptível. Ao passo que os grupos PEPTAN 1[1] e PEPTAN 1[2] apresentaram essa transição mais suave. Concluímos que a aplicação de um curativo contendo o scaffold de colágeno heterólogo PEPTAN® melhora a cicatrização de lesões cutâneas, com um melhor remodelamento da matriz extracelular.



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  • The skin is constantly exposed to stimuli from the external environment that can cause some injury and interfere with its barrier function. Therefore, mechanisms guarantee the repair of wounds, but some cases can cause pathological scars that involve, among other factors, impaired function and aesthetics. As a result, numerous therapies are being developed to improve healing. Collagen is a biomaterial with potential to be used because it is abundant, biocompatible, biodegradable and capable of aiding cell migration and proliferation, in addition to improving matrix deposition. Collagen may also be able to influence the immune response through inhibitory receptors and the indirect effects of tolerance that influence the inflammatory phase of skin lesion repair. Therefore, the objective of this work was to produce a heterologous collagen biogel (PEPTAN®) and verify its topical application on the wound on the day the injury was performed and its influence on inflammation and extracellular matrix deposition during the wound closure process. in the skin of Swiss mice. First, the morphological and physicochemical characterization of collagen biogels was performed. Biogels were produced: PEPTAN 1[1], PEPTAN 1[2], PEPTAN 2[1] and PEPTAN 2[2], which differ according to the heterologous source, porcine or bovine, and two different molecular weights. Morphological characterization by SEM showed that porcine collagen granules and gelatins, porcine and bovine, have different shapes, but most have a rounded shape. Bovine collagen granules have a filamentous shape. When comparing the size of the granules, the porcine collagen 5000, porcine 2000 and bovine 5000 presented statistically similar sizes. Bovine collagen 2000 presented smaller granules when compared to porcine collagen 5000, however, it presented granules with a similar size to porcine collagen 2000 and bovine collagen 5000. The size of gelatin granules did not show statistically significant differences. The biogels produced from these biomaterials were structured and porous, with the pores formed from overlapping plates. When comparing the pore size, it was observed that the PEPTAN 1[2] biogel has larger pores when compared to the PEPTAN 2 biogel[2]. The other biogels have pores of similar sizes. XRD analysis showed that collagen peptides and gelatins maintain the helical structure of collagen. These data were confirmed with the analysis of AFM, where it was possible to observe the formation of collagen fibers. Finally, the elemental analysis by EDS showed that in all collagens and gelatines used for the production of biogels, C, O and N were detected, with C being the greatest amount, followed by O and N, typical components of proteins. To evaluate the effects of topical application of PEPTAN® heterologous collagen biogels on skin wound repair, in vivo analyzes were performed. The experimental model consisted of performing two excisional lesions and an incisional lesion on the skin of the back, under anesthesia. Then, the treatment was performed according to the experimental group. The micropore that maintained the topical treatment on the lesions remained for 5 days. The animals were euthanized 7 and 60 days after the injury and the healing was analyzed macro and microscopically after staining with H&E, Toluidine Blue and Gomori Trichrome. In the incisional lesions, macroscopically at 7d, the PEPTAN 1[1] group presented an aesthetically better lesion, reduction of fibroblasts in the PEPTAN 2[1] and PEPTAN 2[2] groups, reduction of mast cells in the PEPTAN 1[2] group when compared with the PEPTAN 2[1] group and At 60d, the incisional lesions of the PEPTAN 1[1] and PEPTAN 1[2] groups present clearer and esthetically better scars when compared to saline. The histomorphometric analysis shows that the PEPTAN 2[2] group showed a higher deposition when compared to the Saline group. In excisional lesions, at 7d, the PEPTAN 1[2] group presented a smaller area, while the PEPTAN 1[1] group presented a larger area. Microscopically, quantitative analysis showed no statistical difference in leukocyte and mast cell counts. It was observed that the PEPTAN 2[1] group had a higher number of fibroblasts when compared to the PEPTAN 1[2] and PEPTAN 2[2] groups. At 60d, the PEPTAN 1[1] and PEPTAN 1[2] groups showed better collagen deposition when compared to the Saline group. The saline group presented a more marked and perceptible transition area between the lesion and the adjacent dermis. While the PEPTAN 1[1] and PEPTAN 1[2] groups showed this smoother transition. We conclude that the application of a dressing containing the PEPTAN® heterologous collagen scaffold improves the healing of skin lesions, with better remodeling of the extracellular matrix. 


3
  • ALISSON KENNEDY REZENDE
  • EFEITOS SISTÊMICOS DA TOLERÂNCIA ORAL NO REPARO DE DEFEITO ÓSSEO DE RATOS WISTAR NAS FASES DE OSSIFICAÇÃO E REMODELAMENTO ÓSSEO

  • Orientador : ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALVARO CESAR DE OLIVEIRA PENONI
  • ANTONIO CARLOS SHIMANO
  • ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • Data: 22/07/2022

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  • Além de vitaminas, carboidratos e fibras, o milho presente em nossa dieta,
    oferece variedades proteicas tais como a zeína. Essa proteína, após o contato
    com o sistema imunológico via trato gastrointestinal, é capaz de induzir a
    tolerância imunológica antigênica. Trabalhos vêm demonstrando que as
    reexposições de proteínas previamente ingeridas podem melhorar o reparo de
    feridas cutâneas, com diminuição de granulomas, entre outros efeitos
    sistêmicos. Contudo, ainda não há registros dos efeitos tolerogênicos
    sistemáticos da tolerância oral no reparo do tecido ósseo pós lesão. Portanto, o
    objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos sistêmicos da proteína zeína
    tolerizada e reexposta por via parenteral no processo de reparo ósseo (28 e 45
    dias) pós osteotomia em tíbias de ratos. Foram utilizados 72 ratos Wistar
    machos, com 12 semanas de idade, sendo divididos em três grupos
    experimentais, com aplicação via i.p. de: Salina (GS), Adjuvante (Al(OH)3) (GA)
    e Zeína associada ao adjuvante (GZ). Realizou-se osteotomia de 2mm nas tíbias
    direitas, e nos tempos experimentais de 28 e 45 dias pós defeito análises
    histomorfométricas, densitometria óssea (DMO) e testes biomecânicos foram
    executados. O monitoramento de peso tanto ponderal como das tíbias
    osteomizadas não demonstrou alteração entre os grupos. Já na análise da DMO
    observamos diferenças significativas entre os grupos GS e GA. Já entre os
    tempos experimentais do GZ não houve diferença, sugerindo que em 28o dia pós
    defeito a mineralização óssea é maior. O ensaio biomecânico de cisalhamento
    realizado nas tíbias direitas apontou diferença significativa, apenas na variável
    força máxima do GZ, indicando que em 45 dias pós defeito o tecido tornou-se
    mais resistente a forças mecânicas externas. Na avaliação histológica
    observamos aceleração no processo de reparo no GZ em relação aos demais
    grupos no período de 28 dias pós defeito e similaridade entre todos os grupos
    no período de 45 dias pós defeito. Os resultados do presente trabalho
    demonstram a ação benéfica e sistêmica da tolerância oral, pós imunização por
    proteína previamente ingerida, nas fases de ossificação e remodelamento ósseo,
    sendo necessário mais estudos a fim de elucidar os mecanismos envolvidos e
    geração de novas formas terapêuticas futuras.


  • Mostrar Abstract
  • In addition to vitamins, carbohydrates, and fiber, the corn present in our diet offers
    protein varieties such as zein. This protein, after contact with the immune system
    via the gastrointestinal tract, is capable of inducing immunological antigen
    tolerance. Studies have shown that re-exposures of previously ingested proteins
    can improve the repair of skin wounds, with a decrease in granulomas, among
    other systemic effects. However, there are still no records of systematic
    tolerogenic effects of oral tolerance on post-injury bone tissue repair. Therefore,

    this study aimed to evaluate the systemic effects of zein protein tolerized and re-
    exposed parenterally on the bone repair process (28 and 45 days) after

    osteotomy in rat tibiae. Twelve-week-old male Wistar rats were used and divided
    into three experimental groups, with i.p. application of Saline (GS), Adjuvant
    (Al(OH)3) (GA), and Zeine associated with the adjuvant (GZ). A 2 mm osteotomy
    was performed on the right tibiae, and at 28 and 45 days post defect
    histomorphometric analyses, bone densitometry (BMD), and biomechanical tests
    were performed. The weight monitoring of both the weight and the osteomized
    tibiae showed no changes between the groups. In the BMD analysis, we
    observed significant differences between the GS and GA groups. There was no
    difference between the experimental time of the GS, suggesting that bone
    mineralization is greater on day 28 after the defect. The biomechanical shear
    stress test performed on the right tibiae showed a significant difference only in
    the maximum force variable of the GS, indicating that at 45 days after the defect
    the tissue became more resistant to external mechanical forces. In the
    histological evaluation, we observed acceleration of the repair process in the
    ZMG compared to the other groups at 28 days post-defense and similarity
    between all groups at 45 days post-defense. The results of the present study
    demonstrate the beneficial and systemic action of oral tolerance, after
    immunization by previously ingested protein, in the phases of ossification and
    bone remodeling. Further studies are necessary to elucidate the mechanisms
    involved and to generate new future therapeutic forms.

4
  • Graziele Mayra Santos Moreira
  • Análise histomorfométrica do tecido cardiorrespiratório de ratos com doença de Parkinson treinados com exercícios físicos de alta intensidade

  • Orientador : LILIAM MIDORI IDE
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANTONIO JOSE NATALI
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • LILIAM MIDORI IDE
  • Data: 22/07/2022

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  • Introdução: A Doença de Parkinson (DP) afeta o sistema cardiorrespiratório causando maior massa ventricular esquerda no coração e fraqueza muscular respiratória comparado aos indivíduos saudáveis. Objetivo: Analisar as alterações histomorfométricas do tecido cardíaco e dos músculos respiratórios, além do desempenho funcional dos ratos com DP submetidos ao Treinamento Intervalado de Alta Intensidade (TIAI). Materiais e Métodos: Foram utilizados 70 ratos Wistar, machos, com 40 dias de vida, distribuídos nos grupos com Parkinson (PA) e Sham (SH); subdivididos em grupos que realizaram o TIAI Antes da cirurgia (TIAIa); TIAI Depois da cirurgia (TIAId) e TIAI Antes e Depois da cirurgia (TIAIad). O exercício físico foi realizado antes e/ou após a indução da DP. Os ratos realizaram o exercício, 5 vezes na semana, por 25 minutos/dia, durante 4 ou 8 semanas. O desempenho funcional dos animais foi avaliado por meio dos testes passo em falso e barras paralelas. Para análise morfométrica do coração foi realizado o cálculo do peso relativo do coração, o diâmetro e a espessura do ventrículo esquerdo. A histoquímica da substância negra do mesencéfalo foi realizada pela coloração utilizando o método de Nissl. Os músculos do miocárdio, diafragma, intercostais e reto abdominal foram corados com Hematoxilina e Eosina (HE). O estudo da histomorfometria foi realizado com o programa Image J-Pro Plus para análise da área de seção transversal dos músculos e número de fibras musculares. A análise dos dados foi realizada com o programa estatístico GraphPad Prism 9.3, teste ANOVA one-way, seguido do post-hoc de Tukey (p<0,05). Resultados: A análise das patas traseiras com o teste de barras paralelas demonstrou que os animais treinados apresentaram melhora do desempenho funcional em comparação aos animais do grupo sedentário. A relação entre o peso corporal, o peso cardíaco e o número de cardiomiócitos não foi significativamente diferente nos animais PA e SH treinados. Houve aumento nas áreas dos músculos diafragma, intercostais e reto abdominal, nos grupos PA e SH treinados em relação aos sedentários. Conclusão: O TIAI proporcionou hipertrofia dos músculos respiratórios e do ventrículo esquerdo do coração, além de melhorar o desempenho funcional das patas traseiras dos animais com DP.


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  • Introduction: Parkinson's Disease (PD) affects the cardiorespiratory system causing greater left ventricular mass in the heart and respiratory muscle weakness compared to healthy individuals. Objective: Analyze the histomorphometric alterations of cardiac tissue and respiratory muscles, in addition to the functional performance of rats with PD submitted to TIAI. Materials and Methods: We used 70 male Wistar rats, 40 days old, divided into groups with Parkinson's (PA) and Sham (SH); subdivided into groups that performed High Intensity Interval Training Before Surgery (TIAIa); TIAI After Surgery (TIAId) and TIAI Before and After Surgery (TIAIad). Physical exercise was performed before and/or after PD induction. The rats performed the exercise, 5 times a week, for 25 minutes/day, for 4 or 8 weeks. The functional performance of the animals was evaluated by of false step and parallel bars tests. For morphometric analysis of the heart, the relative weight of the heart, diameter and thickness of the left ventricle were calculated. The histochemistry of the substantia nigra of the midbrain was performed using the Nissl method. Myocardial, diaphragm, intercostal and rectus abdominis muscles were stained with Hematoxylin and Eosin (HE). The histomorphometric study was performed with the Image J program to analyze the cross-sectional area of the muscles and the number of muscle fibers. Data analysis was performed using the GraphPad Prism 9.3 statistical program, one-way ANOVA test, followed by Tukey's post-hoc test (p<0.05). Results: The analysis of the hind legs with the parallel bars test showed that the trained animals showed improvement in functional performance compared to the animals in the sedentary group. The relationship between the body weight, heart weight and number of cardiomyocytes showed no significant difference in PA and SH trained animals. There was an increase in the areas of the diaphragm, intercostal and rectus abdominis muscles in the PA and SH trained groups compared to the sedentary ones. Conclusion: The TIAI provided hypertrophy of the respiratory muscles and left ventricle of the heart, in addition to improving the functional performance of the hind legs of animals with PD.

5
  • MARCIA REIMOL DE ANDRADE
  • Efeitos do exercício físico na escada em diferentes intensidade na placa de crescimento e no músculo sóleo de ratos jovens

  • Orientador : LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALESSANDRO DE OLIVEIRA
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • IZABEL REGINA DOS SANTOS COSTA MALDONADO
  • LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • Data: 26/07/2022

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  • Introdução: O exercício físico ajuda na prevenção de doenças cardiovasculares, diabetes e obesidade, sendo sua prática estimulada desde a infância, inclusive em atividades competitivas. Sendo assim, entende-se a importância da investigação dos efeitos do exercício físico de alta e média intensidade com carga na escada nas fibras musculares e na placa epifisária de ratos jovens, identificando seus benefícios e prejuízos. Objetivo: Avaliar os efeitos do exercício físico de alta e média intensidade na escada com carga na placa de crescimento e nas fibras do músculo sóleo em ratos jovens. Metodologia: Foi realizada escalada com peso na cauda em ratos Wistar jovens divididos em três grupos de 8 animais cada: controle, treino de alta intensidade e treino de média intensidade. As características de interesse para a placa de crescimento foram a área de contagem de células, o número de células por zona e a espessura da placa de crescimento. No músculo sóleo, foi realizado o cálculo da área das fibras musculares e o número de fibras para avaliação de hipertrofia muscular e até hiperplasia. Foi realizada a coloração com Hematoxilina-Eosina (HE) para o músculo e a placa de crescimento e com tricrômico de Gomori para coloração da placa de crescimentoPara a análise estatística, foi aplicado o teste de normalidade de Shapiro-Wilk para as distribuições das médias de cada grupo, e foi realizada ANOVA de única via com pós-teste de Tukey, considerando um nível de significância de p<0,005. Resultados: Foi identificada uma diminuição da espessura média da placa de crescimento e o aumento da área das fibras musculares esqueléticas do músculo sóleo nos grupos treinados em comparação ao grupo controle (p<0,005). A placa de crescimento apresentou menor espessura e celularidade nos grupos de treino físico, evidenciando efeitos diferentes do exercício físico com carga na placa de crescimento e no músculo sóleo. Conclusão: Conclui-se que ocorreram efeitos diferentes do exercício físico de alta e média intensidade na hipertrofia do tecido muscular e na placa de crescimento, evidenciando a necessidade de uma investigação mais aprofundada em relação às consequências para o crescimento de ratos jovens.


  • Mostrar Abstract
  • Introduction: Physical exercise assists in the prevention of cardiovascular diseases, diabetes, and obesity, and its practice is encouraged since childhood, including in competitive activities. Thus, it is important to investigate the effects of high and medium-intensity physical exercise with weights on the stairs on muscle fibers and the epiphyseal plate of young rats, identifying their benefits and disadvantages. Objective: To evaluate the effects of high and medium-intensity physical exercise with weights on the stairs on the growth plate and muscle fibers of the soleus muscle in young rats. Methods: Climbing exercises with weights attached to the tail were performed in young Wistar rats divided into three groups of 8 animals each: control, high-intensity training, and medium-intensity training. The characteristics of interest regarding the growth plate were the cell count area, the number of cells per zone, and growth plate thickness. In the soleus muscle, the muscle fiber area and the number of fibers were calculated to assess muscle hypertrophy and even hyperplasia. Staining with Hematoxylin-Eosin (HE) was carried out for the soleus muscle and the growth plate, while Gomori’s trichrome was used for growth-plate staining. For the statistical analysis, the Shapiro-Wilk normality test was applied to assess the distributions of the means of each group, and one-way ANOVA was performed using Tukey’s posttest, considering a significance level of p<0.005. Results: A decrease in mean growth plate thickness and an increase in the area of the skeletal muscle fibers of the soleus muscle were identified in the trained groups compared to the control group (p<0.005). The growth plate showed lower thickness and cellularity in the physical training groups, evidencing different effects of physical exercise with weights on the growth plate and soleus muscle. Conclusion: It can be concluded that different effects occurred with high and medium-intensity physical exercise on muscle tissue hypertrophy and on the growth plate, highlighting the need for further investigation concerning the consequences on the growth of young rats.

6
  • Silvana Venâncio da Silva
  • O EFEITO DO EXERCÍCIO FÍSICO DE ALTA INTENSIDADE NA DENSIDADE NEURONAL E EXPRESSÃO DE ASTRÓCITOS ANTES E DEPOIS DA INDUÇÃO DA DOENÇA DE PARKINSON EM RATOS

  • Orientador : LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ETEL ROCHA VIEIRA
  • ITA DE OLIVEIRA SILVA
  • LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • Data: 29/07/2022

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  • A Doença de Parkinson (DP) acomete os neurônios dopaminérgicos localizados na parte compacta da substância negra. A prática de atividade física de resistência é uma intervenção não farmacológica que vem sendo testada no tratamento da DP. Assim, o presente projeto tem como objetivo investigar os efeitos dos exercícios de alta intensidade na escada na densidade neuronal e expressão de astrócitos no encéfalo de ratos com DP que exercitaram antes e depois da indução da doença. Foram utilizados 70 ratos, Wistar, sendo distribuídos da seguinte forma: 09 animais treinados antes da indução da DP (DP-Exa), 09 treinados depois da indução da DP (DP-Exd); 10 treinados antes e depois da indução da DP (DP-Exad) e 09 animais sedentários (DP-Sed). Os mesmos grupos foram distribuidos para o grupo sem DP (Sham)O treinamento físico de alta intensidade foi realizado na escada vertical antes e/ou após a indução da DP. Foi realizado durante 5 dias/semana, 30 a 45 minutos, por 4 semanas. A indução da DP foi realizada pelo modelo de lesão eletrolítica nas coordenadas: AP igual a -4,9, ML igual a 1,7 e DV igual a 8,1. O desempenho motor dos animais foi avaliado no início e no final do treinamento com os testes passo em falso, barras paralelas e campo aberto. No final do experimento, o encéfalo foi retirado para histoquímica, através da coloração pelo método de Nissl, e imunohistoquímica por expressão da Proteína Ácida Fibrilar Glial (GFAP) dos astrócitos da sustância negra e estriado. O estudo histomorfométrico foi realizado com o programa Image J para contagem dos neurônios e dos astrócitos (GFAP). Utilizou-se o programa GraphPad Prism 9.3, teste ANOVA one-way, seguido do post-hoc de Tukey (p<0,05). A análise demonstrou melhor desempenho dos animais que treinaram em comparação ao grupo sedentário, nos testes de barras paralelas e campo aberto. Os dados da contagem de neurônio no striatum, na substância negra e GFAP, nos animais dos grupos DP-Exa, Sham-Exa, DP-Exad e Sham-Exad apresentaram maior quantidade de neurônios e maior expressão de GFAP, quando comparados aos grupos DP-Exd, Sham-Exd, DP-Sed e Sham-Sed. Dessa forma foi possível concluir que os animais que realizaram o treinamento de alta intensidade antes, e antes e depois da indução da DP apresentaram maiores densidades de neurônios e astrócitos.


  • Mostrar Abstract
  • Parkinson's disease (PD) affects dopaminergic neurons located in the pars compacta of the substantia nigra. The practice of resistance physical activity is a non-pharmacological intervention that has been tested in the treatment of PD. Thus, the present project aimed to investigate the effects of high-intensity exercise on neuronal density and astrocyte expression in the brain of rats with PD that exercised before and after disease induction. Seventy Wistar rats were used, distributed as follows: 09 animals trained before PD induction (DP-Exa), 09 trained after PD induction (DP-Exd); 10 trained before and after PD induction (DP-Exad) and 09 sedentary animals (DP-Sed). The same groups were distributed to the group without PD (Sham). High-intensity physical training was performed on the vertical ladder before and/or after PD induction. It was performed for 5 days/week, 30 to 45 minutes, for 4 weeks. PD induction was performed using the electrolytic lesion model in the coordinates: AP equal to -4.9, ML equal to 1.7 and DV equal to 8.1. The animals' motor performance was evaluated at the beginning and at the end of training with false step the test, parallel bars test and open field tests. At the end of the experiment, the brain was removed for histochemistry, staining by the Nissl method, and immunohistochemistry by expression of Glial Fibrillary Acid Protein (GFAP) from the substantia nigra and striatum. The histomorphometric study was performed with the Image J program for counting neurons and astrocytes (GFAP). The GraphPad Prism 9.3 program was used, one-way ANOVA test, followed by Tukey's post-hoc (p<0.05). The analysis showed better performance of the animals that trained compared to the sedentary group, in the parallel bars and open field tests. Data on neuron counts in the striatum, substantia nigra and GFAP in the animals of the DP-Exa, Sham-Exa, DP-Exad and Sham-Exad groups showed a greater number of neurons and greater expression of GFAP, when compared to the groups DP-Exd, Sham-Exd, DP-Sed and Sham-Sed. in conclusion, the groups of animals that performed high-intensity training before, before and after PD induction had higher densities of neurons and astrocytes.

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  • VICTORIA BESSA ALVARENGA LIMA
  • Estudo do efeito de extratos do Ginkgo biloba e da quercetina no ducto deferente de camundongo

  • Orientador : PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ADOLFO GARCIA ERUSTES
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • Data: 10/08/2022

  • Mostrar Resumo
  • As plantas medicinais têm sido utilizadas por exercerem um papel importante no que
    tange à saúde humana. O Ginkgo biloba (GB) é uma das espécies de árvores mais antigas
    do mundo. O seu extrato (GBE) é utilizado na medicina tradicional chinesa há cerca de
    5000 anos, para tratar diferentes enfermidades. Já foi demonstrado, o efeito relaxante do
    GBE em diferentes órgãos de musculatura lisa, porém, até onde foi possível pesquisar,
    ainda não há trabalhos que demonstrem o efeito de extrato de Ginkgo biloba no ducto
    deferente. O ducto deferente (DD) conduz os espermatozoides no momento da
    ejaculação. Esse evento ocorre pela contração das células musculares lisas do DD, que
    desempenham um papel importante na fase de emissão da ejaculação sendo que alterações
    nessa contração podem levar a distúrbios ejaculatórios, como a ejaculação precoce (EP).
    A EP é considerado o distúrbio sexual mais comum na população masculina,
    caracterizada pela ejaculação que sempre ou quase sempre ocorre antes ou cerca de 1
    minuto após a penetração vaginal. Assim, nosso objetivo foi estudar o efeito dos extratos
    de GBE sob a contração do ducto deferente, uma vez que alterações nessa contração
    podem estar associadas à EP. Para isso, foram utilizados camundongos Swiss machos
    com 60 dias de vida. Os ductos deferentes (DD) foram isolados e imersos em líquido
    nutritivo em um sistema de banho de órgãos. A estimulação da contração, no DD, foi feita
    com cloreto de potássio (KCl 80mM). Após a estabilização da resposta contrátil, foram
    realizadas outras curvas de KCl, porém na presença de concentrações crescentes de um
    dos extratos de GBE (GB1 ou GB2) ou quercetina, um composto flavonoide presente no
    GB. Além disso, o efeito destas substâncias também foi testado na presença da nifedipina
    ou quercetina. Nossos resultados demonstram que os extratos de GB, a quercetina e a
    nifedipina são capazes de inibir os componentes fásico e tônico da contração induzida por
    KCl. O efeito de GB1, sob o componente tônico, foi potencializado na presença da
    nifedipina. O mesmo acontece quando analisamos o efeito do extrato GB2, porém na
    presença da quercetina. Quando comparamos o componente tônico entre os diferentes
    grupos experimentais (GB1: Nifedipina+GB1 ou GB2: Nifedipina+GB2 e
    Quercetina+GB2, observamos que, na presença da nifedipina ou da quercetina, a inibição
    da contração causada por GB1 ou GB2 foi potencializada quando comparamos com a
    inibição que ocorre somente na presença dos extratos. Diferente do que ocorreu na
    comparação dos grupos Quercetina e Nifedipina+Quercetina, onde houve um aumento no
    efeito inibitório da quercetina na presença da nifedipina sob ambos os componentes,fásico e tônico. Esses resultados indicam que GB1, GB2 e a quercetina são capazes de inibir algum mecanismo que pode estar envolvido com a geração da contração induzida

    por KCl em ducto deferente de camundongo. Além disso, também sugerem que este efeito
    inibitório não é dependente exclusivamente da inibição dos canais de cálcio voltagem
    dependente. Assim, estes achados apontam que o GBE, bem como a quercetina, podem
    ser estratégias farmacológicas para o tratamento de EP.


  • Mostrar Abstract
  • Medicinal plants have been used because they play an important role in human health.
    Ginkgo biloba (GB) is one of the oldest tree species in the world. Its extract (GBE) has
    been used in traditional Chinese medicine for about 5000 years to treat different ailments.
    It has been demonstrated, the relaxing effect of GBE in different organs of smooth
    muscle, however, as far as it has been possible to research, there are still no studies
    demonstrating the effect of Ginkgo biloba extract on the vas deferens. The vas deferens
    (DD) conducts the spermatozoa at the moment of ejaculation. This event occurs by the
    contraction of the smooth muscle cells of the DD, which play an important role in the
    emission phase of ejaculation, and changes in this contraction can lead to ejaculatory
    disorders, such as premature ejaculation (PE). PE is considered the most common sexual
    disorder in the male population, characterized by ejaculation that always or almost always
    occurs before or about 1 minute after vaginal penetration. Thus, our objective was to study
    the effect of GBE extracts on the contraction of the vas deferens, since alterations in this
    contraction may be associated with PE. For this purpose, 60-day-old male Swiss mice
    were used. The vas deferens (DD) were isolated and immersed in nutrient fluid in an
    organ bath system. Stimulation of contraction, in the DD, was done with potassium
    chloride (KCl 80mM). After stabilization of the contractile response, further KCl curves
    were performed, but in the presence of increasing concentrations of one of the EGB
    extracts (GB1 or GB2) or quercetin, a flavonoid compound present in GB. In addition,
    the effect of these substances was also tested in the presence of nifedipine or quercetin.
    Our results demonstrate that GB extracts, quercetin and nifedipine are able to inhibit the
    phasic and tonic components of KCl-induced contraction. The effect of GB1, under the
    tonic component, was potentiated, in the presence of nifedipine. The same happens when
    we analyzed the effect of GB2 extract, but in the presence of quercetin. When we
    compared the tonic component between the different experimental groups (GB1:
    Nifedipine+GB1 or GB2: Nifedipine+GB2 and Quercetin+GB2, we observed that, in the
    presence of nifedipine or quercetin, the inhibition of contraction caused by GB1 or GB2
    was potentiated when compared with the inhibition that occurs only in the presence of the
    extracts. Unlike when comparing the Quercetin and Nifedipine+Quercetin groups, where
    there was an increase in the inhibitory effect of quercetin in the presence of nifedipine
    under both phasic and tonic components. These results indicate that GB1, GB2 and
    quercetin are able to inhibit some mechanism that may be involved with the generation

    of KCl-induced contraction in mouse ductus deferens. Furthermore, they also suggest that
    this inhibitory effect is not solely dependent on inhibition of voltage-dependent calcium
    channels. Thus, these findings point out that GBE as well as quercetin may be
    pharmacological strategies for the treatment of PE.

8
  • Elisangela Elduina Ferreira
  • Efeitos do uso de extrato etanólico e da fração hidroetanólica do fruto maduro de Solanum lycocarpum  no processo de cicatrização de feridas cutâneas em camundongos

  • Orientador : FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • LUCIANA ALVES RODRIGUES DOS SANTOS LIMA
  • PAULA VIEIRA TEIXEIRA VIDIGAL
  • Data: 22/08/2022

  • Mostrar Resumo
  • As espécies vegetais apresentam-se como uma rica fonte para a descoberta de
    princípios ativos e desenvolvimento de novas terapêuticas. A espécie Solanum lycocarpum
    A.St.-Hil apresenta efeitos antioxidantes, antiinflamatório e antimicrobiano já confirmados
    em alguns modelos experimentais. Além disso, diversos fitoconstituintes presentes nos
    extratos utilizados foram encontrados em outras espécies do gênero, como alguns compostos
    fenólicos, que foram relacionados aos efeitos de melhoria do processo de cura, com efeitos
    individuais ou sinérgicos sobre uma ou mais etapas da cicatrização de feridas. O projeto de
    pesquisa teve como objetivo analisar os efeitos do uso de extrato etanólico e da fração
    hidroetanólica do fruto maduro de Solanum lycocarpum no processo de cicatrização de feridas
    cutâneas em camundongos. Setenta e dois animais foram distribuídos de forma aleatória em
    três grupos, sendo um Grupo Controle que recebeu aplicação tópica de solução salina
    fisiológica, um grupo tratado com extrato etanólico e um grupo tratado com a fração
    hidroetanólica do fruto maduro de Solanum lycocarpum. Cada grupo foi subdividido em
    quatro outros subgrupos conforme o período de tratamento: 1, 5, 7 e 21 dias, com n=6 em
    cada subgrupo. Para confecção das feridas excisionais foi utilizado um punch metálico
    dermatológico, com 7 mm de diâmetro. Foram feitas avaliações macroscópicas de cada lesão,
    diariamente, para verificar a presença de sinais inflamatórios (edema, hiperemia), presença de
    crostas e secreções, e para o cálculo da taxa de contração das feridas. Decorridos 1, 5, 7 ou 21
    dias após a confecção da lesão excisional, os animais foram eutanasiados por dose letal de
    anestésicos. Um fragmento contendo a ferida foi retirado, clivado e fixado em solução de
    formol a 10% neutro tamponado. Posteriormente, o material foi processado histologicamente
    e corado por métodos histológicos e histoquímicos, para avaliação histopatológica e
    morfométrica do infiltrado inflamatório, dos fibroblastos, da reepitelização e da deposição de
    colágeno, após tratamento tópico diário com extrato etanólico do fruto maduro de Solanum
    lycocarpum e da sua fração hidroetanólica. Os resultados mostram que macroscopicamente
    esses tratamentos não interferiram no fechamento das feridas excisionais, ao longo dos 21
    dias. A aplicação tópica de extrato etanólico do fruto maduro de Solanum lycocarpum reduziu
    o infiltrado inflamatório e as áreas de edema, após 1, 5 ou 7 dias de tratamento. Não foram
    observadas diferenças na contagem de fibroblastos, mastócitos e vasos sanguíneos. Nos
    grupos tratados, o processo de remodelamento mostrou-se em andamento, no entanto, nota-se uma melhor evolução no grupo que recebeu extrato etanólico, onde os epitélios estavam mais semelhantes ao das áreas sem lesão.


  • Mostrar Abstract
  • Plant species are a rich source for the discovery of active principles and the development of
    new therapies. The species Solanum lycocarpum A.St.-Hil has antioxidant, anti-inflammatory
    and antimicrobial effects confirmed in some experimental models. In addition, several
    phytochemicals present in the extracts used were found in other species of the genus, such as
    some phenolic compounds, which were related to the effects of improving the healing
    process, with individual or synergistic effects on one or more stages of wound healing. The
    research project aimed to analyze the effects of the use of ethanolic extract and the
    hydroethanolic fraction of the ripe fruit of Solanum lycocarpum on the healing process of skin
    wounds in mice. Seventy-two animals were randomly divided into three groups, a Control
    Group that received topical application of physiological saline solution, a group treated with
    ethanol extract and a group treated with the hydroethanolic fraction of the ripe fruit of
    Solanum lycocarpum. Each group was subdivided into four other subgroups according to the
    treatment period: 1, 5, 7 and 21 days, with n=6 in each subgroup. To make the excisional
    wounds, a metallic dermatological punch, 7 mm in diameter, was used. Macroscopic
    evaluations of each lesion were performed daily to verify the presence of inflammatory signs
    (edema, hyperemia), the presence of crusts and secretions and to calculate the rate of
    contraction of the wounds. After 1, 5, 7 or 21 days after the excisional lesion, the animals
    were euthanized by a lethal dose of anesthetic. A fragment containing the wound was
    removed, cleaved and fixed in a 10% neutral buffered formalin solution. Subsequently, the
    material was histologically processed and stained by histological and histochemical methods,
    for histopathological and morphometric evaluation of the inflammatory infiltrate, fibroblasts,
    re-epithelialization and collagen deposition, after daily topical treatment with ethanolic extract
    of the ripe fruit of Solanum lycocarpum and its hydroethanolic fraction. The results show that
    macroscopically the treatments did not interfere with the closure of excisional wounds over
    the 21 days. Topical application of ethanolic extract from the ripe fruit of Solanum
    lycocarpum reduced the inflammatory infiltrate and areas of edema after 1, 5 or 7 days of treatment. No differences were observed in fibroblast, mast cell and blood vessel counts. In the treated groups, the remodeling process was in progress, however, a better evolution was observed in the group that received ethanol extract, where the epithelium was more similar to that of the areas without lesion.

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  • JUAN FILLIPE DA SILVA MONTEIRO
  • Banca Fechada.

  • Orientador : RAQUEL ALVES COSTA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • GISELE VIANA DE OLIVEIRA
  • CLAUDIA ROCHA CARVALHO
  • ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • Data: 06/12/2022

  • Mostrar Resumo
  • Banca fechada.


  • Mostrar Abstract
  • Banca fechada.

2021
Dissertações
1
  • MONIQUE MACEDO COELHO
  • AVALIAÇÃO DA ASSOCIAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS DE OURO À OVALBUMINA COMO ADJUVANTE EM RESPOSTA IMUNE

  • Orientador : RAQUEL ALVES COSTA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • CLAUDIA ROCHA CARVALHO
  • ETEL ROCHA VIEIRA
  • ALICE FREITAS VERSIANI
  • Data: 01/02/2021

  • Mostrar Resumo
  • Existem várias propostas de interferências na resposta imunológica, preventivas ou terapeuticas. Uma dessas formas de interferência, muito promissora, que vem sendo estudada é a injeção de proteínas imunologicamente toleradas. A tolerância oral é um fenômeno que inibe a resposta imune, como a formação de anticorpos específicos, após imunização com antígeno acrescida de adjuvante em animais previamente expostos à proteína via oral. Nesse trabalho, estudamos se aplicação subcutânea (s.c,) em camundogos, de nanopartículas de ouro (AuNPs) associadas a Ovalbumina (OVA) contribuiria no estabelecimento da tolerância oral, como um material adjuvante. Nesse sentido, sintetizamos AuNPs esféricas, com aproximadamente 7 nm, funcionalizamos com OVA e fizemos a caracterização físico-química do material, para isso, utilizamos a Espectroscopia de Ultravioleta-Visível (UV-Vis), Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET), Espalhamento Dinâmico de Luz (DLS) e o Pontencial Zeta. Posteriormente, foi feito um tratamento oral com OVA por 5 dias consecutivos em camundongos Swiss, machos, de 8 semanasde idade. Sete dias após o tratamento oral todos os animais receberam suas injeções primárias (s.c) na base da cauda e vinte e um dias após as injeções primárias os animais receberam as injeções secundárias (s.c). No dia das injeções primárias, foram feitas lesões em uma das orelhas dos camundongos. Avaliamos o potencial de imunização, bem como o estabelecimento da tolerância a OVA dos animais, verificando o título de anticorpos anti-OVA totais com o Ensaio de Imunoabsorção Enzimática (ELISA). Também foi avaliada, histologicamente, a base da cauda, no local em que os animais receberam as injeções e as lesões das orelhas, para avaliação dos efeitos indiretos da tolerância oral. Os resultados demonstraram que as AuNP+OVA tem um papel adjuvante e conseguem manter os efeitos indiretos da tolerância oral. Posteriormente, para entender quais vias de sinalização intracelular as AuNPs e AuNPs+OVA podem interferir nas respostas imunes, modelamos in silico interações entre as AuNPs e AuNPs+OVA com as proteínas OVA, LC3; ASC PYCARD; Glutationa; TLR4; PI3K e NF-Kβ. Com isso, verificamos que a AuNP tem maior afinidade com a molécula de OVA, seguido pela Glutationa e domínio ASC PYCARD, já a AuNP+OVA tem maior afinidade com a molécula de Glutationa, seguido pelo NF-Kβ. Esses resultados sugerem que nossas AuNPs e nossas AUNPs+OVA podem
    14
    estar interfirindo em vias de autofagia celular, as AuNPs nas vias celulares inflamatórias e apoptóticas e AUNPs+OVA em vias inflamatórias. Mas são necessárias maiores investigações para confirmar e entender esses ensaios.


  • Mostrar Abstract
  • There are several proposals for interferences in the immune response, either preventive or therapeutic. One of these very promising forms of interference that has been studied is the injection of immunologically tolerated proteins. Oral tolerance is a phenomenon that inhibits the immune response, such as the formation of specific antibodies, after immunization with antigen plus adjuvant in animals previously exposed to the protein via the oral route. In this work, we studied whether subcutaneous application (s.c.) in mice, of gold nanoparticles (AuNPs) associated with Ovalbumin (OVA) would contribute to the establishment of oral tolerance, as an adjuvant material. In this sense, we synthesized spherical AuNPs, with approximately 7 nm, functionalized with OVA and made the physical-chemical characterization of the material, for that, we used the Ultraviolet-Visible Spectroscopy (UV-Vis), Transmission Electron Microscopy (MET), Scattering Dynamic Light (DLS) and the Zeta Pontential. Subsequently, an oral treatment with OVA was performed for 5 consecutive days in Swiss, male, 8-week-old mice. Seven days after oral treatment, all animals received their primary injections (s.c) at the base of the tail and twenty-one days after the primary injections, the animals received secondary injections (s.c). On the day of the primary injections, lesions were made in one of the mice's ears. We evaluated the immunization potential, as well as the establishment of the OVA tolerance of the animals, verifying the total anti-OVA antibody titer with the Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA). The base of the tail was also histologically evaluated, at the place where the animals received injections and ear injuries, to assess the indirect effects of oral tolerance. The results demonstrated that AuNP + OVA have an adjuvant role and are able to maintain the indirect effects of oral tolerance. Subsequently, to understand
    16
    which intracellular signaling pathways AuNPs and AuNPs + OVA can interfere with immune responses, we did a modeling in silico interactions between AuNPs and AuNPs + OVA with OVA, LC3 proteins; ASC PYCARD; Glutathione; TLR4; PI3K and NF-Kβ. That way, we verified that AuNP has greater affinity with the OVA molecule, followed by Glutathione and ASC PYCARD domain, whereas AuNP + OVA has greater affinity with the Glutathione molecule, followed by NF-Kβ. These results suggest that our AuNPs and AUNPs + OVA may be interfering in cell autophagy pathways, AuNPs in inflammatory and apoptotic cell pathways and AUNPs + OVA in inflammatory pathways. However investigation is needed to confirm and understand these trials.

2
  • BRUNO HENRIQUE COSTA
  • ESTUDO DOS EFEITOS SISTÊMICOS DA TOLERÂNCIA ORAL NO PROCESSO DE REPARO DE DEFEITO ÓSSEO EM RATOS WISTAR
  • Orientador : ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ERIKA LORENA FONSECA COSTA DE ALVARENGA
  • CLAUDIA ROCHA CARVALHO
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • MARCOS AUGUSTO DE SÁ
  • Data: 19/02/2021

  • Mostrar Resumo
  • Com o aumento da longevidade o número de lesões ósseas tem
    aumentado significativamente, sendo relacionado a quedas e/ou distúrbios
    metabólicos, como osteoporose, que podem afetar no processo de reparo e
    remodelamento ósseo. O processo de reparo nos ossos ocorre em 3 fases que
    se sobrepõe: Inflamatória, formação de calo e remodelamento. Uma fase crítica
    no reparo de lesões ósseas é a inflamatória, visto que é onde ocorrem as
    migrações de células como macrófagos, neutrófilos, linfócitos para o sítio da
    lesão e a produção de citocinas e fatores de crescimento que vão regular toda a
    cinética do reparo, afetando-o de forma positiva ou negativa. Um fenômeno que
    tem demonstrado reduzir os efeitos inflamatórios são os efeitos sistêmicos da
    tolerância oral, como já demonstrado na melhora do reparo de feridas de pele,
    diminuição do tamanho de granulomas, entre outros. Entretanto até o momento
    não há registro de estudos dos efeitos da tolerância oral no processo de reparo
    do tecido ósseo lesionado. Neste trabalho investigamos se os efeitos da
    tolerização oral com injeção i.p. da proteína zeína (componente da ração de
    ratos) adsorvida em hidróxido de alumínio no dia em que o defeito ósseo foi feito
    em tíbias de ratos machos Wistar, interefere no processo de reparo 7, 14 e 28
    dias pós lesão o tecido ósseo por análises histopatológicas, de raio-X, tomografia
    digital computadorizada e de força mecânica. A pesagem dos úmeros revelou
    que a possível adaptação dos animais após o procedimento cirúrgico não
    interfere na massa óssea dos úmeros. Os pesos das tíbias também foram
    medidos e sugerem que a tolerização mantém o peso das tíbias lesionadas nos
    períodos de 14 e 28 dias semelhante ao da tíbia não lesionada do mesmo animal,
    enquanto os demais grupo apresentaram um aumento de peso na tíbia lesionada
    em relação ao seu controle. Os achados deste trabalho revelam aceleração no
    processo de reparo em animais que receberam injeção de zeína adsorvida em
    Al(OH)3 nos períodos de 7 e 14 dias por histomorfometria. A qualidade do osso
    neoformado dos animais tolerizados por meio de testes mecânicos revelam por
    DMO e raio-X que animais tolerizados com 28 dias após a lesão apresentam
    aumento da mineralização no local da lesão além de maior suporte a cargas
    mecânicas, observado em teste de flexão biapoiada. Os resultados da tomografia digital computadorizada revelaram aumento na mineralização do
    local da lesão em animais tolerizados com 45 dias após o procedimento cirúrgico.
    As análises morfológicas dos baços não mostraram diferenças significativas nos
    períodos estudados. Sendo assim esse trabalho foi pioneiro no estudo dos
    efeitos da tolerância oral por zeína em reparo ósseo, demonstrando melhora
    significativa no processo de reparo de defeito ósseo. Faz-se necessário mais
    estudos a fim de compreender melhor os efeitos da tolerância oral no tecido e no
    processo de reparo ósseo.

  • Mostrar Abstract
  • With the increase in longevity the number of bone injuries has increased
    significantly, being related to falls and / or metabolic disorders, such as
    osteoporosis, which can affect the bone repair and remodeling process. The bone
    repair process occurs in 3 overlapping phases: Inflammatory, callus formation
    and remodeling. A critical phase in the repair of bone injuries is inflammatory,
    since it is where migrations of cells such as macrophages, neutrophils,
    lymphocytes to the injury site occur and the production of cytokines and growth
    factors that will regulate all the kinetics of the repair, affecting you positively or
    negatively. A phenomenon that has been shown to reduce inflammatory effects
    is the systemic effects of oral tolerance, as already demonstrated in improving
    skin wound repair, decreasing the size of granulomas, among others. However,
    to date, there is no record of studies on the effects of oral tolerance in the repair
    process of injured bone tissue. In this work we investigate whether the effects of
    oral toleration with i.p. of the zein protein (component of the ration of rats)
    adsorbed on aluminum hydroxide on the day that the bone defect was made in
    tibias of male Wistar rats, interferes in the repair process 7, 14 and 28 days after
    injury the bone tissue by histopathological analyzes, X-ray, digital computed
    tomography and mechanical strength. The weighing of the humerus revealed that
    the possible adaptation of the animals after the surgical procedure does not
    interfere with the bone mass of the humerus. The tibial weights were also
    measured and suggest that the tolerance maintains the weight of the injured tibia
    in the periods of 14 and 28 days similar to that of the uninjured tibia of the animal
    memo, while the other groups showed an increase in weight in the injured tibia
    compared to the your control. The findings of this work reveal an acceleration in
    the repair process in animals treated with zein in the periods of 7 and 14 days by
    histomorphometry. The quality of the newly formed bone of animals tolerated by
    means of mechanical tests reveals by BMD and X-ray that animals tolerated at
    28 days after the injury show increased mineralization at the injury site in addition
    to greater support for mechanical loads, observed in flexion test supported. The
    results of digital computed tomography revealed an increase in mineralization of the lesion site in animals tolerated 45 days after the surgical procedure.
    Morphological analyzes of the spleens did not show significant differences in the
    studied periods. Thus, this work was a pioneer in the study of the effects of oral
    zein tolerance on bone repair, demonstrating significant improvement in the bone
    defect repair process. Further studies are needed to better understand the effects
    of oral tolerance on tissue and the bone repair process.


3
  • GENIANE VIANA RABELO
  • EFEITO DO AGERATUM CONYZOIDES SOBRE ÓRGÃOS DE MUSCULATURA LISA

  • Orientador : PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • MEMBROS DA BANCA :
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • LUCIANO RIVAROLI
  • EDILSON DANTAS DA SILVA JUNIOR
  • Data: 31/05/2021

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  • As plantas medicinais são muito utilizadas na medicina popular, entre elas temos a espécie Ageratum conyzoides, conhecida popularmente como “mentrasto”. Esta é uma planta tropical, que possui uma ampla variedade de metabólitos secundários que incluem terpenos, esteroides e alcaloides, além de óleos essenciais. O A. conyzoides é utilizado na medicina popular para o tratamento de febres, cólicas, úlceras e doenças inflamatórias. Alguns estudos demonstraram o efeito benéfico da fração aquosa de A. conyzoides sobre a hiperplasia prostática benigna, efeito antitumoral e relaxamento dos órgãos jejuno, duodeno e útero. Não há na literatura nenhum trabalho demonstrando o efeito do óleo essencial de A. conyzoides, por isso o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do óleo essencial de A. conyzoides sobre a contração de órgãos de musculatura lisa, assim como tentar descrever seu possível mecanismo de ação. Para a realização dos experimentos foram utilizados ductos deferente e jejuno de camundongos. Estes órgãos foram estimulados respectivamente com KCl, adrenalina e KCl e carbacol. Doses crescentes de óleo essencial de A. conyzoides foram pré-incubados na presença e na ausência de nifedipina. Para comparar o efeito do óleo com o efeito da nifedipina foi utilizado o parâmetro farmacológico de IC50. A análise fitoquímica mostrou que o precoceno I está em maior porcentagem em nosso óleo. O óleo essencial de A. conyzoides, foi capaz de inibir tanto o componente fásico quanto o componente tônico da contração do ducto deferente induzido por KCl ou por adrenalina. A nifedipina também inibiu a contração. O efeito de A. conyzoides foi potencializado na presença da nifedipina, sendo o componente tônico da contração por KCl e os componentes fásico e tônico da contração induzida por adrenalina mais sensível do que o efeito somente do A. conyzoides sobre os respectivos componentes. No jejuno, o componente fásico da contração induzida por KCl é mais sensível à ação de A. conyzoides do que o tônico. Na presença da nifedipina o efeito do óleo foi potencializado, porém somente sobre o componente fásico. Dessa maneira, nossos resultados sugerem que o óleo essencial de A. conyzoides inibe a contração de órgãos de musculatura lisa e que este efeito pode estar acontecendo por inibição dos canais de cálcio voltagem dependente bem como por um outro mecanismo responsável pela contração muscular.


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  • Medicinal plants are widely used in folk medicine, among them we have the species Ageratum conyzoides, popularly known as "mentrasto". This is a tropical plant, which has a wide variety of secondary metabolites that include terpenes, steroids and alkaloides, plus essential oils. A. conyzoides is used in folk medicine for the treatment of fevers, ulcers and inflammatory diseases. Some studies have shown the beneficial effect of aqueous fraction of A. conyzoides on benign prostatic hyperplasia, antitumor effect and relaxation of the jejunum, duodenum and uterus. There is no work in the literature demonstrating the effect of the essential oil of A. conyzoides, so the objective this work was to evaluate the effect of the essential oil of A. conyzoides on the contraction of smooth muscle organs, as well as to try to describe possible mechanism of action. To perform the experiments, vas deferens and mouse jejunum were used. These organs were stimulated respectively with KCl, adrenaline and KCl and carbacol. Increasing doses of essential oil of A. conyzoides were preincubated in the presence and absence of nifedipine. To compare the effect of the oil with the effect of nifedipine, IC50 was used. Phytochemical analysis showed that precocen I is in greater quantity in our oil. The essential oil of A. conyzoides was able to inhibit both the phasic component and the tonic component of KCl or adrenaline-induced vas deferens contraction. Nifedipine also inhibited contraction. The effect of A. conyzoides was enhanced in the presence of nifedipine, being the phasic component KCl contraction and the phasic and tonic components of the most sensitive adrenaline-induced contraction than the effect only of A. conyzoides on its components. In the jejunum, the phasic composition of KCl-induced contraction is more sensitive to the action of A. conyzoides than the tonic. In the presence of nifedipine the effect of the oil was enhanced, but only on the phasic component. In this way, our results suggest that the essential oil of A. conyzoides can inhibit voltage-gated calcium channels and may be acting in another mechanism responsible for inhibiting muscle contraction of smooth muscle organs.

4
  • MATHEUS VIANA
  • Efeito do óleo essencial de Ageratum conzyzoides sobre as contrações uterinas e a influência das alterações hormonais do ciclo estral e castração neste efeito.

  • Orientador : PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • MEMBROS DA BANCA :
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • JOAQUIM MAURICIO DUARTE ALMEIDA
  • EDILSON DANTAS DA SILVA JUNIOR
  • Data: 14/12/2021

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  • Plantas medicinais são uma importante fonte terapêutica, podendo ser utilizadas no tratamento de inúmeras patologias. Ageratum conyzoides, uma espécie da família Asteraceae popularmente conhecida como “mentrasto” ou “caatinga-de-bode”, é uma planta comumente utilizada contra desconfortos pélvicos, além de possuir relatos de ações anti-inflamatórias, antibióticas, analgésicas, entre outras. Alguns trabalhos descreveram a atividade relaxante de A. conyzoides na musculatura lisa. Contudo, nenhum trabalho verificou a ação do óleo essencial da planta em útero. Com isso, o objetivo do trabalho foi estudar o efeito do óleo essencial de A. conyzoides em útero e a influência do estágio do ciclo estral e castração em sua ação, bem como tentar elucidar o seu mecanismo de ação. Para isso foram utilizados camundongos Swiss fêmeas em diferentes fases do ciclo estral (estro e diestro) ou castradas. Em cada um dos grupos, foi realizada a estimulação da contração com cloreto de potássio (KCl; 80mM) em amostras de útero isoladas in vitro no sistema de banho de órgãos, precedida da incubação de diferentes concentrações do óleo essencial de A. conyzoides e/ou nifedipina, um inibidor clássico dos canais de cálcio dependentes de voltagem. Os resultados mostram que o óleo essencial de A. conyzoides inibe efetivamente os componentes fásico e tônico das contrações uterinas induzidas por KCl. As mudanças hormonais do ciclo estral não influenciam na ação relaxante do óleo porém fêmeas castradas apresentam uma sensibilidade maior a esta ação.  A nifedipina potencializa o efeito do óleo essencial de A. conyzoides apenas sob a inibição da resposta tônica da contração uterina de fêmeas em estro, sugerindo que o óleo pode estar atuando tanto em canais de cálcio dependentes de voltagem quanto em algum outro mecanismo relacionado à sinalização envolvida na dinâmica de contração e relaxamento. Estes achados apontam que o óleo pode ser utilizado na clínica médica no tratamento de disfunções associadas a contrações uterinas exacerbadas.



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  • Medicinal plants are an important therapeutic source, being used in the treatment of innumerous pathologies. Ageratum conyzoides is a species from the Asteraceae family popularly known as “mentrasto” or “caatinga-de-bode” and commonly used against pelvic discomforts besides reports of anti-inflammatory, anti-biotic and analgesic actions, among others. Some papers have described the relaxing activity of A. conyzoides in smooth muscule. However, there is no evidence around its essential oil relaxing action on uterine contractions. Thus, the main objective was to study A. conyzoides essential oil effects in uterus and the influence of the stage of estrus cycle and castration on it as well as try to elucidate its action mechanism. Female Swiss mice were or castrated or selected in different stages of the estrus cycle (oestrus and diestrus). In each group, contractions were induced on isolated uterus stripes in vitro by potassium chloride (KCl; 80mM) in the organ bath system, preceded by different concentrations of A. conyzoides essential oil and/or nifedipine, a classic voltage-gated calcium channel blocker. The results show that A. conyzoides essential oil effectively inhibit both phasic and tonic components of the uterine contraction induced by KCl. Hormonal changes during estrus cycle do not influence in the oil’s relaxing activity and castrated females display a more sensitive to its effect.  Nifedipine potentiates the oil’s effect only upon the inhibition of the tonic component of uterine contraction from females in oestus, suggesting that the oil may be acting so much in voltage-gated calcium channels as well as another mechanism related to the signalization involved in the contraction and relaxation dynamics. This founding show that Ageratum conyzoides essential oil can be used in the clinic against disfunctions associated to exacerbated uterine contractions.


2020
Dissertações
1
  • FILIPE RESENDE OLIVEIRA DE SOUZA
  • Avaliação de paramêtros imunológicos e expressão dos receptores do peptídeo vasoativo intestinal (VPAC1 e 2) em baços de camundongos neonatos oriundos de mães infectadas e não infectadas com Zika vírus

  • Orientador : PATRICIA MARIA D ALMEIDA LIMA
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ETEL ROCHA VIEIRA
  • FABÍOLA MARA RIBEIRO
  • PATRICIA MARIA D ALMEIDA LIMA
  • Data: 17/08/2020

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  • O Zika vírus (ZIKV) é um patógeno emergente da família Flaviviridae, transmitido por

    mosquitos do gênero Aedes. Nos últimos anos, ZIKV tem causado anormalidades

    neurológicas e Síndrome de Guillain-Barré em adultos, e em gestantes, complicações

    para o desenvolvimento fetal, incluindo a Síndrome Congênita do Zika. O peptídeo

    vasoativo intestinal (VIP) é um peptídeo com propriedades antiinflamatórias e

    imunomoduladoras. Através de seus receptores de membrana VPAC 1 e 2, VIP

    influencia a atividade de diversas células do sistema imune. Conhecer a distribuição dos

    receptores VPAC é crucial para entender como VIP pode agir em diferentes células e

    tecidos. O baço é o principal órgão linfoide secundário, e abriga linfócitos T, B e

    macrófagos, que respondem de maneira antiinflamatória à inervação vagal colinérgica.

    Neste estudo, baços de camundongos neonatos provenientes de mães infectadas e não

    infectadas com ZIKV foram analisados por meio de imunohistoquímica para quantificar

    a presença dos receptores VPAC1 e 2, do receptor CD11b de linhagem macrofágica, e

    do receptor nicotínico colinérgico α7nAChR. Os resultados demonstram que a infecção

    materna por ZIKV provoca um aumento significativo do receptor VPAC 2 no baço dos

    neonatos. Inesperadamente, foi encontrada uma quantidade significativamente maior de

    megacariócitos no baço dos animais do grupo ZIKV+ quando comparados com PBS,

    demonstrando que a infecção materna por ZIKV+ influencia a dinâmica de populações

    hematopoiéticas na prole. Além disso, células precursoras de linhagem mastocitária

    foram encontradas no baço de ambos os grupos. A infecção materna por ZIKV+ causou

    uma diminuição significativa na expressão de VPAC 1 nos precursores mastocitários.

    Tomados juntos, estes dados evidenciam a importância da expressão diferencial dos

    recepores VPAC em células do sistema imune durante a resposta imunológica ao ZIKV.

    Mais estudos são necessários para desvendar a relação funcional dos receptores VPAC

    durante a infecção por ZIKV, de que forma VIP pode modular o comportamento das

    células aqui quantificadas, e quais as consequências para o desenvolvimento dos

    neonatos.


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  • Zika virus (ZIKV) is an emergent pathogen of the Flaviviridae family, transmitted by

    Aedes mosquitoes. In the last years, ZIKV has caused neurological abnormalities and

    Guillain Barré Syndrome (GBS) in adult individuals, and fetal developmental

    complications in pregnant women, including Congenital Zika Syndrome (CZS).

    Vasoactive intestinal peptide (VIP) is an antiinflammatory and imunomodulator peptide.

    Through its membrane receptors VPAC 1 and VPAC 2, VIP influences the activity of a

    diverse range of cells of the immune system. The distribution of VPAC receptors is

    crucial to understand how VIP can act in different cells and tissues. The spleen is the

    main secundary lymphoid organ, and houses T and B cells, and macrophages that

    respond in an antiinflammatory manner to cholinergic vagal innervation. In this study,

    newborn mice from ZIKV-infected and uninfected mothers were studied through

    immunohistochemistry to quantify VPAC1 and VPAC2, CD11b, which is a

    macrophage marker, and the nicotinic cholinergic receptor α7nAChR in the spleen of

    the offspring. The results demonstrate that maternal infection by ZIKV significantly

    increases the expression of VPAC 2 receptor in the spleen of newborn mice.

    Surprisingly, it was found a dramatic increase in the population of megakaryocytes in

    the spleen of ZIKV+ animals, when compared to the healthy group, suggesting that

    ZIKV maternal infection influences the behaviour of hematopoetic cells in the offspring.

    Nonetheless, mast cell precursors were found in the spleen of both groups PBS and

    ZIKV+. Maternal ZIKV infection caused a significant decrease in the expression of

    VPAC 1 in these mast cell precusors. Taken together, these data reveal the importance

    of the differential distribution of VPAC receptors in immune cells during the

    immunological response to ZIKV. Studies are needed to unreveal the functional relation

    of VPAC receptors during ZIKV infection, how VIP can modulate the behaviour and

    phenotype of cells in the spleen, and what is the functional consequences to

    development of the offspring.

2
  • JÚLIO PANZERA GONCALVES
  • A DELEÇÃO GENÉTICA DO RECEPTOR 4 DO TIPO TOLL ACARRETA EM AUMENTO DA POPULAÇÃO FOLICULAR OVARIANA E ALTERA A FERTILIDADE DE CAMUNDONGOS FÊMEAS ADULTAS

  • Orientador : PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FERNANDA RADICCHI CAMPOS LOBATO DE ALMEIDA
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • PATRICIA MARIA D ALMEIDA LIMA
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • Data: 21/10/2020

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  • Os folículos constituem a unidade funcional dos ovários, uma vez que proporcionam o microambiente necessário à ativação, crescimento e maturação dos oócitos. Vários estudos têm sido desenvolvidos buscando a elucidação da participação de diferentes tipos de ligantes e receptores na foliculogênese. O receptor Toll-like 4 (TLR4) é mais conhecido por seu protagonismo no reconhecimento de lipopolissacarídeos produzidos por bactérias. Em relação à reprodução feminina, o TLR4 é expresso por células cumulus murinas e participa da ovulação e da expansão do complexo cumulus-oócito (COC), interação materno-fetal e parto prematuro. Apesar desses fatos, o papel do TLR4 na fisiologia ovariana não é totalmente compreendido. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos da deleção genética de TLR4 na foliculogênese de camundongos e fertilidade feminina através de análises de cruzamentos reprodutivos, responsividade ovariana e quantificações foliculares em camundongos fêmeas adultas TLR4-/- (n = 79) e C57BL/6 (tipo selvagem - WT, n = 87). Foi observado que os casais com deficiência de TLR4 mostraram um número reduzido de filhotes por ninhada (p <0,05) em comparação com WT. Camundongos TLR4-/- apresentaram mais folículos primordiais (1334.0 ± 43.7 vs 1082.0 ± 28.8), primários (142.0 ± 2.7 vs 97.2 ± 2.6), secundários (71.0 ± 1.5 vs 53.1 ± 1.7) e antrais (22.5 ± 0.5 vs 16.0 ± 0.7) (p <0,05) e também maior taxa de recrutamento folicular (13% no WT vs 15% no TLR4-/-) (p <0,05) e menor taxa de atresia (0,95% no WT vs 0,66% no TLR4-/-) (p <0,05). Também foi recuperado um número menor (12.7 ± 2.3 vs 16.4 ± 4) (p <0,05) de complexos cumulus-oócito das tubas uterinas de camundongos TLR4-/- após a superovulação, e em casais heterozigotos, foi observada menor taxa de prenhez (37,5% vs 76,9%) (p <0,05) e porcentagem elevada de fetos com crescimento restrito (p <0,05) em fêmeas TLR4-/- quando comparado a fêmeas WT. Em conjunto, esses dados sugerem que o TLR4 desempenha um papel importante na regulação da foliculogênese murina determinando a reserva folicular ovariana e também, que sua deleção pode afetar o crescimento fetal e potencialmente diminuir a fertilidade feminina.


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  • Toll-like receptor 4 (TLR4) is best known for its role in bacteria-produced lipopolysaccharide recognition. Regarding female reproduction, TLR4 is expressed by murine cumulus cells and participates in ovulation and in cumulus-oocyte complex (COC) expansion, maternal-fetal interaction and preterm labor. Despite these facts, the
    role of TLR4 in ovarian physiology is not fully understood. Thus, the aim of the present study was to investigate the effects of TLR4 genetic ablation on mice folliculogenesis and female fertility, through analyses of reproductive crosses, ovarian responsiveness and follicular quantification in TLR4-/- (n=79) and C57BL/6 (wild type/WT, n=87). TLR4 deficient pairs showed a reduced number of pups per litter ( p < 0.05) compared to WT. TLR4-/- mice presented more primordial, primary, secondary and antral follicles (p < 0.05) and also a larger follicular recruitment rate ( p < 0.05) and a smaller atresia rate ( p < 0.05). A lower ( p < 0.05) number of COC was recovered from TLR4-/-mice oviducts after superovulation, and in heterozygous pairs, TLR4-/- females also showed a reduced pregnancy rate and an increased percentage of fetuses with restricted growth ( p < 0.05) when compared to WT. Altogether, these data suggest that TLR4 plays an important role in the regulation of murine folliculogenesis and in
    determining ovarian endowment. TLR4 deficiency may affect fetal growth and potentially decrease fertility, therefore, the potential side effects of its blockade has to be carefully investigated.

3
  • KARINE STHÉFANY SERPA AMARAL DIAS

  • Efeitos do uso de extrato etanólico de Ocimum basilicum no processo de cicatrização de feridas cutâneas em camundongos

  • Orientador : FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • PAULA VIEIRA TEIXEIRA VIDIGAL
  • Data: 11/12/2020

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  • A cicatrização de feridas cutâneas é um processo que envolve uma série de eventos, células e fatores, que visam o reparo do tecido que sofreu inicialmente um trauma ou lesão. Muitas pesquisas se concentram atualmente na busca por possíveis terapias e fármacos que possam contribuir no processo de reparo. As plantas medicinais são alvo de muitas pesquisas, visto sua gama de propriedades farmacológicas, incluindo estudos do uso das mesmas em feridas em modelos experimentais. O manjericão (Ocimum basilicum) é uma planta que vem sendo descrita com muitas propriedades, dentre elas anti-inflamatória e antioxidante. O objetivo do presente trabalho foi analisar os efeitos do uso intraperitoneal (i.p.) e administração tópica do extrato etanólico de Ocimum basilicum (EEOB) no processo de cicatrização de feridas cutâneas incisionais e excisionais em camundongos. Foram utilizados camundongos Swiss, divididos em grupos conforme tratamento e tipo de ferida. Nos animais que foram confeccionadas a ferida incisional, o tratamento foi realizado com EEOB intraperitoneal (i.p.) a 150 mg/Kg diariamente ou salina i.p., por 5 ou 7 dias pós-lesão, dependendo do grupo, e posterior eutanásia dos animais. Já nos animais que foram confeccionadas as feridas excisionais, o tratamento foi realizado nos grupos tratados com EEOB tópico a 38 mg/Kg na lesão esquerda e EEOB tópico a 100 mg/Kg na lesão direita, três vezes ao dia; enquanto que o grupo controle recebia salina tópica, sendo os animais posteriormente eutanasiados a 1, 3, 5 ou 21 dias após lesão e tratamento, conforme o grupo experimental. Posteriormente, as lesões passaram por processamento histológico e análise em microscópio, sendo que as lesões excisionais também eram avaliadas macroscopicamente antes da eutanásia. As análises histopatológicas nos animais com lesão incisional e tratados com injeção EEOB i.p. em relação ao grupo que recebeu salina i.p. diária, apontam para uma diminuição no número de leucócitos aos 5 dias e de mastócitos aos 7 dias pós-lesão. Em relação às feridas excisionais, as análises indicam que a 1 dia houve diminuição no número de leucócitos nos grupos tratados em relação ao grupo salina e diminuição de área do edema e tecido adiposo. Aos 3 dias, o grupo tratado com EEOB a 100 mg/Kg apresentou maior área da ferida macroscópica em relação aos demais grupos. Aos 5 dias, houve diminuição de novos vasos sanguíneos no grupo tratado com EEOB a 38 mg/Kg em relação ao salina; e o grupo EEOB a 100 mg/Kg apresentava menos tecido adiposo em relação aos outros grupos e maior área de tecido de granulação. E por fim, aos 21 dias, a reepitelização foi completa na maioria dos animais de todos os grupos, e a deposição de colágeno na região da cicatriz era melhor nos grupos tratados, com mais semelhança à pele intacta adjacente à área de lesão. Os resultados apontam para uma ação anti-inflamatória do EEOB nos grupos que receberam o mesmo, principalmente na fase mais inicial do processo. Além disso, o extrato pode ter influenciado na melhor deposição de colágeno na fase de remodelamento tecidual. Sugere-se que o EEOB apresenta possíveis propriedades terapêuticas eficazes no tratamento de cicatrização de feridas cutâneas e mais estudos aprofundados sobre como é a atuação das vias de administração do EEOB são necessários para validar um possível tratamento à base da planta para a patologia em questão.


  • Mostrar Abstract
  • The healing of skin wounds is a process that involves a serie of events, cells and factors, aimed at repairing the tissue that initially suffered a trauma or injury. Many researches are currently focused on the serach for possible therapies and drugs that can contribute to the repair process. Medicinal plants are the subject of much research, given their range of pharmacological properties, including studies of their use in wounds in experimental models. Basil (Ocimum basilicum) is a plant that has been described with many properties, including anti-inflammatory and antioxidante. The aim of the presente work was to analyze the effects of intraperitoneal (i.p.) and the topical administration of the ethanolic extract of Ocimum basilicum (EEOB) in the healing process of incisional and excision cutaneous wounds in mice. Swiss mice were used, divided into groups according to treatment and type of wound. In the animals that made the incisional wound, the treatment was performed with intraperitoneal EEOB (i.p.) at 150 mg/Kg daily or saline i.p., for 5 or 7 days post-injury, depending on the group, and later the animals were euthanized. In the animals that made the excision wounds, the treatment was carried out in the groups treated with topical EEOB at 38 mg/Kg in the left lesion and topical EEOB at 100 mg/Kg in the right lesion, three times a day, while the control group received topical saline; the animals were subsequently euthanized 1, 3, 5 or 21 days after injury and treatment, depending on the experimental group. Thereafter, the lesions underwent histological processing and microscopic analysis, and the excisional lesions were also assessed macroscopically before euthanasia. Histopathological analyzes in animals with incisional lesion and treated with EEOB injection i.p. in relation to the group that received saline i.p. daily, point to a decrease in the number of leukocytes at 5 days and mast cells at 7 days post-injury. Regarding excision wounds, the analysis indicates that within 1 day there was a decrease in the number of leukocytes in the treated groups in relation to the saline group and a decrease in the area of edema and adipose tissue. At 3 days, the grouptreated with EEOB at 100 mg/Kg showed a larger area of macroscopic wound compared to the other groups. At 5 days, there was a decrease in new blood vessels in the EEOB treated group at 38 mg/Kg compared to saline; and the EEOB group at 100 mg/Kg had less adipose tissue compared to the other groups and a greater area of granulation tissue. Finally, at 21 days, reepithelization was complete in most animals of all groups, and collagen deposition in the scar region was better in the treated groups, with more similarity to the intact skin adjacent to the lesion area. The results point to an antiinflammatory action of EEOB in the groups that received the extract, mainly in the initial phase of the process. Furthermore/besides, the extract may have influenced the better collagen deposition in the tissue remodeling phase. It is suggested that EEOB has potentially effective therapeutic properties in the treatment of skin wounds healing and further in-depth studies on how the EEOB administration pathways work are needed to validate a possible plant-based treatment for the pathology in question.

2019
Dissertações
1
  • RAISA MILEIB SANTOS OLIVEIRA
  • EFEITOS DA TOLERÂNCIA IMUNOLÓGICA AO COLÁGENO NO REPARO DE LESÕES CUTÂNEAS EM CAMUNDONGOS

  • Orientador : CLAUDIA ROCHA CARVALHO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ANDREZZA FERNANDA SANTIAGO
  • CLAUDIA ROCHA CARVALHO
  • FLAVIA CARMO HORTA PINTO
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • Data: 12/08/2019

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2
  • JÉSSICA FERNANDA FONSECA MACHADO
  • Avaliação de dois protocolos de cripreservação utilizando diluidores e meios capacitantes comerciais específicos para sêmen de Canis Lupus Familiaris

  • Orientador : PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • MEMBROS DA BANCA :
  • LUCIANO RIVAROLI
  • PAULO HENRIQUE DE ALMEIDA CAMPOS JUNIOR
  • TÂNIA MARA SEGATELLI
  • Data: 13/09/2019

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3
  • NATHALIA NASCIMENTO VASCONCELOS
  • OS EFEITOS DE DIFERENTES MODALIDADES DE TREINAMENTO DE ALTA INTENSIDADE NO CORAÇÃO E CÉREBRO DE RATOS COM ISQUEMIA CEREBRAL

  • Orientador : LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ITA DE OLIVEIRA SILVA
  • LAILA CRISTINA MOREIRA DAMAZIO
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • Data: 06/12/2019

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4
  • ROSIANE APARECIDA DE CASTRO COSTA
  • Avaliação da aplicação de nanopartículas de ouro e biogel de colágeno associados aos efeitos sistêmicos da tolerânica oral no repao de feridas em pele de camundongos

  • Orientador : PAULA PEIXOTO CAMPOS LOPES
  • MEMBROS DA BANCA :
  • PATRICIA MARIA D ALMEIDA LIMA
  • PAULA PEIXOTO CAMPOS LOPES
  • RAQUEL ALVES COSTA
  • Data: 17/12/2019

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  • Avaliação da aplicação de nanopartículas de ouro e biogel de colágeno associados aos efeitos sistêmicos da tolerânica oral no repao de feridas em pele de camundongos


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  • Evaluation of the application of gold nanoparticles and collagen biogel associated with the systemic effects of oral tolerance in the repair of skin wounds in mice

5
  • JORDANA FERNANDES RESENDE
  • Análise do efeito do HIIT na função e morfologia cardíaca de ratos wistar (Rattus novergicus)

  • Orientador : LUCIANO RIVAROLI
  • MEMBROS DA BANCA :
  • ALBENÁ NUNES DA SILVA
  • LUCIANO RIVAROLI
  • PRISCILA TOTARELLI MONTEFORTE
  • Data: 18/12/2019

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